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标题: 成纤维细胞的电转 [打印本页]

作者: lorey 时间: 2011-2-28 10:17 标题: 成纤维细胞的电转

将同样的质粒电转到两个不同的成纤维细胞系，运用同样的程序，一个很好，一个死亡，有那些原因造成这样的结果呢？
注：成纤维细胞本身生长很好的。

作者: exin11 时间: 2011-2-28 12:58

最好是有图片！！
步骤也好！
以前质粒转染出现过这些原因导致失败的：: m7 Z9 j& }4 S0 a, z0 p5 ]2 w
HBSS的ph，不同细胞系所需的ph条件不同，须事先验证（做一梯度）；2 h' A1 i* b- ^; H
细胞系的代数。
其他的原因没出现过。

作者: starlancer 时间: 2011-2-28 19:22

回复 lorey 的帖子 _. u9 \. R; q

不好说。对于不同细胞系，我觉得关键是摸索电转条件，不知道你的条件是不是都是确保没有问题的。可能性最大的还是电转条件的问题。我觉得对于成纤维细胞系这种细胞，完全不用电转这么麻烦，要摸索条件而且致死率有点高，直接脂质体或者病毒转染多方便。

作者: lorey 时间: 2011-3-2 09:34

回复 exin11 的帖子0 S5 B% T& O3 b: x( ` f

谢谢了，是让别人帮忙做的。按照很成熟的一套方案进行的。电极液是老师配的，可能与买的不太一样吧！细胞系是第4代。

作者: lorey 时间: 2011-3-2 09:35

回复 starlancer 的帖子1 ^' y- H$ v- Z
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谢谢了。我们的质粒最好电转才行。条件也算是成熟吧，是否是由于我的细胞不好了呢？

作者: starlancer 时间: 2011-3-2 09:56

回复 lorey 的帖子9 O: T% o$ f& L: U7 c5 r1 `

不好说，我觉得是电转条件的可能性大一些，不同细胞系的条件都是不一样的。你们原来转染这个细胞系的时候效果如何，如果原来这个条件就可以的话，那就可能是细胞的问题了

作者: cony 时间: 2011-3-8 21:46

不同细胞系，用同一电转条件，当然有不同的效果。

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