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标题: PDF电子书：体外培养原理与技术——薛庆善 [打印本页]

作者: deron 时间: 2011-3-18 17:26 标题: PDF电子书：体外培养原理与技术——薛庆善

本帖最后由细胞海洋于 2011-3-18 20:56 编辑
0 z- h: s, _/ B! M1 F
/ E) L! I0 O- d# u# n4 O

海洋注：本资源共9个分卷压缩需全部下载到一个文件夹才可以正常解压

本资源严禁使用迅雷快车旋风等多线程软件下载，一经发现严肃处理账号7 I( a& L% @, P' @" l8 k

要求大家使用浏览器默认下载并一个一个下载不要同时进行

作者: deron 时间: 2011-3-18 17:49

本帖最后由细胞海洋于 2011-3-18 20:52 编辑

作者: deron 时间: 2011-3-18 18:09

本帖最后由细胞海洋于 2011-3-18 20:52 编辑 " L& @0 k; T" g; N

作者: deron 时间: 2011-3-18 18:15

1关于原书，不多说了，讲解详细引证充分，不可多得的一本好书。分了9卷上传，最后4卷收点劳务费。总共要耗104个包包，广大板油们火速去签到贴刷包吧~) X* L1 v( Z) p: S# t9 ]
2应懵懂版主的求助上传
3电子书发完后，格式没办法编辑了，劳烦版主帮忙弥补一下吧

作者: deron 时间: 2011-3-18 18:17

补充一点，压缩包里一个电子书，另一个是自制的目录。页码是对不上的，仅供大家参考

作者: 懵懂干细胞 时间: 2011-3-18 20:07

十分感谢！！！！！！！！！

作者: 懵懂干细胞 时间: 2011-3-18 20:08

本帖最后由懵懂干细胞于 2011-3-18 20:08 编辑 & n5 K6 w- W: ~( {0 \; y/ q

代表广大包友向deron致敬！！！！' |" J, |+ ?, j6 \* J0 b: r

作者: manybit 时间: 2011-3-18 21:38

看看

作者: aminhair 时间: 2011-3-19 16:59

kan kan

作者: aminhair 时间: 2011-3-19 17:04

你真黑！好资源就要便宜点共享吗

作者: deron 时间: 2011-3-20 08:51

回复 aminhair 的帖子- z+ O/ m* j$ b( \

整个上传花了一个半小时。单个附件不能大于25M，我已经尽力了。
至于8包/附件，似乎论坛里稍大一点的附件都是这样，爱莫能助

作者: rhkwind 时间: 2011-3-20 10:37

hao

作者: aminhair 时间: 2011-3-20 18:45

回复 deron 的帖子

呵呵下次你可以卖连接啊

作者: ambassador 时间: 2011-3-21 11:20

不错不错！谢谢分享！

作者: deron 时间: 2011-3-21 12:01

本帖最后由 deron 于 2011-3-21 12:04 编辑
7 S& m6 a" I. e/ }8 W3 ^+ Q
回复 aminhair 的帖子2 f g3 m2 u$ ?- B5 _

链接随时都有挂掉的危险。传到坛子里相对安全。3 v1 u6 s/ Z+ u5 ~/ s7 Z
另外本书的链接在http://ziyuan.cicaline.com/ebook ... e-bf7d-6f2cd89ea0fa，下载很麻烦。得先注册

