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标题: PDF电子书:Western Blotting Handbook and Troubleshooting Guide(version 2) [打印本页]

作者: dahui    时间: 2011-3-12 09:56     标题: PDF电子书:Western Blotting Handbook and Troubleshooting Guide(version 2)

本帖最后由 细胞海洋 于 2011-3-12 17:58 编辑
( i, c+ j! U4 l: }3 R  s( k5 F& A; R. P( F9 n; J
Introduction  1
7 G3 Z* V1 q1 kWestern Blotting Overview  2-3) o# Z$ l* H  b" @' ?
Step 1 – SDS-PAGE
7 G, i2 F& e0 I% ?' X1 Y/ M  Thermo Scientifc Precise Protein Gels  4 & N5 V3 N, H' c8 q- ^, V% Y
  Molecular Weight Markers  5-6
6 U8 a, s5 M9 \( vStep 2 – Electro-Transfer ( e: R- W  {# f+ q! p
  Thermo Scientifc Pierce Fast Transfer System  7
4 h' T0 j; i1 d% f# ~) K# U$ Q  Transfer Buffers  8 * o' }/ T( v8 a) K$ A
  Filter Paper for Blotting  8
: S  E$ f- ~4 H& A& U$ x. e  PVDF and Nitrocellulose Membranes  9 : N" \1 n7 X7 K4 |* p
  Thermo Scientifc Pierce Protein Stains   9  
- j7 A. h( c% C$ C6 m# H   for Membranes   & P' H) ^" l: E1 ~3 E
  Antibody Extender Solution NC  10 % y+ F: \  d: P# R
  Western Blot Signal Enhancer  11: c! @0 q, Y" x/ g+ S) @  @# ~
Step 3 – Blocking
, f/ Z! K: z5 O6 Z: Y# d  Introduction  12 ) j  Q2 g, }* B5 y, W* o8 f* c( t
  Blocking of Nonspecifc Binding Sites on  12 ) w  P' T" I# P( ^. y1 W
   Transfer Membranes   
3 m8 J7 @& L0 d  C9 ~) Z  Blocking Buffer Optimization  12-13 / U$ B+ e+ P" w6 \/ n
  Blocking Buffers  13-16
5 D! p8 `: |2 w! w, h) SStep 4 – Formulate Wash Buffers
. m5 P3 x* O+ i6 Z( d' m$ `8 a8 O  Washing the Membrane  17 7 P' K+ p9 X$ H1 x. [, A: h
  Wash Buffers  17
% K+ N4 K( B1 L! M% |$ i1 I# N/ \+ EStep 5 – Detection Reagents
$ [- G3 i. E# [) `* |/ `  Validated Primary Antibodies  18-19 * W5 a/ M9 T- g: z. t$ p! J
  Affnity-purifed Antibodies  20 ( e- w4 O- \/ V
  Stabilized HRP Conjugates  21 * O' m2 G8 i( J! T) h/ l9 S
  Thermo Scientifc DyLight   22 % d: n0 S- H: f: N8 g
   Fluor Conjugates   
5 t% z( p8 Z# S; H  Conjugate Stabilizer Solutions  22
( T' a9 t! G" H6 f7 r/ p, R& A  Thermo Scientifc DyLight-labeled Highly  23 ; T+ i/ v# C: r5 `7 ]# L
   Cross-Adsorbed Secondary Antibodies
& s/ H/ S) q( D/ |  Antibody Storage and Stabilizer Solutions  24 3 T/ j4 ^# t' l/ ]: e
  Secondary Antibody Ordering Table  25-26  
1 H3 N# C- w2 f/ Y$ W  F* f  Thermo Scientifc Clean-Blot IP  28-29 / _3 [1 H$ y. ^6 ^; x! P+ B+ k' C. u. J
   Detection Reagents   0 o; q' L4 E; X: h- v- y
  Protein A, G, A/G and L Conjugates  30
5 s( T- \" m; x9 j2 C- n! n+ ]  Thermo Scientifc NeutrAvidin, Streptavidin   31-33
