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标题: 【求助】请大家帮我看看这是MSC成脂成骨诱导图片吗? [打印本页]

作者: feifei105    时间: 2011-3-25 12:52     标题: 【求助】请大家帮我看看这是MSC成脂成骨诱导图片吗?

分离小鼠骨髓间充质干细胞,P1代诱导成骨和成脂20天,请大家帮我看看这是阳性染色吗?成骨用茜素红S染,成脂用油红O。我有3个问题:1. 成脂溶液好像有问题,加进去第3天就有好多细胞死了,跟以前不一样的。战友们有遇到过这种情况吗?还是死的细胞根本就不是MSC,在成脂溶液中活不了。2. 箭头所指也是成脂肪阳性细胞吗?但这跟旁边的脂肪细胞无论从大小还是染色深浅上都有所不同啊?3. 我这是是预实验,没作对照,感觉成骨染色是假的,跟脂肪的分化能力比,也太玄虚了吧?
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作者: luoziwei    时间: 2011-3-25 15:23

我也遇到过这种情况,脂肪滴太不明显了,加大IBMX的量,加胰岛素吧,之前我没加胰岛素就没做好成脂肪诱导,郁闷
作者: luoziwei    时间: 2011-3-25 15:25

下面两幅图还像茜素红,上面的嘛,不太好说。建议你把背景色降低
作者: luoziwei    时间: 2011-3-25 15:26

感觉你像是通过升高饱和度的吧?
作者: tangyvhuang    时间: 2011-3-26 19:07

对于成脂的诱导就是这样的,我做的几次都是大量的死亡,本身诱导实验用的培养环境就不是间充质的生存环境,我们诱导成脂的时候接种的细胞密度就比正常多一些。8 U  j; b/ E4 t1 Z' e- Y- O
上面两个图是成骨的诱导?实在是看不清楚啊,成骨诱导细胞死的要少。) o+ C' |/ M! g1 r5 x9 M+ F
感觉下面图的细胞就是脂肪细胞,一个大戒指样子,油滴把细胞核都挤到一边去了。
作者: feifei105    时间: 2011-3-30 10:07

回复 luoziwei 的帖子3 n( e( g5 A; g' ?% l: K7 ~" Q

1 X/ a+ \6 N# W' {不好意思才回复,我照照片时,一调白平衡就这样,以前不是这样,感觉不太对,骨结节应该没有这么大吧
作者: feifei105    时间: 2011-3-30 10:12

回复 tangyvhuang 的帖子: l7 A6 o% i5 Y4 u6 [1 ~

& A% J1 c; V( [( ~7 t我个人觉得还是细胞不纯造成的,但我看文献他们也不纯,但是就是很多细胞紧密排列在一起中间有几个成脂细胞呀,就觉得是不是什么成分多了,毒性太大?




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