作者: aminhair 时间: 2011-3-21 19:02

回复 deron 的帖子8 z; e2 v% {& L* S, F# @9 A

呵呵我还是洒泪下载完了谢谢！

作者: zuming 时间: 2011-3-22 10:06

好资源啊！

作者: ww2zyl 时间: 2011-3-22 20:50

什么培养啊

作者: deron 时间: 2011-3-23 08:01

回复 ww2zyl 的帖子: a; }2 \1 V/ U6 k- Q: e

很多体外细胞的培养

作者: deron 时间: 2011-3-23 08:04

补发一下目录，请海洋帮忙修改补充到四楼吧

目录:
一、体外培养的概念# q7 i8 K5 M  s
二、体外培养技术的发展历史
(一)体外培养技术的创立# x8 \: ?# W. _* U
(二)体外培养技术的发展" [" @9 Q# q9 n8 H8 A( p
(三)我国体外培养工作的发展情况
三、体外培养技术的主要类别
四、体外培养技术的应用1 f8 \0 Y; u4 ?4 U" k
(一)在组织学与胚胎学以及细胞生物学领域的应用: F. S% W- D5 D' C  K, l* n
(二)在肿瘤学方面的应用
(三)在微生物学领域的应用' j& N. |7 g7 ]! K2 h( t  H
(四)在免疫学方面的应用  Y0 J$ _) Y" R( h
(五)在药理学领域的应用2 j) X& W* _% s5 ?% p
(六)动物细胞与微生物大规模培养技术在生产实践上的应用
(七)在现代医学领域的应用
(八)植物组织细胞培养技术的应用
五、对体外培养技术的评价
第一部分体外培养的基本原理与技术
第一章从体内生存环境到体外生长条件
第一节体内细胞生存的营养条件
一、水
二、无机盐类, S: s9 ?9 Q5 v
三、葡萄糖' s. U1 s8 ]; m2 p  c, r
四、维生素( j9 I$ s' i0 ~" g* c
五、氨基酸5 @  e( ?- ~& X' T% {& v9 ]! Q
第二节体内细胞生存的其它条件" \% U0 ?7 n# Z
一、温度3 V* h  r  n* ~
二、氧和酸碱度, m' z6 N6 a! q( w0 r9 p
三、体液渗透压
四、细胞之间的相互联系
第三节体外生长大环境
一、体外培养实验室
二、体外培养的设备和器具: N/ {6 o! @# Q+ m( A
(一)大型设备和仪器. M' ], [' N2 A6 Q7 ?
(二)培养器具
第四节培养用液
一、水与平衡盐溶液( ?3 ^- W1 n3 L2 b( w5 K' @4 x
(一)水与缓冲液- t! h& Y7 C- L$ k, ]5 t7 R
(二)生理盐水与平衡盐溶液9 K6 R" I* A7 e0 ?
二、培养液( o6 l1 Z* o! |
(一)天然培养基
(二)合成培养基
(三)无血清培养基
三、体外培养的其它常用液
(一)其它常用液的类型
(二)其它常用液的配制
第五节细胞在体外生长的其它条件
一、无污染的气、液相环境
二、温度
三、生长基质* F% A! S/ O' ^: h1 O* |' [9 E9 x: B
第六节清洗和消毒& @* V- j& G- Q) S' c9 I
一、培养用具的清洗7 U0 ]/ A" P+ ^6 r
(一)玻璃器皿的清洗2 C9 h) Z; n& O- O3 p" ?3 t
(二)胶塞和塑料用品的清洗
(三)清洗后物品的包装; Y: m, V+ W/ V% S7 t- P
二、培养用品的消毒和灭菌# n" X  z5 e. t
(一)物理方法+ A1 S% \: v2 @- t4 X& E5 A# g
(二)化学方法消毒3 l) f0 h4 F! A6 S  _3 L/ L
第二章体外培养的基本方法和过程) m! G% a, _0 C! C2 v$ I
第一节原代培养
一、原代培养的过程
(一)取材及培养材料的制备/ ^2 e% D; }5 h5 k
(二)分离(散)细胞的方法
(三)接种与培养过程
(四)更换培养液. [/ N2 E2 |. t; O- z0 _" k: O6 c
二、原代细胞培养方法的注意事项
第二节继代培养
一、原代培养物需要传代的指标
二、传代的过程5 |8 ^. `5 J9 [& P: {" w$ p
三、传代培养的注意事项1 N% ]: X& t6 {" _6 E4 ^
第三节体外培养的基本方法和技术
一、悬滴培养法) Z4 D- S, n. \5 E7 k  B
(一)Maximow双盖片悬滴培养法7 k5 |' T' N! S  i: X- B+ y
(二)改良的植块悬滴培养法
二、培养瓶培养法
三、盖玻片培养法
四、旋转管培养法
五、灌注小室培养法5 C, Y5 I& r+ `1 o7 q
六、培养板培养法
七、二倍体细胞培养法
八、克隆培养法
九、中空纤维细胞培养技术
十、微载体细胞培养法+ _  h6 G- n% Z5 J
十一、微囊培养技术8 t5 o0 P- V6 L, L
第四节培养物的冻存与复苏
一、培养物的冷冻保存与复苏原理! p: Y: @( m2 p1 r& f
(一)冷冻速率- x8 b0 i2 X) v) Z+ V% w* X/ d
(二)冷冻保存温度9 k3 @7 C, P3 e1 u
(三)复温速率/ }0 n, K* J: e7 }3 c
(四)冷冻保护剂
二、冷冻保存方法1 h, U) v' d" E* W5 B
(一)非玻璃化冻存方法+ b: o# i8 T3 w5 ^8 [
(二)玻璃化冻存方法
三、冻存细胞的复苏
(一)非玻璃化冻存细胞的复苏方法& n: I* v3 j0 \  ]& _; t$ T
(二)玻璃化冻存细胞的复苏方法7 |1 W/ B9 \; a' {, k
第五节培养物的污染4 F0 ^$ n% z* W  N
一、微生物污染的判断. w/ d( e/ B) a* Q
(一)细菌的污染及其判断
(二)真菌的污染及其判断0 a5 b' |0 M, e, \$ x
(三)支原体的污染及其判断
(四)病毒的污染及其判断
二、污染的预防1 J; u- L# n: e$ A! O' w3 E
三、污染的排除# j. U7 X- v6 B% D" L
第三章体外培养物的生长生物学9 {5 ~8 ^9 `5 g1 m
第一节体外细胞培养物的生长类型6 t& |/ i- ]  N. ?
一、黏附型细胞/ r( F8 C- N, t( R4 I2 w
(一)上皮型细胞1 \% N( \5 L; s  R/ ^
(二)成纤维细胞型细胞
(三)游走型细胞
(四)多形型细胞
二、悬浮型细胞# n  G* O1 ]8 k2 r
第二节体外培养物的细胞生物学特点
一、培养细胞分化状态的变化
二、培养细胞的增殖能力
三、体外培养细胞的生长过程- R( ]  o1 F) D& J
(一)原代培养期" `/ O2 M/ c1 P* E1 I
(二)传代培养期1 j) E7 s- }' o/ D
(三)衰退期  b5 a0 b7 H. ]( |+ L
四、体外培养细胞的形态学
五、植块培养物的生长生物学
第三节影响动物细胞体外生长的因素
一、营养成分与生长基质成分对细胞生长的影响9 I0 d6 `/ X4 d4 N$ k0 W
(一)血清的成分与作用
(二)无血清培养液的设计及应用% ~+ P( X. m2 ^) v4 w
(三)生长基质成分
二、温度条件对细胞生长的影响
三、气相环境对细胞生长的影响; N7 y+ H  C8 j4 ?* F% I7 O
四、培养液的酸碱度对细胞生长的影响0 }+ o2 I& w% a+ M4 n1 w
五、辐射线对细胞生长的影响
六、超声波对细胞生长的影响1 g( H% I8 x; [
七、影响细胞生长的其它因素) W5 b6 \- `) q2 Z( M( l
第四章细胞分离与纯化+ ^0 n1 j+ d2 k) p/ h* q9 q
第一节解离(散)组织制备细胞悬液过程中的细胞分离
第二节利用细胞体积和密度进行分离纯化的方法
一、一步密度梯度离心法
(一)血细胞的分离8 Q9 [9 B5 o. C1 m2 _2 a% P; E
(二)玫瑰花环细胞的分离
二、等密度梯度离心法
(一)连续BSA密度梯度离心法
(二)非连续BSA密度梯度离心法( A2 D0 ?$ C5 ]* A* _
(三)连续Percoll密度梯度离心法: \. |- l, A! |0 D% D5 d
(四)非连续Percoll密度梯度离心法
三、速度沉降法
(一)低速离心速度沉降法" Q/ h( B- m% m' e/ s! z
(二)简单策略沉降法6 h5 w) v# [. d+ I
(三)简单重力沉降法分离白细胞与红细胞
(四)简单重力沉降法分离粒细胞
四、离心淘析分离技术
第三节根据细胞表面电荷的细胞分离方法+ `* m" E, Q/ `' l3 E
一、自由流动电泳分离技术
二、密度梯度电泳分离技术6 S; i" [; l+ J( E
第四节基于不同黏附特性的细胞分离方法4 x+ w% v0 [2 j
一、差速黏附处理
二、葡聚糖凝胶G10过柱法
三、羰基铁粉法, Z+ X9 B1 Y$ n4 J& H+ s
四、尼龙毛分离法
第五节利用细胞表面标志分离纯化细胞的方法6 l3 a$ J$ c" _9 X7 B0 G
一、免疫溶解法
二、盘化法- X- V$ _- Q, T
(一)直接法* h1 P/ m6 u, t$ T1 a' Z
(二)间接法( W* u: F: D$ R
三、凝集素凝集法
(一)花生凝集素凝集法分离皮、髓质胸腺细胞
(二)大豆凝集素凝集法分离T、B淋巴细胞& ?+ o' l! i7 T0 I7 Q$ ^" t! ^
四、玫瑰花环分离法
(一)E玫瑰花环分离法; g* S) K2 S) P# q' `
(二)EA玫瑰花环分离法
(三)EAC玫瑰花环分离法
五、流式细胞分选术9 ?( ~5 b7 X# O: G+ Y
(一)流式细胞仪的结构和工作原理" W4 a$ q- |( `! C: G$ l1 y
(二)流式细胞术分选细胞
六、免疫磁珠分离技术
第六节利用其它细胞学特性分离纯化细胞的方法
一、反复植块法
二、有丝分裂抑制剂处理
第五章细胞系(株)、细胞克隆与细胞周期同步化5 h9 m% `5 Q$ Z
第一节细胞系(株)的建立与鉴定
一、基本概念& A; h* O/ V7 M# Y3 P# Y! a$ ^! o