, _  O; g' i& q4 s0 L$ H   and Avidin Conjugates
6 v" y7 T0 J9 ]1 i8 b7 Y4 X8 GStep 6 – Enzyme Substrates
* X$ L  m2 A$ n4 I) IChromogenic Substrates  34-35 8 u7 P' o. H4 ?# ~; V" @( `: O
Thermo Scientifc Chemiluminescent Substrates  36-43
! b4 j9 ^! A) [  Pierce ECL Substrate  37 9 o7 c) R3 W- s0 b
  SuperSignal Chemiluminescent   38-42 # N. e0 A( N5 ?% a% S+ L! B
   Substrates and Kits   
9 v1 b3 H% N5 _. [' P8 v  Lumi-Phos™$ x0 W$ F6 {1 r+ \: e: M
Chemiluminescent Substrate  43
$ o) o. H9 I( j% ?/ c1 f  Quick Reference Substrate Guide  43 % l! k6 ?! V" a
Fast Western Blotting Kit  44 ' d, t. }  f/ w
Specialized Western Blotting Kits  45-48   m, J6 O, L2 M) k- p) G
  Thermo SuperSignal West Pico HisProbe Kit  45
7 M8 e! K% v+ W  ?  Pierce O-GLcNAc Western Blotting Detection Kit  46
1 ~/ D7 a4 w: n  Thermo Scientifc DyLight 549/649  46-47  
1 n. g5 _  d/ M# u   Western Blotting Kit   
4 s+ z. P. c3 J7 f+ ^$ f4 P  Thermo Scientifc DyLight 680/800 Near Infrared  47
, q* M5 F5 }  h. u; e9 P   Western Blotting Kit   2 }2 u% w3 ^6 d# A$ |4 W) C
  Thermo Scientifc Active GTPase Pull-Down  48
) ^( R) O$ t  u) H   and Detection Kits   ' H9 o( ]9 G( ?- f  J
Far-Western Blotting  49
3 _" N* a; Y) J* N, F- ]; @In-Gel Western Detection  50-51
5 h" J; @: U2 m& K5 ?: w  Thermo Scientifc Pierce In-Gel   51 " t: t/ C+ w6 T) ~1 n
   Chemiluminescent Detection Kits
! E# Y) J& q0 {* x( cStep 7 – Film
/ D* O8 {4 X$ m0 [  Thermo Scientifc CL-XPosure Film  52
- |2 ]6 X- i/ e8 l( G7 XStep 8 – Stripping Buffer ! K; G2 `' K& l5 g7 A
Optimizing the Signal-to-Noise Ratio  53-58 8 n, e: i& k1 l: a
  Protocol for Stripping an Immunoblot  54
4 I6 _9 z7 y  {- l  Thermo Scientifc Restore  55
: d8 d2 p& U0 G& J% f0 r! _% a+ x   Western Blot Stripping Buffers
/ m0 l( q3 M1 l$ j' }  Thermo Scientifc Restore PLUS  56 % e3 P5 [- r' D* g* v
   Western Blot Stripping Buffers 6 P5 W) n4 `2 y+ K' q5 G0 b
  Thermo Scientifc Pierce   57-58 ! a8 P6 f' Z2 Z4 D) P' |9 B0 m
   Background Eliminator
, `; y" A5 \, T  ZTroubleshooting Guide  59-69
) B$ N- d0 w* }1 w  Blotting with Chemiluminescence  59 3 _3 ]' t+ p2 \% g; j/ a# G6 [
  Optimizing Antibody Concentration  60-63 1 K' E6 N$ _" i* e) c
  Problem Guide  64-67
4 l! x0 I( x) v3 g  Full-Length Western Blotting Protocol Using   68-69
' x, @. H4 p" u  P   Chemiluminescent Substrates ) |; \* z) M1 Q" V+ {  P
Recommended Reading  70
  p8 `- V0 c1 w
! G5 i6 _3 Q& q7 ^0 n+ Z" J
作者: 一枝独秀    时间: 2011-3-12 13:13

