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标题: 玻璃培养瓶能放到-80度冰箱吗 [打印本页]

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-21 16:59 标题: 玻璃培养瓶能放到-80度冰箱吗

我的细胞明天要提蛋白，但是蛋白裂解液污染了，工作人员都休息了，得到周一才能配，我要把培养瓶带细胞一起放在-80冰箱里，等周一再提蛋白，不知道瓶子会不会冻裂呀？

作者: babyzeng 时间: 2011-1-21 18:23

Nope! 肯定会冻裂。

作者: tangyvhuang 时间: 2011-1-21 19:05

瓶子肯定会裂的，还是把细胞收了吧，接种大一些瓶子或者传两个瓶子吧，

作者: daviddow 时间: 2011-1-21 20:03

能吧，我把安剖瓶曾经放在液氮中冻存细胞。

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-21 21:06

回复 daviddow 的帖子, X: {7 v+ A5 S r

有次冻细胞，冻存管一下暴了四管，老响了，冻存管都碎了，吓得我都不敢冻细胞了，拿在手里跟拿炸弹似的，太恐怖了！

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-21 21:07

回复 tangyvhuang 的帖子2 M: A* z( W( k% A% X

我是加完刺激一周，提蛋白的，不能传的。

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-21 21:09

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我问别人有冻的，大都不会裂的，不过也有裂的时候，我打算冻上了，希望我不要那点背。

作者: FreeCell 时间: 2011-1-21 22:27

进口药用西林瓶没问题，这种瓶子专门用来做药品冻干的。

作者: xiao6tao 时间: 2011-1-21 22:35

为什么不收集到大的ep管

作者: 张也行 时间: 2011-1-21 23:51

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没有遇见过楼主的情况，不过为什么不能收到其他的容器里（比如塑料的培养瓶中），过年休息后再做啊？呵呵......

作者: fananran2003 时间: 2011-1-22 08:42

你可以先把细胞收集起来，离心管直接-80冻存，以后用也可以，我那么干过哈

作者: fananran2003 时间: 2011-1-22 08:43

吹打下来，ep管离心收集，-80 冻存就哦了& e6 _+ E9 T) r

作者: daviddow 时间: 2011-1-23 08:59

为什么不收集到大的ep管?对

作者: kim2010 时间: 2011-1-23 16:56

最好用EP管

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-23 20:45

回复 kim2010 的帖子0 c7 {; I: `# {! a' K& y
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因为没有裂解液了，没法用刮子刮，所以只能连瓶一块冻起来了。

作者: gaorongbest 时间: 2011-1-24 08:49

玻璃的细胞培养皿不会冻裂，我做过；你的瓶子为什么不先放4度或-20度呢？为什么必须放-80度啊？

作者: siyue13 时间: 2011-1-24 11:17

收集到别的瓶子吧，玻璃的好危险

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-24 19:30

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要提蛋白用的，蛋白得保存在-80才行

作者: gaorongbest 时间: 2011-1-25 08:32

回复 yangjie0329 的帖子, o0 I8 x7 ?% y0 Y
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不是吧,我们以前提蛋白的时候直接把细胞上清(蛋白分泌到培养基中),然后放在4度,我们再用试剂盒直接提取就行了,蛋白应该不会失活的吧,我就不明白你们为什么必须保存在-80度了.可以解释一下不?谢谢了

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-25 15:56

回复 gaorongbest 的帖子
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你那个检测的是分泌型蛋白才取的上清吧，而且你是直接就提了，所以放在4度，我们不立即用的话就把培养基放在-20保存。我是要提取细胞内蛋白，不是分泌到培养基里的蛋白，要用来做Western Blot的，提出的蛋白要放-80保存，这样保存的时间长点，但要分装避免反复冻存，要不蛋白就不好了。因为没有细胞裂解液了，就暂时把细胞冻在-80了，等有裂解液后，直接加入，再用刮子刮下来，就可以提蛋白了。

作者: yangjie0329 时间: 2011-1-25 23:54

实验证明玻璃培养瓶可以放在-80里的，我冻存了九瓶都没裂，只是转移到EP管离心时，有一个EP管竟然裂了，蛋白全丢了，真是崩溃呀，我要哭了，半月的努力白费了，中间少个浓度其他的也没法对比了，想提完蛋白过两天就回家过年呢，这下年都不让好好过了。。

作者: happybb 时间: 2011-2-1 16:10

建议改用UHMWPE（超高分子量聚乙烯）制造的瓶子好像也不贵！但很可靠！如果坚持要培养瓶建议先抹上层凡士林！前辈有人教的不过不知如何！

作者: ayeqiu 时间: 2011-2-9 13:30

我都是经常将细胞培养瓶放在-80度反复冻融的，没出现过裂痕。

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