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标题: ips细胞出来之后的关于内外源性基因的鉴定 [打印本页]

作者: wangyimei 时间: 2011-3-2 13:02 标题: ips细胞出来之后的关于内外源性基因的鉴定

大家好，想请教一下：就是ips出来之后，需要验证一下我们导入的外源基因（譬如说是导入的oct4,sox2,lin28,nanog)失活而其相对应的内源的多能性基因重新表达，那外源导入的基因; v& X. h- b+ S$ k4 |5 s4 L s; T
对应的特异性的引物就是我们导入的基因的片段，我一直不明白的是那所谓的内源性基因的表达所用的引物是怎么确定的，怎么区别内源性的还是外源性的啊？

作者: wxyWXY 时间: 2011-3-2 19:02

外源基因表达引物设计一条引物设计在质粒载体上另一条设计在oct4上
内源基因表达引物设计两条都在多能性基因上

作者: wangyimei 时间: 2011-3-3 18:56

你好楼上的，能不能说的更详细些，我没看懂

作者: 大刀无敌 时间: 2011-3-3 21:00

他的意思说内源的引物比如 oct4 你就在oct4上设计外源的质粒是oct4基因本身+一段载体你设计外源的时候一段引物设计在载体上这样这个引物就只能检测外源而不能检测内源的了。

作者: wangyimei 时间: 2011-3-4 13:48

啊，这样

作者: rwm 时间: 2011-3-5 15:48

外源基因表达引物设计一条引物设计在质粒载体上,一般都是启动区上，另一条设计在oct4上。
内源基因表达引物设计两条都在多能性基因上，一般在5' 或3'非编码区，因为这些序列是不会出现在病毒载体上的，是内源mRNA上的。

作者: wangyimei 时间: 2011-3-6 12:07

恩，好的，谢谢你！

作者: gact 时间: 2011-4-14 10:47

恩，，和我猜测差不多。

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