二、建立细胞系(株)的档案3 q. w/ E# ?# h! q% e' U: `9 q
三、细胞系的鉴定# M" L! s. j3 L
(一)细胞系鉴定的内容
(二)细胞系形态学的鉴定方法( V0 v* z# \7 V8 \. S+ Z" M, F
(三)细胞系的染色体数目、核型及其带谱分析
(四)细胞系的同工酶酶谱检测, R6 _7 n. @3 b# i: \; l# |4 Q
四、细胞系(株)的保藏
五、国内部分已建立的细胞系或株名录
六、国内部分已建立的单克隆抗体杂交瘤系或株名录" m5 a' p/ J% V+ ]! t! j( l! F% y
七、国外部分已建立的细胞系或株名录0 D( ]2 s/ ^, B' e% l7 j# }8 C. U) }
第二节细胞克隆4 V, c0 i5 k) _  D, ]
一、克隆培养技术
(一)稀释铺板法
(二)饲养层克隆法  l6 @7 @& W/ |7 k
(三)胶原膜板或血纤维蛋白膜层板克隆法
(四)琼脂克隆法
(五)在琼脂基底上用甲基纤维素克隆化$ N6 g2 x# ?' N& {+ M: I
二、影响克隆形成率的因素8 ?& [1 X% F  E8 {, D6 g
三、克隆的分离4 `/ H+ j" ~/ C9 V* G+ c1 s* M" r
第三节细胞周期与细胞同步化
一、细胞周期
二、细胞同步化
(一)各期细胞的分离
(二)细胞分裂相同步化法
第六章器官培养
第一节器官培养技术概论
一、器官培养技术的基本要点
二、器官培养技术的发展简史
三、器官培养的基本原则- C/ n& X, }+ D* U& B" H# B$ f! D. p
(一)养分的供应与取材% n3 o3 ?' w7 G: s- C
(二)抑制细胞迁移
四、对器官培养技术的评价
五、培养器官的生存环境及影响因素
(一)培养器官的生存条件及其影响/ ]# b" @( f- y4 v4 D2 j' H: @
(二)培养器官的内在因素及其影响
第二节器官培养的基本方法
一、表玻璃器官培养法: M0 c$ H- n$ V7 C+ B, ]- @, {$ C
二、琼脂凝胶培养法(Wolff器官培养法)' d% y6 N  c; t3 A
三、悬浮培养法! J1 ]( s: ?& C) k% X7 [
四、直接漂浮培养法
五、擦镜纸培养法
六、金属格栅器官培养法
七、琼脂小岛器官培养法) H. [3 I. h9 ~* I) O, S2 H' K
八、陈氏滤纸虹吸器官培养法$ W/ w# \) t5 x" o! r8 G# D
九、灌注式器官培养法& q7 J7 t" L! n1 G
十、旋转管培养法0 N2 r4 v& N" j1 d. I  Q
十一、摇摆式器官培养法
十二、器官灌注系统
十三、鸡胚尿囊绒膜培养法* n" o9 \6 R; W% G4 z3 S
十四、早期鸡胚胚盘培养法1 R2 ~+ b& Y% _3 G! j
第三节器官培养各论
一、胚胎肢芽的器官培养- X8 H8 t+ g: S' ]
(一)胚胎肢芽的血浆凝块器官培养方法
(二)胚胎肢芽的琼脂凝胶培养法: q0 c  e5 v! X  b0 v1 J1 ]) Y5 ]
二、胚胎性腺的器官培养
三、软骨与骨的器官培养
(一)软骨的器官培养, I3 C3 H3 x. l( {" H' Q5 b9 y$ _6 z
(二)骨的器官培养
四、神经组织的器官培养
五、牙胚的器官培养
(一)Trowell培养法培养牙胚器官
(二)悬浮培养法培养牙胚器官
六、腭板的器官培养
(一)腭板器官的静式培养法
(二)腭板器官的转动培养法3 a5 l5 S- K; r% ^2 f' z* V
七、毛囊的器官培养
八、血管的器官培养: t# {: D2 f, z' C& _% L) d" ?
(一)血管的悬浮孵育法器官培养- t$ ]& U6 G0 W: t$ A7 P( Q
(二)血管的琼脂孔器官培养法# a: E4 u: {7 U5 @" C8 h4 q6 C
九、肝脏的器官培养: d2 f$ t8 W$ g, E5 B, W
十、小梁网的器官培养% U2 ]8 j& O8 A) l3 `
十一、人胃肠黏膜的器官培养
十二、胚胎器官的上皮与间充质植块的联合培养6 F  ^4 `) r1 j0 Y9 P; L
十三、肿瘤侵袭研究中的器官培养
(一)肿瘤细胞与靶器官植块的制备. r& y" P4 x" }: {( |7 |
(二)肿瘤细胞与器官植块几种联合培养模型
第四节全胚胎培养& V1 _: X' L# Z
一、植入前胚胎培养: O2 B7 w+ o( [( c. p1 K
二、植入后胚胎培养$ p! O! P* I' R
第五节器官培养的应用* @* T3 N6 Q# b: r
一、器官培养中的形态发生研究
二、器官培养与发育分化研究
(一)外分泌腺的发育分化. I* R0 d0 {1 r2 G. g/ `* W
(二)内分泌腺的发育分化! F4 {) P8 \, l; @9 L$ v
(三)性腺及前列腺的发育分化
(四)神经组织的发育分化
(五)各组织细胞间的相互作用对器官分化的影响
三、体外培养整个胚胎的生长发育3 P' X1 k8 Q1 a/ g
四、胚胎致畸作用研究. Q' Q% u  k- C9 _; H
五、器官的功能及其代谢研究1 p" R$ z; Q* h
六、器官移植中的应用! Z. T% c5 {0 }- K; X
(一)器官保存
(二)降低免疫原性* b6 l0 z! l; m8 g" C
七、器官培养与肿瘤侵袭研究
第七章培养物的观察检测方法& d3 J1 a6 j7 Q/ A, p
第一节活细胞的观察检测方法6 Z: y/ A5 [* q% S: M9 x4 m
一、相差显微镜观察培养物的形态结构
(一)相差显微镜4 h8 y3 [  }& Z% k* H+ L7 r# R
(二)用相差显微镜观察活细胞的方法
(三)活细胞的动态观察与缩时电影
二、细胞计数法
三、细胞生长曲线  H, p" X7 [$ Q: _, ?( [
四、体外活体染色观察与活体染料
五、活细胞的染料排除检测法6 q2 w! Z( u% K% e( L+ a! Q( m3 Y
六、细胞增殖活性测定的3HTdR掺入法' \3 _' s! T( c  g
七、细胞活力测定的MTT比色法
第二节普通染色观察' S( A1 O; v. r$ o
一、HE染色法
二、吉姆萨染色法
三、载坡片处理方法
第三节细胞化学技术
一、酸性磷酸酶- n3 \. F9 V; |* I: d1 t
二、葡萄糖6磷酸酶
三、琥珀酸脱氢酶1 Z& |- h* O$ j8 p1 c5 l' m( a2 h
四、DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
五、DNA的富尔根(Feulgen)染色法
第四节免疫细胞化学技术
一、常用免疫细胞化学技术原理
二、常用的显色标记物! R7 R! B$ @0 Y
(一)辣根过氧化物酶
(二)碱性磷酸酶4 h2 `+ g; Q+ k- U& B0 G# r* O) _1 s; v
(三)荧光素$ }7 n: a4 M1 e( y7 a' J* o
(四)胶体金与免疫金银技术9 E9 Y: R- G  n: Z, N0 q: T
三、免疫细胞化学方法及标记物的选择* [) @. h5 c( p/ j" _% R; n1 D
四、免疫细胞化学的一般问题! S5 E; t$ v) ?: a% o
五、免疫细胞化学染色的典型程序
(一)免疫酶间接法
(二)免疫荧光LSAB法
(三)PAP法
(四)SPA胶体金银法
第五节原位杂交技术7 g# s" [" w. G
一、探针与标记物的选择* U7 L  d' T! L7 ~5 a- Y
二、原位杂交技术主要实验材料) H+ t5 u8 R* p) E
三、杂交
四、显示标记物
五、设立对照
第六节电子显微镜技术
一、超薄切片技术
(一)对培养物的预处理8 g4 a0 X6 U; w$ h! Q$ b/ s( n. a
(二)标本制备; O0 A# r8 }8 Z- a, r- G
二、电镜免疫细胞化学技术' ^/ \. k0 y! N# R) p2 K' Q
(一)显示细胞表面抗原0 ]2 G* H# ]$ w- j
(二)显示细胞内抗原* j. E& f: w  h8 Q: B! |! @0 S
三、其它电镜技术简介
(一)扫描电镜技术
(二)冷冻蚀刻复型技术, d, ~: x' t: [: a: {
第二部分动物基本组织的体外培养
第八章上皮组织的体外培养9 e. L  ]9 z4 M$ g" I7 E% C5 b
第一节上皮组织体外培养技术概论
一、在体生长与体外培养的上皮组织的基本特点5 ]% O: d+ z$ R. X
(一)上皮组织的形态结构
(二)上皮细胞的极性
(三)上皮细胞间的连接2 I  M) M: C4 j0 E* g) y
二、体外培养的上皮组织细胞的生长生物学
(一)体外培养上皮细胞的形态结构% F7 i; A# A% O$ V
(二)体外培养上皮组织的生长与增殖特征
三、体外培养上皮组织细胞的观察与检测+ [5 ?8 r/ z$ I5 q" U3 k
(一)一般形态学观察# ~; Q" L8 @; u" ?" `/ L: u
(二)组织化学与免疫组织化学观察与检测
第二节呼吸系统有关的上皮细胞培养
一、呼吸道导气部上皮细胞的体外培养- Q0 b/ j8 {  [
二、呼吸道导气部上皮分泌细胞的悬浮培养
三、Ⅱ型肺泡细胞的培养9 a6 y) |! ]. o! M& h
四、鼻咽上皮细胞的体外培养
第三节消化系统有关的上皮细胞培养2 p! `5 y: Q0 L3 C- |( _, A
一、食管黏膜上皮细胞的培养
二、胃黏膜上皮细胞的培养" k1 z- K. v1 A# Y
三、肠黏膜上皮细胞的培养/ `9 O' X3 Q1 F, t
四、胆囊和肝外胆管上皮细胞的培养
第四节腺上皮细胞的体外培养/ U3 ^" H7 j4 S. l, r$ |
一、唾液腺上皮细胞的培养& z0 F3 k+ y1 @  `! g
二、乳腺上皮细胞的培养
(一)乳腺上皮细胞原代培养的建立和维持
(二)乳腺上皮细胞的悬浮培养5 N8 x' N; q. p( z
(三)乳腺上皮细胞在EHS基质上的培养
(四)乳腺上皮细胞的其它培养方法, e1 \0 _2 q/ N% Z! m5 |  A
