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标题: 细胞冻存时4度放置一会儿出现液相分离 [打印本页]

作者: wxl87 时间: 2011-5-7 16:41 标题: 细胞冻存时4度放置一会儿出现液相分离

不知道大家，发现没有。细胞冻存时，把细胞4度放置一会儿出现液相分离。大家有没有留意过？这样对细胞有什么影响？

作者: yangpan521 时间: 2011-5-7 19:37

有，肯定的，冻存细胞在4度冰箱里不能超过半个小时，冻存液对细胞有毒性，所以要有培养液混匀，

作者: Helena110 时间: 2011-5-7 20:48

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作者: zhangyan813 时间: 2011-5-7 23:52

从来没有试过这样的，就像楼上说的，可能是因为你没有混匀，DMSO在16°就会结冰。

作者: wxl87 时间: 2011-5-8 16:10

回复 zhangyan813 的帖子1 Z( p6 [9 Q; v s4 P$ q

这个都是混匀后暂时存放在4度，因为还有一批要冻存，所以暂时存放。一个小时就会分液相了。

作者: songzxj 时间: 2011-5-8 20:14

DMSO在低温下会结冰的，还是现用现配，很方便的

作者: starlancer 时间: 2011-5-8 21:43

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是dmso析出来了吧。是不是没有混匀导致的？这个还真没仔细看过，每次在四度放置之后就直接放入-20度冰箱了。

作者: wxl87 时间: 2011-5-9 11:14

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是这样的, 因为我要操作很多细胞的冻存,所以最初做好的一批现在4度存放,等我做完所有的我在放入-80冰箱中.所以就出现了前面说的分液相的情况,现在想想,可能是操作时间长了,DMSO又吸出来了吧.

作者: zhenhuale 时间: 2011-5-9 16:38

DMSO没有这么容易析出来的，建议采用程序降温盒，直接放在-80℃。

作者: songzxj 时间: 2011-5-9 17:05

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你可以配好冻存液放在室温，两三个小时没有问题的。

作者: hehe100 时间: 2011-5-10 09:26

我们一般也不放置在4度，直接把冻存管包上棉花放置-80度一天后，放入液氮罐保存。

作者: gaorongbest 时间: 2011-5-11 08:42

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还是不要在4度放超过半小时，DMSO对细胞有毒，如果有冻存盒的话，直接放里面，再放到-80度，次日放液氮就行了。

作者: joesiezhao 时间: 2011-5-11 09:10

DMSO在16°c以下是结晶的，因此冷冻保护剂要DMSO和大分子的试剂混合使用，同时加入冷冻保护剂后应尽快放入-80冰箱或程控降温，以免液相析出。

作者: wxl87 时间: 2011-5-11 09:22

谢谢各位的解答！

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