能发到我的邮箱吗?我看不到内容superspinner@126.com
作者: jiandong2001    时间: 2011-3-12 18:54

好久没有来这里了!谢谢分享
作者: 军医    时间: 2011-3-12 19:15

谢谢分享!
作者: 深海寂寞鱼    时间: 2011-3-12 19:51

好资料 学习ing
作者: 白衣小彩    时间: 2011-3-12 19:54

学习学习
作者: sunyucheng    时间: 2011-3-12 19:58

看看
作者: daviddow    时间: 2011-3-12 20:45

thanks for sharing it
作者: mominglily    时间: 2011-3-12 20:58

谢谢
作者: qlwj    时间: 2011-3-12 21:27

新手上路,能发到我的邮箱吗?我看不到内容ql_tjgk@hotmail.com
作者: vae有何不可    时间: 2011-3-12 22:17

好资料
作者: ivantanqi    时间: 2011-3-13 00:12

Thanks for sharing
作者: zhenhua    时间: 2011-3-13 00:15

呵呵,半广告
作者: doctor009    时间: 2011-3-13 00:46


作者: henryjia    时间: 2011-3-13 06:11

good
作者: zhujiang1021    时间: 2011-3-13 08:15

谢谢9 ?1 c2 E, M0 ?- L  q3 x& t. u

作者: BenHantun    时间: 2011-3-13 09:04

学习) \. s/ A' @2 `# t- [' v' p

作者: future007    时间: 2011-3-13 09:04

极其需要
作者: wolf413    时间: 2011-3-13 09:59

新手上路,可以发到邮箱吗?谢谢. J. _0 K8 [0 t$ v; c7 T" ^
wangfang413@hotmail.com
作者: 小伟-虎啸龙    时间: 2011-3-13 11:58

看不到内容,求发到本人邮箱842109825@qq.com
作者: jitianxing7021    时间: 2011-3-13 13:16

好资料学习
, `5 k/ X' }- O
作者: longer    时间: 2011-3-13 14:57

好书,谢谢。
作者: lh_kitty    时间: 2011-3-13 15:11

新手上路,能发到我的邮箱吗?我看不到内容liuhui1101@sina.com
作者: xiao6tao    时间: 2011-3-13 16:21

好资料 学习哈
作者: uyunbilig    时间: 2011-3-13 19:49

谢谢分享!
作者: cqgangzi    时间: 2011-3-13 21:27

谢谢 楼主分享
作者: kao3yan    时间: 2011-3-13 22:04

新手上路,学习学习
作者: 临床干细胞    时间: 2011-3-13 22:39

谢谢                 
作者: 一转身的距离    时间: 2011-3-13 23:13

好东西,能发份到我邮箱吗?级别不够看不见pp_614@126.com
5 ^- y+ r& }: {2 h非常感谢!
作者: xiaxin1900    时间: 2011-3-14 00:13

请指教,希望发到邮箱,非常感谢,非常感谢!373657996@qq.com
作者: echo13032619    时间: 2011-3-14 00:13

i am fish  could u pls sent it to my email? echo13032619@163.com
作者: iseeyou1210    时间: 2011-3-14 00:31

