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标题: 求助：骨髓间充质干细胞培养基 [打印本页]
作者: athena1988620    时间: 2011-3-21 17:24     标题: 求助：骨髓间充质干细胞培养基

大家用的骨髓间充质干细胞培养基是什么的，看文献上有用低糖的DMEM，也有用高糖的，这两个有什么区别吗？另外还有文献里加入谷氨酰胺，这个是必须的吗？还有一篇PROTOCOL还加入了3.7g/l的NaOH，这个也是必须用的吗？请高手指教，谢谢~
作者: ndwzf    时间: 2011-3-21 19:42

低糖、高糖的的DMEM均可。培养干细胞加谷氨酰胺效果较好。这麽大量的NaOH，ph只会改变的。
作者: daviddow    时间: 2011-3-21 19:57

DF12
作者: 张也行    时间: 2011-3-21 22:19

你确定protocol上不是3.7g/l的NaHCO3吗？ 3.7g NaOH? 太可怕了吧？
作者: tjutiger    时间: 2011-3-21 22:32

应该是NaHCO3，LZ千万不要搞错了，会被老板骂滴~~~
作者: jiangxin    时间: 2011-3-21 22:41

我也就用的DMEM,谷氨酰胺,双抗，血清。
作者: hygene    时间: 2011-3-22 07:54

我用高糖的，加入谷氨酰胺，效果不错。
作者: shuishanglingzi    时间: 2011-3-22 08:28

DMEM/F12 。如果是粉末自配的话应该加的是NaHCO3，不是NaOH，还可以加HEPES来维持PH。
作者: 清影    时间: 2011-3-22 08:40

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1 @4 |9 h: W/ D) @6 I. l6 J& l0 P# Y8 Z1 h7 b8 [& c
高糖容易引起干细胞分化；谷氨酰胺是要加的，如果你的培养基中本省就有，那就可以在一段时间内使用就不用加了。NaOH肯定是不能加的，NaHCO3是要有的
作者: 张也行    时间: 2011-3-22 09:32

培养液从生产到你们那里应该超过两周了，所以最好还是加上。Glumax之类的。
作者: askage    时间: 2011-3-22 09:42

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# x0 k+ p/ m9 y1 u& F# bDMEM,高糖、高血清的培养基看文献说：容易导致分化，请用低糖。书上说MEM也可以，我没用过。谷氨酰胺必须要有，这是个很重要的必须氨基酸。“还有一篇PROTOCOL还加入了3.7g/l的NaOH”这个你引用错了吧，碳酸盐PH平衡系统：10%、5%的CO2分别对应不同质量的碳酸氢钠（10%好像是对应3.7g碳酸氢钠，你自己查询下）。
作者: 郝晓英    时间: 2011-3-22 10:43

我现在养的大鼠间充质干细胞  用的是低糖的DMEM  配的时候加点谷氨酰胺  还有青霉素  链霉素  也可以加点胰岛素   养的细胞挺好的  希望对你有用  其实你多找点文献啊   文献上应该都有的  
作者: athena1988620    时间: 2011-3-22 10:53

athena1988620 发表于 2011-3-21 17:24
0 c3 z8 N0 {3 \9 X大家用的骨髓间充质干细胞培养基是什么的，看文献上有用低糖的DMEM，也有用高糖的，这两个有什么区别吗？另 ...
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汗~~~重新看了一遍文献 果然是NAHCO3，差点搞错了 呵呵，我买的是配好的低糖DMEM，需要再加入谷氨酰胺吗？NAHCO3只是为了调节PH吗，如果买的是配好的是不是就不用加了？谢谢！
作者: athena1988620    时间: 2011-3-22 10:54

回复 张也行 的帖子# `" W, d/ d" K& p5 H' Y. U' e
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如果是配好的DMEM需要再加入NAHCO3吗？
作者: athena1988620    时间: 2011-3-22 11:02

回复 郝晓英 的帖子' h0 A5 {# F1 g* e6 q# h& F+ _! _

1 D& p7 n7 _$ x+ M+ l# F& ]. A你有没有相关的文献？谷氨酰胺是不是现配现用？
作者: 张也行    时间: 2011-3-22 12:22

回复 athena1988620 的帖子
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0 q* y( C1 A1 N9 I* ]3 j! @不用的，买的现成的DMEM里面有NaHCO3，不用加，不过你可以查一下他们加了多少NaHCO3，5%CO2培养箱应该是1.5-2g/L。
作者: askage    时间: 2011-3-22 14:02

回复 athena1988620 的帖子7 e0 Y" E: n4 w  N' A

2 ]2 ^3 }( {  O- j* S你老买培养基的时候注意看哈培养基配方。很多有配方的。特别的东西都标注的有：有无谷氨酰胺、有无hepes，有无酚红，有无碳酸氢钠。喊代理商给你本目录，照到买就是
作者: cjhpumc    时间: 2011-3-22 17:30

间充质干细胞的培养基应该用低糖的DMEM，在作分化诱导时换成高糖的DMEM，原来的DMEM培养基里有谷氨酰胺，但时间长了需要补充，也可以选择补充GLUTAMAX，NAOH你肯定是看错了，维持酸碱平衡用HEPES就可以
作者: 文武庙    时间: 2011-3-22 22:29

谷氨酰胺是必须有的，一般买现成的培养液，谷氨酰胺和PH值是配好的，只是要注意，谷氨酰胺在培养液开封两周后浓度会逐渐降低，所以培养液开封后最好在两周内用完
作者: 郝晓英    时间: 2011-3-23 09:42

回复 athena1988620 的帖子$ C* U; H, B% {7 m# m
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谷氨酰胺就是在滤培养液的时候加一点啊  你问一下师兄姐吧  他们应该都会吧   这个应该比较简单啊   跟平常用的培养液率、配的而方法是一样的
6 {  B: B& B* f1 b+ |不要总是想吃现成饭   要多找  勤问  祝好
作者: ihonesty    时间: 2011-3-23 13:55

买的现成的液体培养基，DMEM-LG是不需要自己再添加其他成分的，成分在瓶子上都有标明，自己配血清浓度加双抗就可以。如果你养的间充质干细胞是用来诱导分化的话，建议用DF12.如果养原代进行检测的话，建议用DLG。其实我也是个新手，这些都是文献上看的，自己也进行过一些预实验，感觉两种差别也不是特别大，还请大家多多指点。
作者: fengxuan    时间: 2011-3-24 10:10

回复 jiangxin 的帖子
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为什么加入双抗？仅仅防止污染不？请教
作者: jiangxin    时间: 2011-3-24 22:30

回复 fengxuan 的帖子
5 ~" I. \6 J7 l. ^6 |7 l  T! P, l0 N. N5 r
不敢当，应该是防止污染吧。
作者: 飞翔的十字架    时间: 2011-3-26 11:49

我一般用gibco的L-DMEM   没有谷氨酰胺的 但是用glutmax 替代 不容易分解
作者: winner    时间: 2011-3-27 23:34

我们都用df12 加谷氨酰胺 一直挺好



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