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标题: 请问大家转染慢病毒载体时用什么转染试剂？ [打印本页]

作者: haijing12585 时间: 2011-4-3 22:55 标题: 请问大家转染慢病毒载体时用什么转染试剂？

请问大家在慢病毒载体转染进入293T细胞时采用什么转染方法，用什么试剂？有没有什么要注意的事项？为什么我做的转染效率老是上不去呢？一般就在百分之二三十左右。

作者: yeya 时间: 2011-4-4 02:36

用磷酸钙转染法或者脂质体转染法。看看细胞状态怎么样，还有质粒DNA的质量。

作者: jefferson 时间: 2011-4-4 10:16

同意楼上意见 t8 F4 o! L7 B+ I% f

转293T报道最多的是用Lipo2000, 效率很高. 如果条件比较稳定了, 用磷酸钙也不错, 成本很低,但要特别注意磷酸钙转染试剂的PH值, 对转染效率影响很大. ' k* ]- U7 m1 f" e& A+ S3 M0 ?8 j
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另外之前有战友说他转293T用Fugene6 比Lipo2000高, 所以建议你几种试剂如果都有的话都可以做个比对实验.

另外转染有很多细节会影响到效率,比如细胞状态, DNA纯度, 具体操作, 转染试剂和DNA的比例等等, 做转染论坛里有很多帖子, 你可以搜下.

作者: guitaoips 时间: 2011-4-5 16:32

Fugene HD效果其实是很不错的，我之前转过绿油油的一片，不过有时也会出现效率不高的情况，我个人觉得还是和细胞的状态关系最大。

作者: sun_happone 时间: 2011-4-10 12:15

我们用的是脂质体Lipo2000，还不错

作者: gact 时间: 2011-4-11 16:36

改变转染试剂，试试看，不行的话，，就考虑细胞的原因。。: g- F0 F3 | n9 o' h
据说293t细胞在20代内比较高效率。。

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