(五)乳腺上皮细胞培养中的有关问题5 n# B) u6 W% G8 _
第五节表皮细胞的体外培养0 \5 E: ^) q! h4 f) R: [* E, @
一、表皮角质形成细胞的饲养层细胞培养法
二、角质形成细胞的复合培养法9 i  C5 B$ \# ^9 t
(一)在人去表皮真皮上培养角质形成细胞
(二)在真皮替代物上培养角质形成细胞! O' q, e; m5 p3 _0 S
三、表皮黑(色)素细胞的培养& X5 I6 Y2 a9 O
四、表皮郎格汉斯细胞的培养) V! s2 H- a) m( E
第六节血管内皮细胞的体外培养
一、猪主动脉内皮细胞的培养
二、免主动脉内皮细胞的体外培养
三、人脐静脉内皮细胞的培养  _  z* U) l6 C
四、大鼠主动脉内皮细胞的培养
五、滤膜培养法培养血管内皮细胞" l! `* m; P. t/ V  ^
六、免脑微血管内皮细胞培养$ `1 Y9 s" m7 d1 s4 M
七、大鼠肺微血管内皮细胞的培养! U: M# _4 W. K1 O% p
第七节胸腺上皮细胞的体外培养3 i. M& d, v1 N+ j
第九章结缔组织的体外培养0 J/ R+ G. t1 q0 T1 Z- g
第一节结缔组织细胞的生长生物学特点与基本分离技术
一、结缔组织细胞的生长生物学特点9 P7 h4 _3 j/ h6 C: z& ?* C
二、体外培养结缔组织细胞的基本分离技术
第二节结缔组织细胞培养各论% }" ^% H# [! Y. s
一、成纤维细胞的体外培养
(一)真皮成纤维细胞的体外培养/ H, G4 y3 Y8 a4 h- {, L+ A
(二)人包皮成纤维细胞的无血清培养
(三)中国仓鼠胚胎成纤维细胞的体外培养
(四)鸡胚成纤维细胞的体外培养1 P- M8 F: d% ^7 h+ r$ e" p+ K
(五)人胚肺成纤维细胞的体外培养
(六)小鼠肾间质成纤维细胞的体外培养
(七)眼组织成纤维细胞的体外培养
二、巨噬细胞的体外培养8 \5 M$ d- ^. _5 f# v! v
(一)获取肺泡巨噬细胞的方法
(二)获取腹腔巨噬细胞的方法" C7 t6 Y4 K, e' ?4 G
(三)巨噬细胞的纯化& i5 U0 D3 B8 d  _. ?0 n
(四)巨噬细胞的接种和培养& [/ l" g; r4 w
三、脂肪细胞的体外培养0 u2 k2 `. a7 {, H& S( N# k) f
(一)大鼠前脂肪细胞的原代培养: W  u; v/ y+ l$ l
(二)小鼠前脂肪细胞的原代培养/ x) g# Q. T' m7 d4 [
四、肥大细胞的体外培养% Q- E8 c" x- i- V* D2 E
(一)肺肥大细胞的体外培养
(二)肠肥大细胞的体外培养* @: \# P* r+ e, x- j
(三)皮肤肥大细胞的分离和短期培养6 U  v5 o: Z/ v3 t$ ?" Q, }7 |
五、间充质干细胞的体外培养9 U4 g) @5 g% q/ E8 k
(一)鸡胚肢芽间充质干细胞的体外培养
(二)大鼠骨髓间充质干细胞的体外培养( {) e4 c. J4 M! V% c1 d( c
(三)人骨髓间充质干细胞的体外培养
(四)兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养
第十章几种重要脏器细胞与特殊动物细胞的体外培养" e, ^$ e9 P& I7 B3 C
第一节眼组织细胞的体外培养. L2 Z, u* D8 i. w3 f  t
一、角膜上皮细胞和内皮细胞的体外培养9 ^6 Q% o4 d% f- W8 Y0 j" `* \/ {
(一)角膜上皮细胞的培养
(二)角膜内皮细胞的培养
二、小梁细胞的体外培养
三、视网膜色素上皮细胞的体外培养
四、晶状体上皮细胞的体外培养
五、视网膜米勒细胞的体外培养
第二节骨与软骨组织的体外培养6 |; q: V* V5 G8 q# W
一、成骨细胞的培养3 Q0 b2 T, K' s5 x0 A8 m+ E
(一)骨内成骨细胞的培养
(二)骨膜内成骨细胞培养- N& g* \5 i1 _1 @! a
二、破骨细胞的培养" a! |. e" l+ |
(一)成熟破骨细胞分离细胞培养法
(二)骨髓长时间培养诱导分仑形成破骨细胞法0 Z( N3 i: _0 N+ A9 W
三、滑膜细胞的培养  O6 p; D; ?5 @. [$ e" s
(一)滑膜植块培养法
(二)分离的滑膜细胞培养法
四、软骨细胞的培养3 X+ T/ I; B' t% ]5 i
(一)关节软骨细胞的短期培养" ]% I4 T: ?: r' Q8 ~7 Y) j" D
(二)人关节软骨细胞的长期培养法
第三节泌尿生殖系统有关的几种细胞培养$ D! Y! O* L( J
一、生精细胞的体外培养7 M8 ?/ b$ n- T6 T
二、睾丸支持细胞的培养
三、睾丸间质细胞的培养
四、肾小管上皮细胞的培养
五、肾小球系膜细胞的培养) Y' [8 D" t: A; B! @9 J
第四节几种内分泌细胞的体外培养7 v/ _, z/ q1 j9 Q! f
一、胰岛细胞的体外培养
二、人垂体腺瘤细胞培养
三、甲状腺细胞的体外培养  k8 Z1 {& Z6 e
第五节羊水细胞的体外培养7 B1 c/ F- _7 M2 W; j8 u' q
一、羊水细胞的体外培养基本方法
二、羊水细胞的富集培养法$ Z/ s, }  c, z2 e
第六节胚胎干细胞的体外培养
一、体外培养胚胎干细胞的技术原理5 F# V' @9 L/ p+ X/ E' ?5 f# d
二、体外培养胚胎干细胞的基本过程+ g, ~1 G( V9 m& p( w
(一)饲养层细胞的培养+ Y  P6 O( P8 r9 K
(二)饲养单层的制备' e- E' j9 K' Y) y( G
(三)用于培养胚胎干细胞的条件培养基的制备9 C, n9 o/ ~2 t4 V: L7 X% q
(四)胚胎干细胞的分离与培养$ d8 [% ?7 V1 [
(五)胚胎干细胞的冻存与复苏/ u8 }% w% a% N
三、胚胎干细胞的鉴定1 t8 i. }9 R3 C
(一)碱性磷酸酶检测; m4 p- w1 C5 w, C+ F  ^3 \
(二)核型的鉴定
(三)体外分化能力观察& W2 c9 ^0 z- l  c) i" s4 `
(四)体内分化能力的观察
(五)嵌合能力的测定/ B& ]# r6 _5 P6 H3 N7 B. ]
第十一章造血干细胞的检测与造血祖细胞的体外培养; u. s3 P. _3 ^5 E3 O
第一节概论- V- V6 |1 h3 q* N% N1 K
一、造血干细胞的生物学特征1 S( Q8 I* _! R3 m
(一)造血干细胞的基本特性
(二)对造血干细胞的识别
(三)造血干细胞的胞龄结构
(四)造血干细胞的动力学: O. F  V7 y6 ]( L/ N% B  d! I
二、造血祖细胞
第二节造血干细胞的测定技术
一、CFUS的检测技术
二、以标记染色体测定脾结节的形成
三、脾结节移植法测定脾结节CFUS4 k. l, n5 j8 O8 Z. X! n; c
第三节体外培养造血祖细胞的特殊实验材料
一、培养用液
二、特异性刺激因子的制备/ [+ ]# b4 o8 U- \* B
(一)横纹肌条件培养液的制备
(二)白细胞条件培养液8 ]$ ?) H3 E  G7 n% W/ B$ g
(三)脾细胞条件培养液* T" L: R: i5 ~* \2 Z
(四)再障病人血清的制备
(五)胎肝细胞裂解液的制备' M2 w' `; F( D3 e7 B
第四节造血祖细胞的体外富集与培养& Y& \0 P* N0 Q& ?4 B  Q
一、造血祖细胞的富集
(一)单个核细胞的分离4 N( J& y9 g% Y
(二)CD34+细胞及其分离方法/ o( e' P1 P( u9 j9 F
(三)CD34+细胞的MACS免疫磁性分离方法" o0 ~. }4 K  U9 y8 t: Y& u; E
二、造血祖细胞的体外培养8 j/ \. K! C5 X2 k
三、各类造血祖细胞的培养技术
(一)CFUGM的培养
(二)红系造血祖细胞的培养
(三)巨核造血祖细胞的培养
(四)混合细胞集落的培养
(五)白血病细胞的培养
(六)无血细胞体内扩散匣培养技术  I3 G6 U% B2 v2 O) q# {/ }/ A
第五节造血祖细胞培养技术的实际应用
一、正常人骨髓内各种造血祖细胞的含量测定
二、某些血液疾病的细胞病理学
三、药物对造血细胞的作用研究
四、再生障碍性贫血的发病机制和预后以及造血干细胞移植治疗3 W- Z' i0 I8 A' \
五、体外测定造血祖细胞辐射敏感性与全身放射敏感性反应的关系
第十二章血淋巴细胞的体外培养  F3 Q8 z- \9 L$ n9 H# H
第一节各类淋巴细胞的主要特征8 s' T# j! a- F0 U' S9 {
一、T淋巴细胞, m- Q& W* d6 B9 k: h( l! |. |# q
(一)T细胞的表面标志* ?0 }! ?2 w( E# x
(二)T细胞亚群及其功能4 M. Y/ y; L5 _& r
二、B淋巴细胞
(一)B细胞的表面标志
(二)B细胞的亚群
三、大颗粒淋巴细胞+ |; Z' g" L; o; o" R# s
(一)NK细胞
(二)K细胞2 ~4 @% X, M3 ^# }# z
第二节血淋巴细胞的分离
一、单个核细胞的分离! O5 K2 X7 V  U& s& s
二、纯淋巴细胞的制备
(一)玻璃黏附法
(二)羰基铁粉法
三、T细胞和B细胞的分离
(一)T细胞花环沉降法3 g/ I# t2 o/ j' F) h# k3 S% s6 U" y
(二)尼龙毛柱分离法
四、大颗粒淋巴细胞的分离1 o3 u7 \1 Z2 T1 w; ^8 N/ ~
五、荧光激活细胞分离仪分离淋巴细胞及其亚群( C6 k8 X4 ~$ }+ L4 [/ _
六、免疫磁珠法分离各种淋巴细胞及其亚群
第三节血淋巴细胞的体外培养方法和应用
一、淋巴细胞转化试验
二、B细胞产生免疫球蛋白的检查
三、T细胞介导的细胞毒试验! s1 z$ s0 Q/ L" I
四、NK细胞毒性试验) f* A0 N- h, b9 ~1 }$ C/ y8 S: J
五、K细胞毒性试验
六、LAK细胞的制备
七、淋巴细胞的体外长期培养9 X+ B% v/ `( z5 D
(一)用IL2建立T淋巴细胞克隆
(二)用EB病毒转化B淋巴细胞
