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标题: 求助：骨髓间充质干细胞培养基 [打印本页]

作者: athena1988620 时间: 2011-3-21 17:24 标题: 求助：骨髓间充质干细胞培养基

大家用的骨髓间充质干细胞培养基是什么的，看文献上有用低糖的DMEM，也有用高糖的，这两个有什么区别吗？另外还有文献里加入谷氨酰胺，这个是必须的吗？还有一篇PROTOCOL还加入了3.7g/l的NaOH，这个也是必须用的吗？请高手指教，谢谢~

作者: ndwzf 时间: 2011-3-21 19:42

低糖、高糖的的DMEM均可。培养干细胞加谷氨酰胺效果较好。这麽大量的NaOH，ph只会改变的。

作者: daviddow 时间: 2011-3-21 19:57

DF12

作者: 张也行 时间: 2011-3-21 22:19

你确定protocol上不是3.7g/l的NaHCO3吗？ 3.7g NaOH? 太可怕了吧？

作者: tjutiger 时间: 2011-3-21 22:32

应该是NaHCO3，LZ千万不要搞错了，会被老板骂滴~~~

作者: jiangxin 时间: 2011-3-21 22:41

我也就用的DMEM,谷氨酰胺,双抗，血清。

作者: hygene 时间: 2011-3-22 07:54

我用高糖的，加入谷氨酰胺，效果不错。

作者: shuishanglingzi 时间: 2011-3-22 08:28

DMEM/F12 。如果是粉末自配的话应该加的是NaHCO3，不是NaOH，还可以加HEPES来维持PH。

作者: 清影 时间: 2011-3-22 08:40

回复 athena1988620 的帖子5 ^: M( M- f# O/ k

高糖容易引起干细胞分化；谷氨酰胺是要加的，如果你的培养基中本省就有，那就可以在一段时间内使用就不用加了。NaOH肯定是不能加的，NaHCO3是要有的

作者: 张也行 时间: 2011-3-22 09:32

培养液从生产到你们那里应该超过两周了，所以最好还是加上。Glumax之类的。

作者: askage 时间: 2011-3-22 09:42

回复 athena1988620 的帖子5 d- `* X2 [2 l

DMEM,高糖、高血清的培养基看文献说：容易导致分化，请用低糖。书上说MEM也可以，我没用过。谷氨酰胺必须要有，这是个很重要的必须氨基酸。“还有一篇PROTOCOL还加入了3.7g/l的NaOH”这个你引用错了吧，碳酸盐PH平衡系统：10%、5%的CO2分别对应不同质量的碳酸氢钠（10%好像是对应3.7g碳酸氢钠，你自己查询下）。

作者: 郝晓英 时间: 2011-3-22 10:43

我现在养的大鼠间充质干细胞用的是低糖的DMEM 配的时候加点谷氨酰胺还有青霉素链霉素也可以加点胰岛素养的细胞挺好的希望对你有用其实你多找点文献啊文献上应该都有的

作者: athena1988620 时间: 2011-3-22 10:53

athena1988620 发表于 2011-3-21 17:24 / G- a* n" c0 n, A2 K
大家用的骨髓间充质干细胞培养基是什么的，看文献上有用低糖的DMEM，也有用高糖的，这两个有什么区别吗？另 ...

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汗~~~重新看了一遍文献果然是NAHCO3，差点搞错了呵呵，我买的是配好的低糖DMEM，需要再加入谷氨酰胺吗？NAHCO3只是为了调节PH吗，如果买的是配好的是不是就不用加了？谢谢！

作者: athena1988620 时间: 2011-3-22 10:54

回复张也行的帖子% q0 M- Y; l3 _) r9 a% {+ n! f
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如果是配好的DMEM需要再加入NAHCO3吗？

作者: athena1988620 时间: 2011-3-22 11:02

回复郝晓英的帖子" r1 J# G5 L1 N

你有没有相关的文献？谷氨酰胺是不是现配现用？

作者: 张也行 时间: 2011-3-22 12:22

回复 athena1988620 的帖子) _" @1 e/ l4 J
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不用的，买的现成的DMEM里面有NaHCO3，不用加，不过你可以查一下他们加了多少NaHCO3，5%CO2培养箱应该是1.5-2g/L。

作者: askage 时间: 2011-3-22 14:02

回复 athena1988620 的帖子( I( Y. K; A" S1 J4 r
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你老买培养基的时候注意看哈培养基配方。很多有配方的。特别的东西都标注的有：有无谷氨酰胺、有无hepes，有无酚红，有无碳酸氢钠。喊代理商给你本目录，照到买就是

作者: cjhpumc 时间: 2011-3-22 17:30

间充质干细胞的培养基应该用低糖的DMEM，在作分化诱导时换成高糖的DMEM，原来的DMEM培养基里有谷氨酰胺，但时间长了需要补充，也可以选择补充GLUTAMAX，NAOH你肯定是看错了，维持酸碱平衡用HEPES就可以

作者: 文武庙 时间: 2011-3-22 22:29

谷氨酰胺是必须有的，一般买现成的培养液，谷氨酰胺和PH值是配好的，只是要注意，谷氨酰胺在培养液开封两周后浓度会逐渐降低，所以培养液开封后最好在两周内用完

作者: 郝晓英 时间: 2011-3-23 09:42

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谷氨酰胺就是在滤培养液的时候加一点啊你问一下师兄姐吧他们应该都会吧这个应该比较简单啊跟平常用的培养液率、配的而方法是一样的
不要总是想吃现成饭要多找勤问祝好

作者: ihonesty 时间: 2011-3-23 13:55

买的现成的液体培养基，DMEM-LG是不需要自己再添加其他成分的，成分在瓶子上都有标明，自己配血清浓度加双抗就可以。如果你养的间充质干细胞是用来诱导分化的话，建议用DF12.如果养原代进行检测的话，建议用DLG。其实我也是个新手，这些都是文献上看的，自己也进行过一些预实验，感觉两种差别也不是特别大，还请大家多多指点。

作者: fengxuan 时间: 2011-3-24 10:10

回复 jiangxin 的帖子8 ?4 ^1 p: L, n# W! Y$ ?
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为什么加入双抗？仅仅防止污染不？请教

作者: jiangxin 时间: 2011-3-24 22:30

回复 fengxuan 的帖子1 O5 Q/ h! E9 Z. L- L+ ?

不敢当，应该是防止污染吧。

作者: 飞翔的十字架 时间: 2011-3-26 11:49

我一般用gibco的L-DMEM 没有谷氨酰胺的但是用glutmax 替代不容易分解

作者: winner 时间: 2011-3-27 23:34

我们都用df12 加谷氨酰胺一直挺好

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