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标题: HEPES 的主要有什么作用？ [打印本页]

作者: lizzylively33 时间: 2011-4-26 17:28 标题: HEPES 的主要有什么作用？

经常看得到一些缓冲液或是一些培养基里面会有HEPES，请问，HEPES在其中的主要作用是什么？

作者: WAX 时间: 2011-4-26 18:20

起缓冲作用的吧，它的缓冲能力比较强！

作者: dulaiyouyu 时间: 2011-4-26 18:36

原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.实际操作中并非如此简单. 溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。

作者: HMC 时间: 2011-4-26 19:53

HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES

作者: 461650833 时间: 2011-4-26 20:31

对细胞无毒性作用。是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。细胞培养常用10mmol/L。

作者: wnavy200299 时间: 2011-4-26 20:48

就是一缓冲剂！@

作者: 生物化学zy 时间: 2011-4-26 21:48

应该是缓冲液的作用.

作者: lizzylively33 时间: 2011-4-27 08:41

谢谢各位的解答，

作者: yxwfly 时间: 2011-4-27 08:53

回复 lizzylively33 的帖子
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HEPES英文全称：4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid; N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid; 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazine]ethanesulfonic acid0 M0 z/ T8 j+ }2 \( I
中文全称：4-羟乙基哌嗪乙磺酸; N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸
分子式：C8H18N2O4S* x) A9 T2 p: \! e% s' l( u/ u
分子量：238.31
用途：对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。/ c: Q2 U0 K% m* X) P! v
细胞培养常用10mmol/L。) }9 Z; c$ G, v+ x7 ]9 X( Y
10mmol/L HEPE缓冲液配制方法如下：准确称取HEPTS 2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存。

作者: lizzylively33 时间: 2011-4-28 10:05

回复 yxwfly 的帖子6 D6 @5 ^! w2 V+ u: ]

谢谢，很详细呵！

作者: 王乾 时间: 2011-4-28 13:10

HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒. 原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.实际操作中并非如此简单. 溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。 2 X* ^1 h" v6 X/ e
HEPES使用方法有两种：
(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L. ) v9 N3 I. A3 C5 D: P% r u
(2)亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L），使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.

作者: hualin840518 时间: 2011-4-28 21:59

回复 lizzylively33 的帖子
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HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了 5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。

作者: yangpan521 时间: 2011-4-28 22:04

是一种缓冲剂，也可作为胚胎清洗液，

作者: lizzylively33 时间: 2011-4-29 09:35

回复王乾的帖子! @; w u @5 R; M

学习了，谢谢哈！

作者: 精益求精 时间: 2011-4-29 22:33

学到了，我今天还问了别人这个问题

作者: Scarlett 时间: 2011-9-28 08:52

多谢，非常有帮助

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