(三)用B细胞生长因子建立B淋巴细胞株
第十三章肌肉组织的体外培养* }: t1 D2 q" a7 L7 A
第一节肌肉组织体外培养技术概论% N) b* D- k) y0 \
一、肌肉组织体外培养技术的发展简史
二、肌肉组织细胞培养的意义与评价
第二节心肌细胞的体外培养9 ~3 R2 X  Q# r( a
一、心肌细胞培养的基本原理
二、心肌细胞培养用液0 K4 B1 b2 j+ |' X4 b
(一)常用平衡盐溶液# P: Q1 c+ b' F
(二)心肌细胞培养液# I2 W0 E# ^! h( y+ A
(三)其它培养用液; I) o9 h( U  F. _# @3 g
三、心肌细胞的培养方法
(一)心肌细胞的原代培养' `8 t+ G/ U1 F3 K8 z
(二)成年动物的搏动心肌细胞的制备
(三)心肌细胞培养方法的某些发展
四、心肌细胞培养的基本结果与观测方法" {6 J) U4 d, `
(一)一般观察8 b+ g& Y! ]# _0 M- k" L
(二)培养心肌细胞的形态学观察
(三)心肌细胞搏动的观察
五、培养心肌细胞的某些电生理特性
六、培养心肌细胞代谢的某些特点
第三节平滑肌细胞的体外培养9 l$ a8 \0 p! d! D
一、平滑肌细胞体外培养方法
二、培养平滑肌细胞的结果与鉴定
三、影响血管平滑肌细胞增殖的因素% ^+ s9 F' m, W6 V' N% v0 h1 A6 p
第四节骨骼肌细胞的体外培养
一、骨骼肌细胞培养所需主要材料- ]* u5 R) [  N4 J$ n" y% @
二、骨骼肌细胞培养方法( ^! J) ?1 h& ]0 ^; S- a3 {8 t
(一)乌类骨骼肌细胞的培养
(二)啮齿类动物骨骼肌细胞原代培养方法& l" N$ M( I" _9 Q# h
(三)从啮齿类动物肌肉中获取高纯度肌源性细胞的新方法
三、肌源性细胞系的建立3 `1 R( Y* J  m8 b0 e
第十四章神经组织的体外培养
第一节神经元的体外培养
一、神经组织的植块培养法
(一)概述
(二)灰质组织或神经节的体外培养2 h9 o+ j. ]7 [+ p# s% R/ w
(三)白质植块的培养/ p$ C. u6 D0 o% L; L
二、神经元的分离细胞培养方法
(一)材料的来源
(二)神经元体外培养液
(三)神经元体外培养的生长基质  b$ B; K" Y1 v0 e, m) `# |
(四)神经元的分离细胞培养过程
(五)神经元细胞的体外培养
第二节神经胶质细胞的体外培养4 }+ ]9 L6 W7 ]9 [9 `- d) f/ ~; t
一、星形胶质细胞的体外培养
(一)取材的动物年龄与部位
(二)星形胶质细胞的体外培养方法
(三)星形胶质细胞的无血清限定性培养液9 F4 z7 r$ U: @3 w; s
(四)星形胶质细胞的形态学特征与化学标志物. M" a& J9 w% V
二、少突胶质细胞的体外培养
(一)体外纯化过程
(二)体外培养少突胶质细胞的化学限定性培养基
(三)少突胶质细胞的化学标志物
(四)少突胶质细胞的形态学特征
三、施旺细胞的体外培养
(一)施旺细胞的体外培养方法
(二)施旺细胞的无血清限定性培养基
(三)施旺细胞体外生长的形态学特征与化学标志物
四、小胶质细胞的体外培养; p+ b, |$ S0 M6 [
(一)小胶质细胞的体外培养方法1 {& }0 J# {* [4 U1 p# K
(二)小胶质细胞的形态学特征与鉴定" I2 [9 S0 i1 V* `4 W
五、其它神经胶质细胞的体外培养
六、体外培养神经组织分离细胞的形态学特征比较6 X. ?2 s# W' D& ]( q
第三节各类神经组织细胞的培养方法7 M' t- ~8 j8 e. Y( q  i
一、鸡胚背根节的体外培养
二、大鼠颈上神经节的体外培养
三、大鼠小脑皮质神经元的体外培养3 k5 C6 `3 Q6 P9 _
四、大鼠星形胶质细胞的体外培养
(一)方法一：植块培养法
(二)方法一：分离细胞培养法
五、大鼠少突胶质细胞的体外培养9 _9 ^  f! k/ r5 d/ t5 _4 ~
(一)方法一：植块培养法
(二)方法二：密度梯度离心法9 U3 O8 @+ z5 |
(三)方法三：恒温摇床处理法# `2 t' F/ d( `' b! x) K7 n
六、大鼠施旺细胞的体外培养
(一)方法一：常规分离细胞培养法" n+ c- q4 @0 S, A3 G% O7 d+ R6 B
(二)方法二：免疫选择法" t, _5 {" b+ B4 Y
(三)方法三：反复植块法; K3 [6 b; Z* u7 S0 @9 d
七、鼠脑小胶质细胞的体外培养
八、脊髓神经元的体外培养
(一)方法一：差速黏附处理富集脊髓神经元培养法2 R- g* }7 i4 O8 g+ h6 I1 z+ s
(二)方法二：台面选淘富集脊髓前角运动神经元培养法) v) |+ C9 v3 g( Q
九、鼠脑神经干细胞的体外培养) E" m) |9 p' X+ G1 J+ c5 n6 `( O
(一)胚胎神经干细胞的体外培养
(二)成年脑组织内神经干细胞的体外培养
十、大鼠胚胎几种常用脑区组织体外培养的取材# U) ~( V6 ~: Z+ s" ~3 F
第三部分特殊类动物细胞的体外培养: Z3 @8 i3 j  O9 A! {2 O8 G
第十五章肿瘤细胞的体外培养) W4 h: l$ v$ b" v$ G* \
第一节肿瘤细胞在体内和体外的生长特性概论- S) R; P% k& x$ U
一、肿瘤细胞在体内生长的特征7 F; e: o  X2 C8 V4 N. v5 b
二、肿瘤细胞在体外的生长生物学特性/ D1 Y1 D, A, M( H1 X# y) g
三、肿瘤细胞在体内和体外的生长特征差别# J: @, y& w. B$ G5 a& R' s2 J
四、体外培养肿瘤细胞常用的培养基* c4 t5 R% o" U4 @- d; d
第二节体外培养肿瘤组织细胞的方法和技术" k* y7 C3 Q5 r/ b3 w: F
一、肿瘤组织细胞的原代培养; X4 u& J, e2 [5 h; r7 |- S
二、肿瘤细胞的传代
三、肿瘤细胞的克隆培养法% c& ^7 i* j+ [8 B1 g
第三节肿瘤细胞体外生长的细胞生物学特征& r3 M- e* r) b; ^( N1 D
一、肿瘤细胞体外生长的形态学与细胞学特征, O  f  B2 i1 T* i
二、肿瘤细胞的核型和异常生长特性
(一)染色体数目及核型
(二)永生性' j( O- i1 X; u8 I6 U  B
(三)异质性
(四)动物接种成瘤性/ h) T% v( T8 V- {: u
(五)非锚着生长依赖性
第四节已建立的肿瘤细胞系介绍
一、国内已建立的人类肿瘤细胞系介绍, p6 w9 d0 m% b; R) _* c8 M
二、国际上已建立的人类肿瘤细胞系
第五节部分肿瘤细胞的体外培养与建系过程
一、人鼻咽癌细胞系(CNE2)的建立
二、人骨肉瘤细胞系(HOS8603)的建立9 L2 }0 m$ n  u9 d' E) ]
三、大鼠肝卵圆细胞的本外培养5 C2 c6 g" u! a' a8 B
四、人神经母细胞瘤细胞系的建立
五、人肺腺癌细胞系的建立. R  k/ a+ q& @+ u; m0 R7 n
六、有肺巨细胞癌细胞系的建立+ l8 E" V$ q7 p& r( T* A
七、人肾颗粒细胞癌细胞系的建立
八、人卵巢癌细胞系的建立* I% J# U4 l' z0 \$ v, X" E" D7 L* S
九、人肝癌细胞系的建立0 p* _9 b$ j2 [( I6 Q; k# S, g
十、人喉腺泡型横纹肌肉瘤细胞系的建立" k4 @9 A  C% I+ y  d) l- H1 V
十一、人恶性胸膜间皮瘤细胞系的建立1 A9 N* G& C9 I* X* H% D
十二、人乳腺癌细胞系(HATTORI)的建立
第六节肿瘤细胞培养的应用
一、肿瘤细胞对组织浸润的体外研究
二、人恶性肿瘤细胞的动物移植瘤研究6 q: r7 ]/ ?9 H6 l1 y7 _
三、培养肿瘤细胞的体外分化实验
四、培养肿瘤细胞的凋亡诱导研究' ^* {# D! m; ]  X' e- i% t" X
第十六章病原微生物的培养
第一节病原微生物培养技术概论
一、病原微生物培养的基本原理% _# ~/ j9 `  H
二、病原微生物培养的基本方法和技术
三、病原微生物培养的应用
第二节细菌的培养% S2 n) P& b2 z  m% N
一、细菌培养的基本条件
(一)细菌培养基; e, V/ X& C& l1 Q! j
(二)细菌生长的其它条件1 ]4 f8 ~8 ^: V& f6 c& F
二、细菌生长繁殖的特点
三、细菌培养的基本技术
(一)无菌操作技术
(二)细菌接种技术( p: V! X. i# l2 h% F# G
四、细菌培养的方法; _7 J2 y; ?; u& D
(一)一般培养法
(二)二氧化碳培养法
(三)厌氧培养法
五、各别类细菌的培养
(一)致病性葡萄球菌的培养, c: n& T: K: o1 z
(二)幽门螺旋杆菌的培养
(三)结核杆菌的培养& E2 ]. _: d" j4 p8 U5 U" u
(四)淋球菌(淋病奈瑟氏菌)的培养
第三节其它类菌的培养1 x; D$ b8 _7 L. g8 W
一、放线菌的培养
(一)放线菌培养的一般条件. ?' B! K% z; A
(二)放线菌培养基
二、真菌的培养
(一)真菌培养的一般条件1 T# X# ?5 z* r. i8 k
(二)常见致病真菌的培养基
三、支原体培养! j( A4 E% p2 E5 s" f) X
(一)支原体培养的一般条件2 }, n% E, E: E, Z& V3 g( r$ j
(二)常见病原支原体的培养基
四、立克次体的培养
(一)立克次体培养的一般条件
(二)常见病原立克次体的培养
五、衣原体培养. G  o2 i6 C2 |* @% P+ [
(一)衣原体培养的一般条件5 G# x; G: x( P9 U3 Y- \5 b- M: k8 p
(二)常见的病原性衣原体的培养+ U) A  }5 y: A. C9 v& S
六、螺旋体的培养$ \5 V  }: ?1 O9 w- o" H
(一)螺旋体培养的一般条件1 U8 e8 m* ]: X  t
(二)钩端螺旋体培养基
(三)常见病原螺旋体的培养- v; t- x. Q' q& ~5 O/ o
