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标题: 求Hela细胞成球培养条件 [打印本页]

作者: amosummer 时间: 2011-3-7 11:53 标题: 求Hela细胞成球培养条件

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-7 12:23

to amosummer：

请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？

第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。5 P( t6 C- H) O
: {1 ~6 P* Z7 `( c8 L
第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。

            当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。
+ s0 ?4 w% a1 [  X0 G  B
   第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。
         # o' g- \5 O4 q3 o
            我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。2 c! z. A  Q+ z. M

            但有两方面你必须清楚：0 ^6 ^' Q2 Z+ ^& p7 B# x

            1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。
' m/ C0 j9 k' C1 a8 i; X9 \
            2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。) n9 i; a4 k5 e

   个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

作者: amosummer 时间: 2011-3-7 13:49

回复深海寂寞鱼的帖子# B- X+ h( w0 z& [$ s l+ E7 f1 M

非常感谢！你的信息对我帮助很大！

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-7 21:47

回复 amosummer 的帖子" Q J) m7 b M! C
b; f. h e5 T/ V% `& Q7 Y
你太客气了。
) }- \1 R; P! B0 X2 ]
能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。

欢迎继续交流。

作者: Rena 时间: 2011-3-15 16:58

回复深海寂寞鱼的帖子% Y5 [, ]+ |! v* m* o$ Q8 k: @
! P6 Y1 l( Z3 h7 q7 n0 [9 x! `7 i
你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-15 22:11

回复 Rena 的帖子
0 A0 S" {5 \& w( d9 ?, I+ r- ~! `
to Rena:

肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
5 ~$ v' \2 J1 e: Y+ A* Q
但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
8 F+ X* Y. G% ~: _
欢迎继续交流，共同进步。

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-15 22:11

回复 Rena 的帖子6 L& f" N3 p6 h6 y) w/ N

to Rena:

肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。" }7 k$ p( x ^2 j+ K3 p; l
$ F# D' q1 q. O# S- [) C% k |' K
但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。2 I" v: w- M/ W+ [) k4 b# k( K! q& u

欢迎继续交流，共同进步。

作者: Rena 时间: 2011-3-18 15:52

回复深海寂寞鱼的帖子6 Z3 s! V4 S Z3 N' s; n
5 y9 ]% @3 r& R& N4 D
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-18 21:36

to Rena：

个人建议：1 p  O- f9 F" X; s: Z/ T- I$ I' a1 X

1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。( T. c3 o! K: t5 g

   （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）- Y. P# L/ Q, s

   尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
- N0 T0 l5 m9 V- g5 U5 j3 [3 _
2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。3 Y. ~9 D6 L) D  [7 A0 Y5 z

      i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？7 e2 y3 w/ K% s6 v4 O' o, z& q$ z
8 \& j% R& T, f5 H% m
      ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？

      iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？' j0 O' e- b9 q  ^, m1 f

      这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
% _9 P, K+ Z- o; d- a
祝实验顺利。

作者: lxn90219 时间: 2014-6-5 15:22

回复深海寂寞鱼的帖子

我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求

作者: Tim 时间: 2014-6-5 16:18

回复 amosummer 的帖子

共同努力吧！我也正在搞粘膜细胞的成球培养！现在细胞是成单个的球体，可见二分裂，但是细胞增殖很慢！正在寻找突破口呢！我用的是我自己配的无血清培养基！

作者: Tim 时间: 2014-6-5 16:20

回复深海寂寞鱼的帖子# q& L$ q) ~1 p/ b1 G. ], V s- o" Z

C33A培养基的基本成分你知道吗？？

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2014-6-5 17:09

回复 lxn90219 的帖子

6 ^' d4 s3 d9 j( o
  To lxn90219 ：
! t8 I6 i  k$ }! G+ j# Z; S
  不知道你是看到哪些文献中使用HeLa进行Tumorsphere Formation assay的？可信度是否很高？* S+ o: F8 f9 V* c
- y! W- A( h" ?- r
如果你特别想进行这个实验，可以按照文献中的方法试试看。8 x  @1 ?5 `$ N9 f- a+ N
  x- n' |' P/ g- o( @
我个人不是太推荐。

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2014-6-5 17:10

回复 Tim 的帖子
; k7 x% H% v; R
1 A/ Z# Q) ]' Q; n- D1 w$ }
你可以尝试文献中使用较多的：（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF + bFGF）无血清培养条件

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