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标题: 消化除了用胰酶还有其他方法么？ [打印本页]

作者: taoli10000 时间: 2011-3-4 19:38 标题: 消化除了用胰酶还有其他方法么？

实验室消化细胞一般都用胰酶，最近在考虑做干细胞的分化，需要做免疫试验，要用到PECAM抗体，但是看了一篇文献讲用胰酶消化对这个抗体的效果会有影响，真是一个打击啊!该怎么办呢？还有其他的消化方法么？

作者: 金戈 时间: 2011-3-4 20:46

回复 taoli10000 的帖子
( W3 ^' B W: f( r1 ?
那就用刮刀吧。
有一种办法可以试试。只用EDTA? 不知道行不行，我觉得可以试试。最保险的就是用刮刀吧

作者: zhenhua 时间: 2011-3-4 20:54

细胞刮

作者: 皮搋子 时间: 2011-3-4 21:06

用细胞刮刀是个好办法。
你也可以试试这个方法：
1.弃掉培养液，用PBS洗2次；. w+ G. N8 Y' k. T) |# I
2.在4度冰箱放置20min后取出；
3.加入适量PBS吹打，后续步骤同消化法。

作者: 皮搋子 时间: 2011-3-4 21:07

用细胞刮刀是个好办法。
你也可以试试这个方法：, _9 c ~0 k. W! `! |
1.弃掉培养液，用PBS洗2次；) O5 ]& Q; l& I
2.在4度冰箱放置20min后取出；" M l' Q; X0 D( h2 u9 a
3.加入适量PBS吹打，后续步骤同消化法。

作者: tangyvhuang 时间: 2011-3-4 21:20

细胞刮刀

作者: ambassador 时间: 2011-3-4 22:15

皮搋子发表于 2011-3-4 21:07
% S6 S" P0 f4 k S' \用细胞刮刀是个好办法。
1 Y" W" ?( u) |( B5 X你也可以试试这个方法：; i$ ^+ x, y% y E2 H4 ?( E
1.弃掉培养液，用PBS洗2次；

& [& i% Q- X4 ^! Y" c2 _3 V; c" \" f
用PBS不停地吹打就能消化下来吗？？

另外能传一张细胞刮刀上来看看不？怎么个操作法？

作者: cookiezhang 时间: 2011-3-4 23:36

Accutase细胞分离剂

作者: linchee 时间: 2011-3-5 10:46

我们这边有人是用胰酶消化以后再用细胞刮刀刮的，单用EDTA怎么会消化的了呢？它只是一种金属离子螯合剂呀，贴壁细胞的胶原蛋白什么的还得靠胰酶来消化吧。直接刮会不会损伤更大啊

作者: linchee 时间: 2011-3-5 10:48

cookiezhang 发表于 2011-3-4 23:36
% {! _& x1 a- t& X$ ~; SAccutase细胞分离剂

6 u# f1 U4 K. O2 a1 A
这个貌似可以的吧，没用过

作者: fengxuan 时间: 2011-3-5 11:47

细胞刮

作者: 皮搋子 时间: 2011-3-5 13:50

回复 ambassador 的帖子6 q: K1 j7 @, m( @ o+ K
2 _8 C8 `8 A$ n; J
能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能吹打下来了

作者: ambassador 时间: 2011-3-7 09:21

皮搋子发表于 2011-3-5 13:50 7 x  s0 O; ~& C5 O
回复 ambassador 的帖子
- A% W* Y  o8 C" K, X; y- l
- I+ a+ [7 b' U  T" N' e  R能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能 ...

2 v p* u; }. P; {5 A3 ?- x
低温时多少度？？时间要多久？还有需要用枪头吹打把细胞吹打下来吗？吹打多久时间？

作者: 是鸟就要去飞 时间: 2011-3-8 13:48

皮搋子发表于 2011-3-5 13:50
; [5 A* P1 m) A5 F- N: K, \& x [回复 ambassador 的帖子
' A; s3 l% @% y, }
0 Z/ \& z! o" N, K4 n- B) `7 _2 n能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能 ...

2 b! u: c$ b6 B; f& R
有相关的资料说明这个问题没人

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