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标题: 贴壁细胞从培养箱拿出来在镜下观察，就飘起来了，是怎么回事？ [打印本页]

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 14:22 标题: 贴壁细胞从培养箱拿出来在镜下观察，就飘起来了，是怎么回事？

问题如题，请教高手赐教！

作者: jiays 时间: 2011-4-1 14:48

三种可能：
1有些细胞贴壁能力很弱，如前列腺癌细胞，细胞复苏72h之内最好不要看.
2还有可能你用的是玻璃瓶培养，换用专用细胞培养瓶，# O% M, m, b; h5 M2 W" @
3如果还漂，细胞瓶用明胶包被，细胞的贴壁能力就会提高

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 15:42

回复 jiays 的帖子$ A5 Y. V( ^! [: ?$ U% w

细胞是康宁的塑料培养瓶，同一批细胞一共有10瓶，培养条件等都是一样的，其中有3瓶是这样，其他的贴壁很牢，没有上述现象啊

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 15:43

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难道跟细胞的多少有关系？

作者: pei 时间: 2011-4-1 16:27

是不是有污染支原体之类的，消化过度了也有可能啊。

作者: zzp40 时间: 2011-4-1 16:54

细胞太密也会漂的

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 16:56

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细胞不密，才融合40%--50%

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 16:57

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传代后已经贴壁的细胞，不用酶消化传代的。

作者: jiays 时间: 2011-4-1 17:25

回复 jiays 的帖子4 ~1 i7 e* t" o( \% S \1 r

如果是一次性的培养瓶，同一批培养基，应该不会出现这种情况，是否是培养瓶消毒后再利用，酸没有洗干净

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-1 17:58

回复 jiays 的帖子& v8 g% @3 B+ n% r3 l# K; U8 K
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是一次性的培养瓶，同一批次的

作者: jiays 时间: 2011-4-1 20:10

那可能是你在操作过程中污染了，看看细胞培养液是否浑浊

作者: dyg108 时间: 2011-4-2 14:17

提醒一下，如果培养条件完全相同，那么还有一种可能导致生长状态不同，那就是培养瓶的通气性，如果不是通气的瓶盖，那么你拧的瓶盖松紧就成了关键。瓶盖拧紧会导致培养基过碱，而细胞对碱性的耐受性比较差，甚至会导致死亡。

这个问题一般会容易忽略，但切记培养基宁酸勿碱！

作者: 柏林小杨 时间: 2011-4-2 15:08

回复 dyg108 的帖子

恩，我用的瓶子是带透气孔的瓶子。

作者: qhrenyi2011 时间: 2011-4-2 17:52

细胞先在培养箱中放置一段时间然后过30min后再加入培养液可能能贴壁

作者: qhrenyi2011 时间: 2011-4-2 17:55

回复柏林小杨的帖子6 P% \% r5 v# d% |" n
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细胞先在培养箱中放置一段时间然后过30min后再加入培养液可能能贴壁。这个跟细胞的适应性有关系

作者: cincry 时间: 2011-4-9 11:16

即使是同一批次的细胞，贴壁功能也有强有弱，因为他们是由不同的sing colony生长起来的。如果你的细胞分泌能力比较强的话，是很容易漂的。建议就是在培养时增加培养瓶的数量，希望到最后除去漂浮的细胞，还有足够数量的细胞用于下面的试验。我们不能控制细胞，只能做到自己的最好。try again!

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