第四节病毒的培养/ t4 b# g; a. T% h& `3 Z3 J
一、宿主细胞培养法4 h  e/ C6 ?4 q
二、鸡胚培养法  n! I& E% L! C) x
三、各别类宿主细胞培养法! `6 h+ k" G: e
(一)EB病毒的培养* A# b5 x2 t9 W5 y% Z
(二)脊髓灰质炎病毒的培养  ?: S) E+ G0 j5 R7 Z
(三)乙型肝炎病毒DNA转染细胞系的建立和应用7 \2 I" W- ?+ Z9 ~/ S  h0 U
第十七章医学寄生虫的体外培养
第一节寄生虫的体外培养技术概论* ?8 ^* q7 E0 Q9 H- \3 A" |0 u) X
一、寄生虫的营养与代谢特点
二、寄生虫的体外培养技术类别# t: J  W0 I2 p/ s9 p5 Q, d
(一)寄生虫虫体培养
(二)寄生虫细胞培养  J" N2 L, Q( K4 x# }4 ]
(三)寄生虫的体外培养常用培养基; i- }! e- W7 ?
三、寄生虫体外培养技术的应用/ C7 q  s( u* `; d8 J( u" l
(一)在生物学研究中的应用. O6 ?/ w. p' T( Q
(二)在病理与免疫学研究中的应用# n% U* \: O- R+ m6 I5 K. h
(三)在药物学研究中的应用
第二节疟原虫体外培养: w8 t! m- w/ N# S* O1 @4 }4 [
一、疟原虫红外期体外培养; ^) @- `8 Y, z' I  O" |
(一)约氏疟原虫红外期的体外培养
(二)人疟原虫红细胞外期体外培养' j$ Y1 u2 }' v
二、疟原虫红内期体外培养4 z; i* Y# P3 @
(一)体外长期连续培养
(二)同步培养法4 j  d  Y& {3 v& |" O
(三)疟原虫冷冻保存技术+ H6 X1 H  c: J# {8 S; i
三、恶性疟原虫配子体的体外培养" B+ d, I. D& U2 b( Q- e! I" A3 K
第三节机会性致病原虫的体外培养  }) _% p- w& _  o' N# ^; r" w. a
一、弓形虫的体外培养& U8 j2 ~3 t! y" g/ J
(一)速殖子的培养方法之一：单层贴壁细胞接种培养法" ?* ?5 Y  n) d4 F$ ^9 l5 i8 Q
(二)速殖子的培养方法之二：悬浮细胞的接种培养法, m* a  i* G. n" A
(三)速殖子的培养方法之三：在鸡胚中种植的培养法
(四)包囊的培养  ~$ G+ P8 \" ~5 ^
(五)弓形虫的冷冻保存技术
二、卡氏肺孢子虫体外培养
(一)用非洲绿猴肾细胞系培养卡氏肺孢子虫
(二)用胎儿肺成纤维细胞系培养卡氏肺孢子虫
三、隐孢子虫体外培养
(一)在组织细胞内培养/ C2 ?3 T0 L* j/ C; s) x4 X
(二)在鸡胚中培养
第四节日本血吸虫体外培养- Y9 f8 S. D/ c, I  I' ]
一、培养基及培养条件
(一)培养基的种类8 ~# c: E, _7 R& y) E
(二)培养条件1 S7 j  @1 V7 p0 U& A
二、各期培养方法
(一)尾蚴人工转变童虫体外培养
(二)肺期童虫体外培养6 S4 l: f! `8 i0 D
(三)成虫体外培养
(四)虫卵的体外培养
(五)毛蚴至母胞蚴的体外培养8 i$ [) @, X! N7 m3 {* N8 q
(六)子胞蚴和尾蚴的体外培养
(七)血吸虫成虫和童虫细胞的培养
第五节棘球绦虫体外培养
一、细粒棘球绦虫的体外培养: j3 c  B2 e: j" I
(一)囊型发育+ X/ |' s. E* t; e6 o7 m( U, |  ^& o
(二)链体发育
(三)成虫体外培养
(四)细胞培养# F8 n2 d; ]+ B/ L" A, l
二、多房棘球绦虫体外培养: S/ d1 g% Q8 U7 r% \* a
(一)多房棘球绦虫虫体培养
(二)多房棘球绦虫细胞培养
第十八章无脊椎动物组织的体外培养
第一节无脊椎动物细胞培养的基本方法和技术- I6 l: K( r! v
一、体外培养无脊椎动物细胞的基本条件
(一)无脊椎动物细胞培养基* ]' g  \' x& z7 Q
(二)无脊椎动物细胞常用培养基的配方
(三)昆虫组织培养基的配制* _  `4 `. ^+ E
(四)体外培养无脊椎动物细胞的其它条件
二、无脊椎动物细胞的原代培养
三、无脊椎动物细胞的传代培养
四、无脊椎动物细胞的悬浮培养
五、培养细胞的低温保存和冷冻保存* \0 |- e' A! d, B7 n% G
第二节无脊椎动物的器官培养. c( M8 t$ I2 Y
一、软体动物器官的体外培养
二、蠊翅目昆虫的体外器官培养$ R! s4 u5 w- r
第三节无脊椎动物细胞系(株)的建立! C: d! J0 l$ ?, J% h
一、昆虫细胞系的建立: z2 k2 |; n! @- m% ^7 H, v
(一)鳞翅目
(二)双翅目
(三)蠊翅目" n& U, K0 {9 C6 V
二、昆虫缺陷型细胞株的建立
三、软体动物细胞系的建立$ V$ N# b% [0 L. ?  n* W
(一)蜗牛细胞系的建立2 l+ n# L0 W* L  W9 u2 [* e
(二)牡蛎细胞的离体培养6 g; v) Z4 p& s  ~8 O! R8 T
四、蜱螨(扁虱)细胞系的建立0 F* y% x$ H- {; @8 d, v
五、建立细胞系的注意事项
第四节无脊椎动物细胞的大规模培养
一、大规模悬浮细胞培养的添加剂  [& n: P6 H4 e
二、低剪切力连续生物反应器
三、有血清培养基扩大规模培养昆虫细胞技术. r$ T( B$ p0 X" S7 P
(一)扩大规模培养的主要材料5 H7 |3 W; z+ \$ x# Q1 Z  j+ H
(二)扩大规模培养方法
四、无血清培养基扩大规模培养昆虫细胞技术, h7 V' I0 P( e4 M
第四部分体外培养技术的应用
第十九章体外培养的应用技术
第一节细胞分化与体外诱导分化3 p5 s( {" r9 |) d: b2 `
一、正常细胞分化
二、EC、ES和EG细胞系
三、ES和EG细胞培养和建系的基本技术
(一)饲养层细胞
(二)胚胎细胞来源
(三)ES和EG细胞的培养过程
(四)ES和EG细胞系特性和鉴定
四、ES细胞体外诱导分化
(一)ES细胞体外诱导分化的意义
(二)ES细胞体外诱导分化的基本原理
(三)ES细胞体外诱导分化的基本方法2 a* q. I: g7 ]. `# z, y- x
(四)ES细胞体外分化的细胞类型, L2 E) O2 z- j, D* z! J
五、诱导分化细胞的永生化; M/ D9 o% k+ W% t3 G) g2 e
第二节细胞融合技术  O% a  E4 l- A, q  S
一、病毒融合法
二、聚乙二醇诱导细胞融合法9 H' U$ J8 w# ^6 H
三、电诱导细胞融合法! n) m  ]1 T; S& }, E: _$ W, l
第三节体外受精技术" n( V7 m" c1 S5 w
一、体外受精的基本实验条件9 ~# Z" B0 g$ q! O: P8 a
(一)体外受精所需的主要仪器设备和消耗用品% `4 }2 a0 Z4 u; ?2 x* a& K: x
(二)体外受精与胚胎培养环境的设备和管理
(三)胚胎培养液5 i7 g. u" i1 P
二、胚胎的体外培养9 U  |9 ^- o4 _, ^! G/ k
(一)卵母细胞的收集- e  s4 a2 s( X' }9 a( Y
(二)精子的体外获能
(三)体外受精
(四)卵裂观察及胚胎评分3 Z/ o! K- Q" L) O* d: H9 f
三、胚胎移植7 [5 E2 i- A; o4 f  }0 M5 q
第四节基因转染技术与体外细胞转化- f& E) K' J( @; s! N7 T
一、基因转染技术% `# M  s3 z7 l
(一)待转染细胞的准备& K9 E/ g7 a# q9 a, Y" B# [1 \( v! B5 M
(二)质粒DNA的纯化
(三)基因转染的方法
(四)转染细胞的筛选
二、体外细胞转化% D; a* N0 t: h
(一)细胞转化的概念与细胞转化的过程
(三)诱变因素诱发培养细胞转化的程序$ [6 k6 B) `( K2 v
三、转基因动物/ i$ Q; r/ s1 s! }" H
第五节杂交瘤技术与单克隆抗体制备技术
一、杂交瘤技术
(一)B淋巴细胞杂交瘤技术的实验流程
(二)应用于杂交瘤技术中的培养用液  q) f! ]4 x2 j7 n# Y9 x% W
(三)杂交瘤细胞的染色体分析
二、单克隆抗体
(一)单克隆抗体的概念
(二)单克隆抗体的鉴定
(三)单克隆抗体的生产和提纯' k9 \/ L9 c! d! X5 `# V6 O
(四)单克隆抗体技术的发展6 B, {5 N! d9 H5 w5 u: N, Q. ^
第二十章动物细胞大规模培养' e* i# K; c6 t% e% Y. r
第一节动物细胞培养有关的特性, q, n- Q5 ^$ k8 h: }
一、动物与微生物细胞的差别
二、动物细胞生长特性
第二节发酵' U" n: e- X9 J' Q' _
一、培养方法
(一)贴壁培养
(二)悬浮培养) O  E% Q2 G" {5 k
(三)固定化培养/ _9 o7 g) L' Y
二、动物细胞培养的发酵工艺. P! b$ M) r$ n
(一)分批式培养) T. k3 e2 n# z# U
(二)流加式培养9 i6 D' F1 E$ c  {
(三)半连续式培养  h' _4 |9 F" F3 P4 n& ?) H5 w
(四)连续式培养/ s/ ~2 V4 Y( |8 q$ N1 p" P
(五)灌注培养
三、发酵工艺条件及其控制
(一)培养基9 L+ o; @# z. s9 |! B* @- e* d# }( M/ t" ~
(二)培养温度的调节控制3 N- e( c3 m  e" l; M+ G& @
(三)培养液酸碱度的调节控制5 _% ^. V- X+ x6 P) i, x
(四)溶解氧的调节控制
四、动物细胞大规模培养用生物反应器3 ~: L) X9 j9 i! B% p& {# w* U' n
(一)搅拌罐生物反应器7 a8 S- h9 N4 G" K# s% R
(二)气升式生物反应器
(三)鼓泡式生物反应器
(四)中空纤维生物反应器. m5 M' @& I8 W
第三节动物细胞微载体培养技术
