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标题: DOx诱导的病毒载体是如何作用的 [打印本页]

作者: gact 时间: 2011-4-11 16:25 标题: DOx诱导的病毒载体是如何作用的

DOx诱导的病毒载体是如何作用的
看到有文献中利用DOX药物开启、关闭病毒载体中转录因子的表达；
甚至可以用DOX一直持续诱导病毒载体携带的转录因子的表达。
是不是这个载体游离于细胞染色体外？并且能够在宿主细胞中持续自我复制？

作者: nanhanss 时间: 2011-4-11 21:12

关注，我下一步也要用到DOX。

作者: 64627675 时间: 2011-4-11 22:47

楼主随意搜索一下就应该有很多相关介绍的，我们平时经常用，反正根据需要嘛，看载体是TET-ON还是TET-OFF，需要的时候根据DOX的有效工作浓度换算一下，加进去，就可以起到开或关的作用，体外实验好控制，体内的话就要查文献或自己测试了

作者: gact 时间: 2011-4-12 11:11

慢病毒载体上一般会有tet抗性基因，可以通过Dox筛选？
Dox怎么开启外源基因表达的呢?
pTet-On基因表达系统是1992年Gossen等设计的一种受四环素调控外源基因表达的高效真核表达体系，该系统有两种表达质粒即调节质粒和反应质粒组成, 5 z9 V" {0 H8 ^1 `
调节质粒可表达一种融合蛋白称四环素反应转录活化因子(Tetresponsivetranscriptionalactivator,tTA), 该因子可与反应转录的四环素反应性元件(Tetresponsiveelement,TRE)结合。
在没有四环素(tetracycline)或其衍生物强力霉素存在的情况下, 引起插入启动子下游目的基因的高效表达。0 G' L6 P5 ]& d1 @: z) I
pTet-Off，相反，随着四环素浓度的增加, 基因的表达以一种剂量依赖性的方式逐渐关闭直至为零。
诱导倍数按下列公式计算:诱导倍数=+Dox/-Dox诱导倍数>20者为高表达克隆。/ P# z3 G8 \: V2 X6 r: Y# A
# ~4 b0 c* E/ a
2 J% m) s* _9 I" \
最近看了一篇文献（Matthias Stadtfeld.Induced Pluripotent Stem Cells Generated Without Viral Integration,science,2008），利用的似乎不是利用病毒载体做的，而是利用Oct4-IND的等位基因可诱导转录激活做的，很迷惑，求解答。

作者: yangpan521 时间: 2011-4-12 19:04

我最近也在做DOX诱导，用的是TET-ON，但不知是什么原理。望能求到简单易懂的答案。顺便说一下我有英文的说明，但是没看懂。请各位指导。

作者: 安静的折腾 时间: 2011-8-17 16:34

关注中

作者: ambassador 时间: 2013-11-27 23:18

http://en.wikipedia.org/wiki/Tet ... iptional_activation
这个图说的很清楚！Tetracycline-controlled transcriptional activation

作者: 碧螺春的秋天 时间: 2013-12-10 09:15

. U& L8 U/ `) r; s$ B `9 H

作者: 陆萌 时间: 2013-12-10 09:38

学习下~~

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