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标题: 关于离心的问题 [打印本页]

作者: 柏林小杨 时间: 2011-1-26 10:02 标题: 关于离心的问题

用淋巴细胞分离液分离细胞时离心机的加/减速度都调到最低，那洗细胞的时候，离心机的加速度和减速度调到多少，离心效果会比较好，对细胞的损伤较小呢？

作者: deron 时间: 2011-1-26 11:09

洗细胞——对多数细胞来讲，加速和减速调到多少无所谓，不会对细胞产生损伤。不同的加速度花费时间不同，实验过程中当然是花费时间越少越好，所以都把加速调到最高。

作者: 皮搋子 时间: 2011-1-26 11:13

离心的时候只是在分离液分离的时候需要特别注意加减速的，洗细胞的时候完全无所谓，只要你选择的转速合适就不会对细胞造成很大损伤。我洗的时候都是调到最大加速度的

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作者: lgh1986 时间: 2011-1-26 13:07

你对这个缓加速缓减速的理解不够深刻，快加快减的话由于加速和减速过快而导致的震荡会打乱由于密度的不同而出现的分层效果，缓加缓减的目的是为了使分离液和白膜层的界限清晰，以免误吸过多的分离液，对细胞生长不利，白膜层上面的培养基或PBS多吸点无所谓了，洗涤细胞的时候就没必要缓加缓减了，因为目的是把细胞完全沉底

作者: 清影 时间: 2011-1-27 08:47

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楼上的解释很透彻，谢谢！但是我个人认为快加缓减多细胞损伤小，当然还需做一些试验来支持！

作者: kingchen81 时间: 2011-1-27 13:30

加速肯定是调到最高了。减速的话，FICOLL的时候，要减慢，大概3-4这样（不过不同离心机刹车不同，我用的是BECKMAN的）如果减得太多，比如0的话，那要很久很久才能停下来，等不住。而且细胞放在ficoll里太长时间也不好。后面洗涤，其实还好。

作者: 柏林小杨 时间: 2011-1-27 15:16

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为什么我有的时候洗细胞的时候，离心管下面是一团白雾，是离心机的问题吗？" a3 B) ?+ W( W7 I5 @

作者: 柏林小杨 时间: 2011-1-27 15:21

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好的谢谢

作者: 金戈 时间: 2011-1-28 23:08

回复柏林小杨的帖子
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不是离心机的问题。是细胞破碎后和血清蛋白的成分尤其是细胞浓度大的时候。所以每次重悬细胞要先加少量培养基充分吹散以后，再加更多的培养基定容。

作者: lunyuyuanxj 时间: 2011-2-11 19:03

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减速是为了保持界面清晰，在吸取白膜层时免不了要吸上或多或少的分离液，洗涤两次后就基本清除了，应该不会对细胞造成多大影响。

作者: 柏林小杨 时间: 2011-2-15 09:00

回复 lunyuyuanxj 的帖子8 } }6 f0 v u& Z! P" S

好的

作者: 湖南干细胞 时间: 2012-11-6 09:31

回复 lgh1986 的帖子( O# o: d" {. @+ ?; O

很多文献都认为转速太快对细胞损伤很大，快加快减对细胞有没有影响？如果想分离组织块和细胞，什么样的转速比较适合？能给个建议不？

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