一、动物细胞在微载体表面的贴壁生长机制
二、微载体的主要特性
三、微载体的种类及其性质2 L- {+ X# g8 o" C) c
(一)交联葡聚糖为基质的微载体
(二)塑料为基质的微载体2 |! ^! k/ a, D! M7 C
(三)明胶/变性胶原微载体
(四)玻璃为基质的微载体( n+ J; J+ _/ b7 a. c
(五)纤维素为基质微载体! J* p4 ]+ [% k! b
(六)液膜微载体9 G( H* G3 h' q: a& D+ O  D7 k
(七)大孔微载体( K1 }6 }) \% p* q9 C/ r
四、微载体的选择
第四节动物细胞大规模培养技术的应用
一、在疫苗生产上的应用# e" O! y! K6 L- p2 [9 k9 \
二、在干扰素生产上的应用
三、在单克隆抗体生产上的应用
四、在其它基因重组产品生产上的应用
第五部分植物组织细胞的培养
第二十一章植物组织细胞培养的基本原理与技术
第一节植物组织细胞培养技术的概念和类别
一、植物组织细胞培养的基本概念3 v% |; M; L; [  w; C" W
二、植物组织细胞培养技术的类别& q+ w) U' W; I4 \3 k. P5 `$ I
第二节植物组织培养技术的发展简史/ j6 x( a, i9 g; l7 Z4 `( P5 U& s
一、植物组织细胞培养技术的创立阶段0 d- f! X/ L; t# e
二、植物组织细胞培养技术的发展阶段
三、植物组织细胞培养技术的应用研究阶段
第三节植物组织细胞培养技术概述
一、植物组织细胞培养的基本条件$ O) J$ n) j7 a
(一)植物组织细胞培养的营养条件
(二)植物组织细胞培养的环境条件' ]8 N0 z8 s7 {6 n
二、植物组织细胞培养的基本方法和技术
(一)植物组织细胞培养的基本方法& n/ W1 o. o- T, h# m! q" Y7 y
(二)植物组织细胞培养的基本技术
三、植物组织细胞培养的基本程序
四、植物组织细胞培养物离体生长的基本方式
(一)直接芽分化的方式) O9 z% k) o3 B
(二)通过愈伤组织形成的方式* x( |1 L% Y9 [  f6 l, B
(三)胚状体形成的方式9 T$ z& R9 B1 @( J' m/ z3 I5 w( a
五、植物组织细胞培养物的鉴定
(一)植物组织培养物的组织学观察
(二)植物组织培养物的染色体观察1 `4 x0 e# L4 o- _
六、植物组织培养技术与动物组织培养技术的异同
第四节植物组织细胞离体培养时的生物学特征, a2 k; R( H( Z- l$ ]% }
一、植物组织细胞离体培养条件下的全能性
(一)植物组织细胞的全能性具有普遍性+ n6 g% I7 K  C5 t8 R% n* J2 j
(二)植物组织细胞全能性实现的途径
二、植物组织细胞离体培养条件下的突变性  |" `9 A  F/ t" G' Y* }7 B0 d
(一)植物组织细胞的变异性具有广泛性
(二)离体培养的植物组织细胞变异机制
三、植物组织细胞离体培养条件下的类减数分裂现象
(一)植物组织细胞类减数分裂现象的存在
(二)体细胞类减数分裂发生的机制
第二十二章植物组织细胞培养各论
第一节植物的胚胎培养4 r  Q1 f$ @- [3 W- P
一、植物胚胎培养的概念
二、植物的幼胚培养
(一)幼胚培养的基本过程2 L2 x5 K# J3 s' @- w: l& p; K
(二)植物幼胚培养的实例: E3 \* |8 e) B
三、植物的成熟胚培养4 [# l6 v, p% k" }1 l
四、植物的胚珠培养7 d4 R9 f* X0 `6 C/ _; m. J" N1 y
(一)胚珠培养的基本过程
(二)胚珠培养的实例8 m8 b6 w7 M7 a! ?0 T- o; Q1 C
五、子房的培养
(一)子房培养的基本过程
(二)植物子房培养实例
六、植物的胚乳培养
(一)胚乳培养的基本过程- t0 ?( i; D8 v' @) `: ?0 L
(二)植物的胚乳培养实例
第二节植物的器官培养
一、植物器官培养的概念
二、离体根培养
(二)根培养的基本过程( L9 `* R! ^: }
(二)植物离体根的培养实例) d! B4 ?6 p" u. M. A* a
三、离体茎培养
(一)离体茎培养的基本过程
(二)植物茎尖培养的实例
四、离体叶培养
(一)叶培养的基本过程
(二)叶器官培养的实例# `; |* G7 E6 B
五、植物花器官的培养# \  f2 n5 u4 R0 l+ X1 x( p
(一)花培养的基本过程
(二)花器官培养的实例2 I; m$ b, Z% z, H' {9 u' a
六、植物种子和果实培养
(一)种子和果实培养的基本过程
(二)植物种子和果实培养的实例: }& {6 w8 S. {  b, J0 E2 z( s
第三节植物的组织培养) i6 v) g% x( R- _
一、植物的组织培养概念4 N' C2 K  _* u7 `. @
二、植物愈伤组织的培养! L# _9 O4 ]( ]/ F! R
三、植物胚性愈伤组织的培养4 X( ]" y6 C: [0 o) i! \% |
(一)植物胚性愈伤组织培养的基本过程% ?, @. W2 n$ g
(二)植物愈伤组织培养及植株再生实例
第四节植物的细胞培养  h' E2 t* |! R  A+ ]5 @7 K
一、植物细胞培养的概念$ N2 K3 y) T9 b) {
二、植物细胞悬浮培养
(一)植物细胞悬浮培养的基本过程
(二)悬浮细胞的培养实例
三、植物的单细胞培养! A/ R' g5 r* F+ ]" W
(一)植物单细胞培养的基本过程/ W7 `% m& D* `  j2 W
(二)植物单细胞培养实例
第五节植物的花药与花粉培养
一、植物花药与花粉培养的概念
二、植物的花药培养, Z& V, y  k1 _7 O7 ^
(一)花药培养的基本过程
(二)植物花药培养实例
三、植物的花粉培养* {2 ?( g) Q3 W" c' ?
(一)花粉培养的基本过程" ]& a3 {# {  J0 n% n( P5 \3 s5 v) u
(二)植物花粉培养实例" a  k& K" S3 v1 z
第六节植物的原生质体培养
一、原生质体培养的概念
二、原生质体的培养& @; }8 m  m# H
(一)原生质体培养的基本过程
(二)原生质体培养实例3 }: O) _0 x% H5 k2 V* V& g
第二十三章植物组织细胞培养的应用; I# ~  ]: `$ _! e8 ]
第一节植物组织细胞培养的应用技术
一、植物基因转移技术" N) c0 C" y9 }& a( Y: u' }
(一)植物基因的获取
(二)植物基因的载体" w% s" H/ D9 A) h6 c* N
(三)植物基因的转移方法
(四)转基因植物的检测
(五)植物基因转移实例* J& H# e/ u8 w% z$ B
二、植物体细胞融合技术
(一)原生质体融合的基本方法9 v" y# ]/ V' z. d3 G/ n# G
(二)原生质融合体的生长发育" ?) Z5 }. Q/ d; i: o4 n
(三)原生质体融合实例
三、植物体外受精技术+ \7 R- h5 f" j2 Y. v
四、快速繁殖植物技术
第二节植物组织细胞培养在农业上的应用; h0 k, ~  d  n. b7 o2 S5 _
一、利用植物组织培养技术改良植物品质
(一)利用植物组织培养技术进行倍性育种  O% t7 k& m; Y; J0 L
(二)利用植物组织培养技术进行远缘杂交育种7 D8 F( `8 }6 S- \6 S2 Q  L
(三)利用植物细胞培养技术进行突变育种; q! \2 \! C0 N2 q4 F/ o. i* o
二、利用植物组织培养技术培育脱毒植物
(一)利用茎尖培养技术进行植物脱毒
(二)利用植物组织培养技术进行植株脱毒* I( A, x+ G- ~1 i6 b1 q8 P7 A
(三)利用植物组织培养技术快速繁殖植物
三、利用植物组织培养技术保存植物种质
(一)植物组织细胞超低温保存的优点4 V2 `4 ]# w* C1 t- ^+ u
(二)植物组织细胞超低温保存技术/ ~. d) l3 O* m) E, H
(三)植物超低温种质保存实例
四、利用植物组织培养技术合成人工种子" ?& N" ?# j, b9 f
(一)人工种子的特点
(二)人工种子的应用前景+ T# i- y% A  ~9 x7 Z8 |# g( K
(三)人工种子制作的基本技术3 W5 Z! B. r5 M2 S7 u
(四)人工种子制作实例
第三节植物组织细胞培养技术与植物产品生产( N1 J5 d) h9 r% n& w! A0 v$ r
一、利用植物组织细胞培养技术工厂化生产试管苗4 z7 i* ^6 f- W6 S! B+ w8 x9 `% L
(一)用植物组织细胞培养技术建立植物的无性系6 |7 m1 i% d8 S5 A5 c, r* ?
(二)试管苗工厂化生产实例
二、利用植物细胞大量培养技术生产植物产品
(一)培养的植物组织细胞积累次生代谢物的特点
(二)培养的植物组织细胞积累的次生代谢物之类别
(三)利用植物组织细胞培养技术生产次生代谢物的方法
(四)利用植物组织细胞培养生产次生代谢物的实例. g  g% B5 k! G; k4 b( M6 Z2 L% V
第四节利用植物细胞培养技术生产植物药
一、利用植物细胞培养技术生产植物药的优势和不足
二、利用植物组织培养技术生产的植物药的类别& V8 N: h& C+ e2 G4 y$ o
三、植物药物生产的主要技术7 e) [* t- x; z8 v$ ?
(一)发状根培养技术& h0 |% E( T' _7 |/ z
(二)两相培养技术
(三)反义技术/ \% \0 V6 I9 s5 Q
四、利用植物组织细胞技术生产植物药的实例( v+ D4 y% s$ i# I
五、植物药工业化生产实例# C& Q: o  A; i- o9 o; F1 P3 n
附录5 s, [" J2 f+ X3 z. k/ ?( y# W  ~( p
附录Ⅰ无血清培养基及添加剂供应商一览表1 ]* W" k6 U" u5 M1 t
附录Ⅱ水合物的等量值表) V2 N6 \7 Z+ S) [* Y
附录Ⅲt界值表5 t. M3 ?+ h2 ]6 N7 I! T% J* j, ^  f
附录Ⅳ离心机转速(r/min)与相对离心力(RCF)的列线图

