干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 请问细胞培养液中的谷氨酰胺在-20度中会被破坏或消失吗? [打印本页]

作者: 蒲公英2012    时间: 2011-2-21 09:45     标题: 请问细胞培养液中的谷氨酰胺在-20度中会被破坏或消失吗?

本帖最后由 细胞海洋 于 2011-2-21 09:49 编辑
+ x# H$ q. p! c
% X. h. W! l" l! l2 z* D请问细胞培养液中的谷氨酰胺在-20度中会被破坏或消失吗?
作者: nydfy    时间: 2011-2-21 11:15

不会!
作者: jefferson    时间: 2011-2-21 11:22

L-谷氨酰胺长期保存本身就要求在-20度.
作者: luoziwei    时间: 2011-2-21 21:36

好像会有一些沉淀悬浮在培养液中
作者: fish_zbw1985    时间: 2011-2-21 22:46

回复 luoziwei 的帖子: R: n! }+ z0 `+ j' T
7 \; V" b5 b! o: h! H( C& M
冻住后再解冻有沉淀很正常,多吹吸几次混匀等溶液温度上来就溶解了
作者: shuishanglingzi    时间: 2011-2-22 08:21

L-谷氨酰胺配好后本身就要求保存在-20度。解冻后会发现有沉淀,只要混匀加入培养基内使用就行了。假如这些培养基一次性未用完,最好也要保存在-20度。6 c7 Q; M7 c2 D( s  {0 c0 M

作者: 呼吸    时间: 2011-2-22 08:45

L-谷氨酰胺配好后本身就要求保存在-20度。冻住后再解冻有沉淀很正常,多吹吸几次混匀等溶液温度上来就溶解了,加入培养基后,如果不能一次用完,放置一段时间后,要重新补加L-谷氨酰胺。
作者: 清影    时间: 2011-2-23 09:06

回复 shuishanglingzi 的帖子
+ }5 j% p5 h5 L: w. o! A& k8 p3 `, M: \' |  z- l( r
不建议一次性配制很多加谷氨酰胺的培养基,两周要是用不完还是要补加的!再者培养基反复冻融会破坏成份。我们的做法是:配制好的谷氨酰胺分装后-20度保存,培养基使用前现用现加
作者: shizhu198511    时间: 2012-2-21 17:01

本帖最后由 shizhu198511 于 2012-2-21 17:02 编辑
+ k; G) u9 H- r# z) q/ @
清影 发表于 2011-2-23 09:06 / _/ G( m- [8 {; @8 k9 M. X3 W9 u* z0 q& T
回复 shuishanglingzi 的帖子
! Z4 r0 R3 i1 f2 B  q( n3 t9 K- x. ?2 t) ]0 x
不建议一次性配制很多加谷氨酰胺的培养基,两周要是用不完还是要补加的!再者 ...

# M. ~8 U. [/ |2 ~/ g+ f: j$ |% v; J
能否告知一下,谷氨酰胺怎么配的,谢谢!
作者: xbs530515    时间: 2012-2-21 20:45

谷氨酰胺在-20度比较稳定,不会降解,但在4度不太稳定,大概两周就会降解的很厉害。对于一般的细胞要求不高,影响不大。但有些细胞要求较高的话,就需要补加谷氨酰胺了,可用PBS配置成100X的浓缩液,1ml/管分装在EP管内放于-20度长期保存,使用时,在100ml培养基中加入1ml即可,需要注意的是,在解冻后会有沉淀析出,但加入培养液稀释后即可溶解。
作者: shashou_com    时间: 2012-2-26 22:16

由于小分子蛋白和DNA/RNA的冰点在-20℃左右,而电压不稳可导致-20℃冰箱温度经常变化,故长期保存,不建议存放在-20℃环境。具有生物活性的制剂保存于-80℃环境,其生物活性的稳定性要比-20℃环境高10倍以上。常用者,可置于4℃环境保存。取出时,尽可能置于冰中,保持低温状态。
作者: Tim    时间: 2012-2-26 22:24

        由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4℃下放置1周可分解50%,故应单独配制,置于-20℃冰箱中保存,用前加入培养液。加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,应重新加入原来的谷氨酰胺。一般培养液中谷氨酰胺的含量为1~4mmol/L。可以配制200mmol/L谷氨酰胺液贮存,用时加入培养液。配制方法为,谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水加至100ml即配成200mmol/L的溶液,充分搅拌溶解后,过滤除菌,分装小瓶,-20℃保存,使用时可向100ml培养液中加入1ml谷氨酰胺溶液。
作者: holywater    时间: 2012-2-28 10:09

本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-28 10:38 编辑
( G9 v3 q$ ?! ~6 a6 ~# @5 h
, o9 ~0 p- z6 ^2 x6 D8 Z谷氨酰胺本身很不稳定。。。实在是不建议配成溶液放置。建议用前现用现配!
作者: holywater    时间: 2012-2-28 10:39

别怕浪费多配一点,谷氨酰胺又不贵,宁可丢弃一点也要保证现用现配!
作者: ying    时间: 2012-2-29 14:40

我们是买了gobco的然后分装的。化完冰会有一些粉粉,再晃一下就溶了。包装上面有保质期。
作者: holywater    时间: 2012-2-29 15:34

谷氨酰胺溶液状态不稳定--现配很困难吗?




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5