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标题: 求助是不是CIK细胞不能传代和冻存的，一次性诱导了就要使用的 [打印本页]

作者: 花饶然 时间: 2011-4-28 09:31 标题: 求助是不是CIK细胞不能传代和冻存的，一次性诱导了就要使用的

本帖最后由细胞海洋于 2011-4-28 20:49 编辑
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我也是新手，要养CIK，我想请问下各位高人一个很愚昧的问题，是不是CIK细胞不能传代和冻存的，一次性诱导了就要使用的

作者: 快乐无限 时间: 2011-5-3 15:54

可以传代的呀，因为是悬浮细胞，直接扩瓶就好了，我就是这么做的。不过，传个两代以后，细胞的生长速度就减慢了。# T) ?% z1 _& I* S5 E: R4 w! {8 {
至于冻存，我没做过，因为细胞数量太大，冻存比较麻烦，就没有试过。( N, r* l7 m) A+ u$ P

作者: jin179 时间: 2011-5-3 23:50

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作者: 我是丁香 时间: 2011-5-4 12:02

可以冻存复苏的，我这有一篇专利供你参考。

作者: 肉丁 时间: 2011-5-13 16:39

当然可以冻存啊，不过一般随着CIK细胞培养时间的延长，细胞活率会越来越低，建议是这样的，先诱导一到两代后，就冻存吧，用的时候复苏，当然复苏后也会死一部分细胞的，不过不会有太大影响，嘿嘿，个人建议哦

作者: 郭李晓磊 时间: 2013-3-12 10:22

我也很郁闷啊，长的不好

作者: cantonchn 时间: 2013-4-6 14:55

大家是在多少度下冻存的？

作者: wwxx66 时间: 2013-4-20 18:17

CIK尽量不要冻存，他和干细胞不一样。冻存的CIK复苏后活性大大的降低，活细胞数量也急剧的锐减。

作者: joe_binyang 时间: 2013-4-26 16:31

回复花饶然的帖子
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支持wwxx66说的，一般不冻存，传代是一定要的，要不数量不够

作者: easternliu 时间: 2013-4-27 10:02

用事实说话，曾经冻存，细胞流式表型，CD56阳性率降到极低，不建议冻存后使用

作者: weijunning 时间: 2013-5-8 15:35

原则上不建议冻存，CIK在第10天左右处于对数生长期，在瓶中如果生长不是很好，可以转入培养袋中进行培养，培养效果会大大提高。可以冻存，我们一般是选择在处于对数生长期的CIK进行冻存。

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-5-22 16:50

用于临床的话还是现做现用吧，冻存过后对细胞活性有影响，而且复苏后还有没有那个杀伤活性就不知道了，这个要做课题研究一下

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-5-23 13:58

你有加了血浆吗？如果加了血浆的话，血浆里面的纤维蛋白原会析出导致细胞粘连在一起形成团块，并且无法吹散

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-5-27 09:35

可以冻存的，在-196度冻存，复苏后再养几天然后用于临床。冻存的话避免不了会对细胞造成损伤，复苏后细胞的表面抗原阳性率会较之前有所降低，还有杀伤活性也相应降低。

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-7-25 11:31

回复 wwxx66 的帖子

CIK细胞冻存复苏后活性降低明显，能说一下原因吗？谢谢

作者: jingjing6837 时间: 2013-8-27 13:42

本人养CIK一般也不冻存，除非临床要求延迟治疗，但是细胞已经养上了，没办法只能冻存，冻存的话一般和干细胞流程一样，但是复苏后数量明显减少，细胞没有增值活性。所以复苏后最好是直接出场用，数量还要加倍。

作者: sunny.yc 时间: 2013-8-30 09:04

回复 jingjing6837 的帖子
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请问您冻存是的密度是多少呢，我在试验中也发现这个问题了

作者: jingjing6837 时间: 2013-8-30 10:36

回复 sunny.yc 的帖子0 \1 l* \! R1 }3 q
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50M/ml

作者: sunny.yc 时间: 2013-8-30 12:40

回复 jingjing6837 的帖子 ~6 E8 O$ Q+ R% W: n) E

我做过5x10的8次方的，细胞数量减少挺多的

作者: yangpan521 时间: 2013-9-2 08:44

回复永远的伊凡的帖子2 K6 k& p& m$ w& h0 I

可以将血浆灭火后，高速离心，细胞就不会出现粘连状了

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