good!
作者: iseeyou1210    时间: 2011-3-14 00:35

the book is sent!
作者: kouke80    时间: 2011-3-14 08:20

好书,感谢。
作者: sunnylily    时间: 2011-3-14 09:43

thanks
作者: shewawa    时间: 2011-3-14 10:13

学习下
作者: pzxh    时间: 2011-3-14 15:52

谢谢楼主分享!
作者: hany2007    时间: 2011-3-14 20:46

看来又得回头看看
作者: siyue13    时间: 2011-3-14 21:09

哎呀,这个要顶顶
作者: sheepthief    时间: 2011-4-27 00:10

这是好书啊
作者: alioli    时间: 2011-11-3 01:15

谢谢分享,最近western做得郁闷啊
作者: viv2005    时间: 2011-11-3 08:51

下一个看看勒
作者: aidiulgy9517    时间: 2011-11-3 09:29

谢谢分享
作者: chendongbo338    时间: 2011-11-3 09:52

学习一下
作者: cherrysung    时间: 2011-11-3 10:01

也是新手,看不到,很想学习,谢谢!邮箱qiqi2008_cn@hotmail.com
作者: 白色的风    时间: 2011-11-3 10:25

谢谢楼主
作者: zhangyan813    时间: 2011-11-3 10:51

收藏了!
作者: czzhaozhu    时间: 2011-11-6 10:43

看看吧!
作者: xiangchou812    时间: 2011-11-6 11:20

不错的东东!!!
作者: xiangchou812    时间: 2011-11-6 11:25

不错的东东!!!
作者: 亮亮燕燕    时间: 2011-11-15 21:49

谢谢
作者: phpzs    时间: 2011-11-16 21:10

下周了呵呵
5 {) C" |/ F$ z1 s' M) \
作者: zouxiaonan2006    时间: 2012-7-11 10:58

我是新手 看不到内容 麻烦您能发到我邮箱里么  zouxiaonan2006@126.com
作者: 榴榴莲    时间: 2015-5-24 16:06

这贴子你会收藏吗  
作者: yukun    时间: 2015-6-5 19:27

这个贴好像之前没见过  
作者: dulaiyouyu    时间: 2015-6-8 04:00

蛋白质印记
作者: 泡泡鱼    时间: 2015-6-9 09:27

貌似我真的很笨????哎  
作者: 罗马星空    时间: 2015-7-8 18:15

这样的贴子,不顶说不过去啊  
作者: 剑啸寒    时间: 2015-7-11 20:05

我卷了~~~~~~~  
作者: beautylive    时间: 2015-8-22 21:10

今天的干细胞研究资料更新很多呀
作者: nauticus    时间: 2015-8-26 06:27

要不我崇拜你?行吗?  
作者: 杏花    时间: 2015-9-13 21:13

回复一下  
作者: aakkaa    时间: 2015-9-16 13:20

顶的就是你  
作者: 罗马星空    时间: 2015-9-16 15:09

终于看完了~~~  
作者: 我心飞翔    时间: 2015-10-8 05:58

这个站不错!!  
作者: bluesuns    时间: 2015-11-15 09:16

厉害!强~~~~没的说了!  
作者: foxok    时间: 2015-12-29 15:09

感謝樓主 干细胞之家真的不错  
作者: immail    时间: 2016-1-5 19:57

很有吸引力  
作者: 我心飞翔    时间: 2016-1-10 11:35

小生对楼主之仰慕如滔滔江水连绵不绝,海枯石烂,天崩地裂,永不变心.  
作者: ringsing    时间: 2016-2-23 20:22

帮你项项吧  
作者: dogcat    时间: 2016-2-28 16:45

加油站加油  
作者: 石头111    时间: 2016-3-8 15:18

我的啦嘿嘿  
作者: 123456zsz    时间: 2016-4-5 12:09

不错,看看。  
作者: chongchong    时间: 2016-4-11 16:18

谢谢干细胞之家提供资料
作者: biodj    时间: 2016-4-13 10:35

彪悍的人生不需要解释。  
作者: 蝶澈    时间: 2016-4-17 21:42

好贴子好多啊  
作者: 刘先生    时间: 2016-4-22 10:27

楼上的话等于没说~~~  
作者: 快乐小郎    时间: 2016-4-26 22:52

回贴赚学识,不错了  
作者: 初夏洒脱    时间: 2016-5-11 16:27

呵呵 大家好奇嘛 来观看下~~~~  
作者: wq90    时间: 2016-5-22 16:10

似曾相识的感觉  
作者: pengzy    时间: 2016-5-26 14:18

初来乍到,请多多关照。。。嘿嘿,回个贴表明我来过。  
作者: 追风    时间: 2016-6-7 21:34

就为赚分嘛  
作者: 再来一天    时间: 2016-7-13 19:01

端粒酶研究
作者: lab2010    时间: 2016-7-22 19:35

干细胞疾病模型
作者: cjms    时间: 2016-8-2 10:54

支持一下吧  
作者: 杏花    时间: 2016-8-27 17:10

努力~~各位。。。  
作者: 三星    时间: 2016-9-8 14:55

哈哈 瞧你说的~~~  
作者: 黄山    时间: 2016-9-16 20:28

神经干细胞
作者: 小倔驴    时间: 2016-9-23 22:26

好人一个  
作者: kaikai    时间: 2016-9-24 14:18

我想要`~  
作者: 未必温暖    时间: 2016-10-20 17:35

赚点分不容易啊  
作者: 红旗    时间: 2016-11-4 08:02

我在顶贴~!~  
作者: Whole    时间: 2016-11-24 14:52

希望大家都有好运  
作者: ikiss    时间: 2016-12-4 10:35

偶真幸运哦...  
作者: 天蓝色    时间: 2016-12-7 19:46

挤在北京,给首都添麻烦了……  
作者: 某某人    时间: 2016-12-20 08:27

不是吧  
作者: 三星    时间: 2016-12-26 20:00

楼主也是博士后吗  
作者: hmhy    时间: 2017-1-10 03:00

我十目一行也还是看不懂啊  
作者: mk990    时间: 2017-1-11 21:57

加油站加油  
作者: 桦子    时间: 2017-1-18 21:18

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