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标题: 新手求助，想问下这个ips细胞形态对吗？是已经分化了吗？ [打印本页]

作者: ly200101042 时间: 2011-5-12 20:54 标题: 新手求助，想问下这个ips细胞形态对吗？是已经分化了吗？

如题啊0 p. q6 e7 v0 U, B3 l. i h i
我一个板里有好的克隆但是不多大部分克隆都不好是怎么回事啊# Y- b, V; D) i' i4 c T. L
刚开始养大家别笑话# @* q( O) o; X, b& m8 d! x0 G6 M
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作者: santiao 时间: 2011-5-12 22:00

右上和右下的克隆很好啊，楼上的可以把这些克隆挑下来单独扩增啊。还有，你的滋养层有点密了，你用的什么培养液啊，是血清还是knockoutSR?

作者: lifeida 时间: 2011-5-12 22:03

貌似分化了！这图片不清晰啊！

作者: ly200101042 时间: 2011-5-12 22:26

回复 santiao 的帖子

我用的是KSR

作者: ly200101042 时间: 2011-5-12 22:27

回复 lifeida 的帖子0 A4 I! e. Q4 `# ]
; [& j. f9 X9 E O' R1 u8 e0 b
我觉得下面那两张是不是好一些

作者: yangpan521 时间: 2011-5-12 22:54

能不能放大一点，要是能看到克隆的每个细胞就好了

作者: christophe 时间: 2011-5-13 08:29

最后一张图片的克隆形态挺好，细胞比较致密，克隆比较圆整，边界清晰，没有分化的细胞脱落。克隆不能长得太大，太大就要分化了。

作者: ly200101042 时间: 2011-5-13 16:07

回复 christophe 的帖子* L. N2 _7 h; A: V q

那前两张呢啊是不是已经分化了啊

作者: christophe 时间: 2011-5-13 17:48

第一张挺像分化了的，第二张感觉凑合。
你这个ips是带GFP的吗？在荧光下看看就知道了。

作者: ly200101042 时间: 2011-5-13 20:08

呵呵没有GFP啊

作者: sarah19860420 时间: 2011-11-10 05:40

christophe 发表于 2011-5-13 17:48 / J5 e6 A" p3 C
第一张挺像分化了的，第二张感觉凑合。6 X. k; D: f. v
你这个ips是带GFP的吗？在荧光下看看就知道了。

$ S/ `: R. L/ C7 h) Y O5 b
为什么带GFP就可以看是否分化了？如果带GFP，未分化的IPS仍然会带荧光，而分化的IPS就没有光了，是吗？

作者: wolfgang 时间: 2011-11-10 10:08

请问这iPS是人的还是鼠的，从第一张来看，不管是人还是鼠状态都不好，细胞有点儿脏，边缘不清晰，很可能已经部分分化了。最后一张的状态不错

作者: ly200101042 时间: 2011-11-14 00:07

wolfgang 发表于 2011-11-10 10:08 ! F& V' b- z: q/ b
请问这iPS是人的还是鼠的，从第一张来看，不管是人还是鼠状态都不好，细胞有点儿脏，边缘不清晰，很可能已经 ...

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这个是人的，刚开始养，不是很熟悉，不过现在已经好多了。
还想问下，一般大家看iPS细胞用多少倍的啊

作者: jefferson 时间: 2011-11-14 12:02

MEF太密了, 传代的时候不利于克隆贴壁.' O9 I9 x* t8 K4 e
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前面几张照片看不很清楚, 最后一张的克隆形态是比较好的. 如果孔内大部分克隆都已分化, 应即时用机械法将未分化的克隆挑取出来.

作者: ly200101042 时间: 2011-11-14 13:08

jefferson 发表于 2011-11-14 12:02
0 {8 Q, I6 K% x2 L9 sMEF太密了, 传代的时候不利于克隆贴壁.3 F) S+ c3 z7 s4 K2 u, r: S
7 B1 @: }' Q6 M
前面几张照片看不很清楚, 最后一张的克隆形态是比较好的. 如果孔 ...

呵呵好的谢谢啦

作者: dilal 时间: 2011-11-14 20:10

培养几天了？貌似长的太大了，太大了容易分化，传代时间一定要控制好，集落太大或太小传代都不利于细胞后期培养。% ]5 S$ e& J' d
饲养层偏密，这样影响细胞的形态，最后一张图片细胞状态很好。

作者: ly200101042 时间: 2011-11-16 11:32

dilal 发表于 2011-11-14 20:10 ! d, O7 V; u: \( O L& {: t
培养几天了？貌似长的太大了，太大了容易分化，传代时间一定要控制好，集落太大或太小传代都不利于细胞后期 ...

呵呵谢谢 * l$ C6 ~; x& T/ Q1 V
我也发现MEF的密度严重影响细胞的生长了啊谢谢提醒

作者: majing217 时间: 2011-11-16 11:47

最后一张的ips英爱没有分化，状态还不错。+ r% q5 _8 Q2 _4 O; m& _6 r$ m

作者: sguy 时间: 2011-11-17 15:37

滋养层太密了

作者: jieniao1 时间: 2011-11-17 15:53

这是我做的IPS，是狗的fibroblast，我做了DAPI染色，应该和你的形态差不多！

作者: liuzhenallen 时间: 2011-11-26 14:14

感觉有些克隆形态挺不错，只不过生长过于茂密了，建议传代传稀一点，就可以很好的控制分化趋势了

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