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标题: 请问MSC从梭形变化到扁平状是分化了还是老化了？怎样让其长期保持在梭形状态？ [打印本页]

作者: boo1019 时间: 2011-2-21 15:10 标题: 请问MSC从梭形变化到扁平状是分化了还是老化了？怎样让其长期保持在梭形状态？

请问MSC从梭形变化到扁平状是分化了还是老化了？怎样让其长期保持在梭形状态？为什么原代细胞就会变扁平，会是什么原因引起的呢？

作者: yunshi503 时间: 2011-2-21 23:13

应该是老化了。“娇贵”的干细胞，在许多因素下都会老化，如不合适的培养条件、过多的血清、培养液的温度、细胞融合度等都会使细胞老化。也有可能细胞来源揭示老化的。

作者: 清影 时间: 2011-2-22 08:47

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感觉是老化了，原代细胞是不可能分化的！造成的原因是培养条件的改变，比如培养时间过长，培养基改变，生长密度过大等

作者: regene 时间: 2011-2-22 15:49

老化的可能性比较大，但是MSC也有非梭形的，其生长速度稍慢，但仍具有分化能力。先看看你的细胞增殖能力如何吧，细胞增殖能力强则可以继续培养、传代。

作者: hanbing 时间: 2011-2-28 00:03

我也认为是老化，开始是典型梭形，慢慢表达变宽！

作者: boo1019 时间: 2011-3-4 11:39

又没什么办法让MSC保持梭形的状态呢，哪些细胞因子可以抑制其老化呢？

作者: lydia033rj 时间: 2011-3-14 14:09

加点bfgf可以延长干细胞的活力，没那么快老化

作者: 文武庙 时间: 2011-3-22 22:49

我做人的msc，一直用EGF因子，感觉促进生长抑制分化的能力还不错

作者: mbpsky 时间: 2011-3-24 11:06

原代培养细胞形态是柳叶形的、梭形的，传代之后就变成银杏叶形、白菜叶形的了，细胞核也变得很不规则.....

作者: sdwzg119 时间: 2011-3-24 16:58

我养了7代了，看上去细胞也没那么标准了，也是扁平状。

作者: hailanlanyj 时间: 2011-3-24 18:33

我也有同感，细胞现在大部分成扁平宽大的了，不过我没有加任何因子

作者: open1230 时间: 2011-3-27 09:47

最初时是纺锤形的，但随着传代次数增多，细胞渐渐变得不规则！

作者: xiao6tao 时间: 2011-3-27 22:20

同意楼上但是：MSC其实是生活在一个低氧的微环境,1%-7%左右，这个浓度和常压下相比，低氧可以延缓其衰老，延长寿命。" r8 F5 _3 p! M0 y! S* Q& O$ t
我们一般在常压下培养MSC，所以会出现过早衰老，甚至发生转化。

作者: 寒小溪 时间: 2011-3-29 23:37

我的也是传代的没有原代梭了 1 我觉得不要给予刺激很重要原代条件怎么样就怎么样换液传代条件都不要变化比如原代没加那传代以后也不要加了刚开始用什么瓶子以后还用什么瓶子总之前后给予同样的条件 2传代消化很重要时间五分钟不要太长不要离心
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作者: 寒小溪 时间: 2011-3-29 23:39

不好意思没说清楚加的是因子原代加传代换液也加原代没加传代换液也不加哈

作者: fengxuan 时间: 2011-3-30 08:56

回复 boo1019 的帖子9 d: n) h- z( g, G7 d4 O- ?; ]
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你养的MSC 第几代开始变得？

作者: yunshi503 时间: 2011-4-4 22:06

看来复制性衰老是个大问题对干细胞的体外培养

作者: daviehe 时间: 2011-4-4 23:48

大家传代消化细胞后不离心直接培养吗？困惑！

作者: 一一 时间: 2011-4-6 09:58

干细胞老化表现：% J- V1 x1 i9 f$ n
①细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒，表示细胞开始出现老化；: N; {0 e3 I- `
②细胞胞浆内出现空泡，则表明该细胞已老化或者已经开始分化（在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的）；
③细胞立体感逐渐消失，细胞间的间隔不清，部分细胞扁平状，细胞的形状趋向多样；' T; m1 @/ n7 i8 G, M( t
④贴壁性减退，出现一些漂浮的细胞；" Z! U. |- N1 R5 h$ q! f7 u
⑤部分分泌强的细胞分泌物增多，细胞表面会比较脏；
⑥细胞增殖速度明显下降，分裂相的细胞明显减少。" j0 L' J' W* i- R" B- l
预防：
①合适的接种密度，有些细胞需要一定的接触，通过分泌因子，进行增殖，当过于稀疏，增殖会缓慢，出现老化；
②传代汇合度：过晚传代，细胞出现接触抑制，活力下降，贴壁慢，增殖慢，出现老化；" L0 Z! M: e! G$ k* ]% L2 I3 I- U( X
③合适的血清和培养基，这个就不用说了吧9 p1 ?8 Z6 W( J5 ^0 F9 A( D
④必要的因子：如bFGF，保持梭形，还有抗氧化的物质如维C；: y6 S9 J4 l Q- U8 ^( r0 E& o
一旦细胞增殖慢，就会容易出现老化，一个细胞的老化会分泌很多东西对其生长环境影响，导致出现老化现象。
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作者: 一一 时间: 2011-4-6 10:11

培养体系应该始终如一，不能换液时不加，培养加。消化是否离心，是根据你加的胰酶量，还有是否含EDTA，如果加的胰酶量比较大如1 ml左右，还有EDTA，我建议还是要离得，如果细胞比较娇贵，那就低转速，时间可稍微延长，我们都是 1000 rpm/min ，5 min。比如你的消化下来液体比较多，也就是在离心管里液面较高，就应适当加长时间，而减小转速。

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