干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 求助：脐带间充质干细胞组织贴壁法培养问题 [打印本页]

作者: susuloveq 时间: 2011-2-21 22:10 标题: 求助：脐带间充质干细胞组织贴壁法培养问题

脐带间充质干细胞组织贴壁法培养4-5天后，观察看到有许多的圆的细胞贴壁，我看到有回帖说要等十几天才长起来，我想知道现在的圆的细胞是脐带干细胞吗？还有中途需要换液吗？

作者: fengxuechunyang 时间: 2011-2-21 22:22

现在圆的细胞是血细胞居多；中间当然要换液的，3天换一次，前3次半量换液；以后全量换液，出细胞一般在12-14天

作者: susuloveq 时间: 2011-2-21 23:41

回复 fengxuechunyang 的帖子; D& M# r. r7 X& w- G ?
* Q1 i9 v! G+ `* b1 ~8 q
非常感谢！！！那半量换液有什么注意的地方吗？？

作者: 清影 时间: 2011-2-22 08:31

回复 susuloveq 的帖子# n9 m8 j1 W, j7 L T6 d

我感觉就是动作轻一些，刚爬出来的细胞需要一个相对安静的环境贴壁生长。加培养基时在组织块上面加，动作要缓慢

作者: susuloveq 时间: 2011-2-22 11:20

回复清影的帖子. Q7 |6 x$ V9 z# P' ]% M

好的，谢谢咯，你也是在培养脐带干细胞吧，我现在在摸索中，大家多交流下拉！！

作者: 柏林小杨 时间: 2011-2-22 16:28

回复 susuloveq 的帖子1 P$ I# i i* w
3 F, p8 z5 k) w# _( R! x
请问你的组织块是怎么处理才贴在板子上的，为什么我的组织块都飘起来了，而且20多天也不见细胞爬出来？？？

作者: 柏林小杨 时间: 2011-2-22 16:31

回复 susuloveq 的帖子6 B) H& a8 @$ v0 m( L- n
( N" U& H; r% z; \; B4 t
即使组织块不飘起来 20多天也没爬出细胞，是我的培养基有问题吗？我用这个培养基养的酶消化的MSC 生长的挺好的啊？

作者: deshenglll 时间: 2011-2-22 16:46

回复柏林小杨的帖子8 \: ?6 J0 `4 n+ K% |# \

是不是培养基加多了啊

作者: tangyvhuang 时间: 2011-2-24 00:11

柏林小杨发表于 2011-2-22 16:28
?+ X$ I7 V1 \. b- N$ L回复 susuloveq 的帖子
( [- K. [9 J+ a1 A( T
Y, u9 V2 l( S: J# B/ Z# s请问你的组织块是怎么处理才贴在板子上的，为什么我的组织块都飘起来了，而且20多天 ...

对于脐带组织，没做过组织块的培养，但是其他组织都做过组织块的培养，说说大家讨论一下吧，我一般是小块在培养皿底拉丝，总有一块会贴上，然后再组织块四周小心的滴加一滴培养基，放入培养箱，第二天再不加一点培养基，如果没漂的话，就多加培养基，三天换一次液吧，十来天出结果

作者: 柏林小杨 时间: 2011-2-24 09:10

回复 tangyvhuang 的帖子
9 z; M1 l- }1 u; `
好的我今天试试！

作者: 柏林小杨 时间: 2011-2-24 09:12

回复 deshenglll 的帖子
; y; r4 G$ h: M* _/ o$ ~# H9 k2 o" g
最起初加培养基的时候，就是在组织块周围加一小滴啊！

作者: susuloveq 时间: 2011-2-24 13:10

回复 tangyvhuang 的帖子8 j/ H8 b5 l) k2 x" v

小块在培养皿底拉丝?怎么拉？

作者: deshenglll 时间: 2011-3-16 11:10

谢谢

作者: chb611301 时间: 2011-3-16 11:36

细胞爬出或爬不出和组织块是不是贴在底下，没有太大的关系，这和脐带来源也有很大关系，有的脐带你把羊膜剥去，再出去血管后基本没有多少基质成分在了，肯定细胞就会少。但是再少也因该在10天左右就有。我们做的4天就看到了。如果血细胞太多了，那在剪碎之前应该好好清洗脐带，处理干净后再开始分离。然后还应该摸出一个合适的接种浓度才对！

作者: 干细胞工作站 时间: 2011-3-25 00:49

脐带组织块培养MSC很省事的，组织块剪成小块直接放在培养皿或瓶加适量的培养基，5%血清，关键是培养皿与瓶，玻璃的出来的很慢，塑料的好些，要是处理过的塑料皿与瓶一般三天就出来了

作者: sdwzg119 时间: 2011-3-28 14:06

我们组织块直接培养用眼科剪把组织剪碎，碎成小块，好多文章上说倒置几十分钟到几个小时的都有，反正要放置一段时间，让组织贴壁牢靠了，反正我们怕贴壁不牢靠都是倒置好久以后才加培养基的，细胞一般要10几天长出来，三天一换液，前几次可以半换液~

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)