作者: hyxxj 时间: 2011-3-24 19:36

非常好的一本书，感谢版主的无私奉献

作者: dulaiyouyu 时间: 2011-3-24 19:41

。。。。确实有点贵。。。

作者: ffxi 时间: 2011-3-27 12:28

下一个看看

作者: ffxi 时间: 2011-3-27 12:29

回复 deron 的帖子 Z6 ~% n; _2 \- w/ g8 W
8 h o O4 H; m4 o% i
为什么我下不了？

作者: dqm185 时间: 2011-4-7 23:32

看看

作者: shen_coco 时间: 2011-4-7 23:40

看看

作者: shen_coco 时间: 2011-4-7 23:43

为什么我下不了呢，欺负小会员么

作者: dqm185 时间: 2011-4-9 03:19

本帖最后由 dqm185 于 2011-4-9 03:19 编辑
0 g) t8 P& G+ U- E) I9 ~
楼主辛苦了，经典书籍收藏了。

作者: henryjia 时间: 2011-4-9 03:34

good

作者: deron 时间: 2011-4-9 10:09

回复 ffxi 的帖子5 V# U7 _7 P# f& J) I

我想或许是论坛设置了至少50威望的人才能下载吧

作者: deron 时间: 2011-4-9 10:10

回复 shen_coco 的帖子# ?7 M" K! c' I; e

你再赚5个威望，就够了

作者: cz200203 时间: 2011-4-9 10:10

看看

作者: shen_coco 时间: 2011-4-9 12:25

回复 deron 的帖子

威望怎么赚啊

作者: deron 时间: 2011-4-9 12:27

回复 shen_coco 的帖子
0 v* l( J0 ?9 t- w/ z2 r" [1 H0 E6 J
回答别人提出的问题，或者发帖自己的经验总结。
一般来讲，原创的东西威望很高
回答问题，须言之有物，最好能够做到引证例证

作者: davenc 时间: 2011-4-11 09:06

谢谢，看看

作者: davenc 时间: 2011-4-11 09:08

谢谢，看看

作者: tingting2010 时间: 2011-4-27 16:38

我想看

作者: tingting2010 时间: 2011-4-27 16:44

deron你好！能不能把《体外培养的原理与技术》的电子版传给我一份呢？非常需要。谢谢！QQ1024735088

作者: botizhou 时间: 2011-4-29 10:10

Thanks.

作者: lunyuyuanxj 时间: 2011-4-29 10:39

谢谢

作者: xiangchou812 时间: 2011-4-29 12:53

又是一个不能看滴！！加油

作者: w1986725 时间: 2011-4-29 12:57

看看

作者: w1986725 时间: 2011-4-29 12:58

请问可以介绍一下是关于哪方面的体外培养? 想了解一下是不是想要的再下

作者: HMC 时间: 2011-4-29 13:09

回复 deron 的帖子
! x1 m3 E* Z, p! r
好啊，我是研究手工克隆的，非常需要这本书，但没有权限，可以发到我QQ380365735

作者: deron 时间: 2011-4-29 14:35

回复 w1986725 的帖子8 K1 d# _1 Q( m7 ~2 {( t: z
# }0 E, p" Q6 ?: P. K& A; a0 s
详见20楼

作者: deron 时间: 2011-4-29 14:36

回复 HMC 的帖子+ H8 D' N. F0 B' k$ Z

12个威望，很好赚，加油

作者: HMC 时间: 2011-4-29 15:05

回复 deron 的帖子

作者: HMC 时间: 2011-4-29 20:23

谢谢，就是贵了点，郁闷

作者: aspring 时间: 2011-4-30 18:05

便宜点嘛

作者: afei198520 时间: 2011-5-16 12:55

thanks for your sharing!

作者: cncpht 时间: 2011-5-18 21:00

谢谢

作者: 白色的风 时间: 2011-5-18 23:14

谢谢楼主

作者: hpy7777 时间: 2011-5-22 00:04

学习,学习

作者: newdayes 时间: 2011-5-27 15:15

好东西

作者: dahui 时间: 2011-5-27 15:24

thank you fo sharing

作者: embryonic12 时间: 2011-5-27 15:33

good

作者: ndwzf 时间: 2011-5-27 15:35

too expensive

作者: deron 时间: 2011-5-27 19:26

回复 ndwzf 的帖子7 [5 N# N0 s' g( }6 v( x! N4 S

书非借不能读也嘛

作者: 宝音 时间: 2011-6-10 17:24

谢谢啦

作者: embryonic12 时间: 2011-6-10 18:49

太贵了，

作者: varing 时间: 2011-6-10 19:24

回复 deron 的帖子

你想干什么呢 104个包包

作者: daniellad 时间: 2011-6-10 22:24

期盼已久谢谢楼主

作者: huangcong1988 时间: 2011-6-11 15:28

nice

作者: huangcong1988 时间: 2011-6-11 15:29

包包要得多了点。。。

作者: gqs2872022 时间: 2011-6-18 16:56

kankan

作者: 恋南国花锦 时间: 2011-6-18 19:48

很不错的东西，谢谢分享

作者: 虔诚医者 时间: 2011-6-19 00:40

很好的资料，但我还下不了

作者: andyz0922 时间: 2011-6-19 12:11

好的谢谢

作者: rainnyshine 时间: 2011-6-27 09:49

谢谢了！

作者: minoni 时间: 2011-6-27 09:55

先看一眼^哈哈^

作者: 青萍红檀 时间: 2011-6-27 17:39

想学习学习

作者: langziforever 时间: 2011-7-1 11:42

额，逼着我们刷包包！

作者: xbs530515 时间: 2011-7-9 00:36

非常感谢，

作者: 包罗 时间: 2011-7-10 20:32

我想要啊

作者: kyltfb 时间: 2011-7-10 22:34

多谢分享

作者: tait1 时间: 2011-7-11 00:37

kankan

作者: angelyannan 时间: 2011-7-11 13:34

谢谢分享

作者: 可怜的孩子 时间: 2011-7-11 14:22

谢谢

作者: aaaaaaaaaaaaaaa 时间: 2011-7-18 22:57

代表广大包友向deron致敬

作者: guohui04551 时间: 2011-7-20 08:55

谢谢分享

作者: oucflora 时间: 2011-7-26 23:44

感谢分享。以前在实验室一直看这本书，很不错

作者: oucflora 时间: 2011-7-26 23:46

不过因为developemental biology 把包包用完了，暂时不能下载了

?1 |! D+ S7 c
我需要等段时间了

作者: mdacc_vicky 时间: 2011-8-1 08:13

thank you so much

作者: sdwzg119 时间: 2011-8-1 08:29

看看~% ~# F$ A) [( T3 h

作者: jitianxing7021 时间: 2011-8-1 08:57

看看/ M2 ~+ y6 E u8 Z

作者: llingzu 时间: 2011-8-5 09:57

谢谢分享

作者: 100403fengyue 时间: 2011-8-5 20:57

好

作者: 仁心-妙术 时间: 2011-8-5 21:00

O(∩_∩)O谢谢楼主

作者: weiliwan 时间: 2011-8-11 09:57

可望而不可及7 m4 b$ Q" H, c( E2 _

作者: weiliwan 时间: 2011-8-11 09:57

可望而不可及! O/ C$ [5 i2 D' D& ^% G

作者: yao201098 时间: 2011-8-13 15:43

谢谢

作者: yourwish140 时间: 2011-8-13 16:03

kankan

作者: 思盈 时间: 2011-8-14 11:04

这本书太好了，急需！

作者: wy999 时间: 2011-8-28 23:47

这么好的书一定要顶

作者: llw17 时间: 2011-9-9 18:13

怎么才能下载啊

作者: buck1988 时间: 2011-9-21 10:43

好东西谢谢

作者: zphtcm 时间: 2011-9-22 15:05

我是一个初学者，正想看看此方面的书，谢谢！

作者: a0119_2001 时间: 2011-9-22 15:12

这个太需要啦~！~~~谢谢楼主

作者: 宗介 时间: 2011-9-23 01:20

多谢lz分享

作者: zwjlee 时间: 2011-9-23 09:57

谢谢分享！！！

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