干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 冷冻技术手册——推荐给对冷冻机理感兴趣的板油们 [打印本页]

作者: deron 时间: 2011-5-19 22:38 标题: 冷冻技术手册——推荐给对冷冻机理感兴趣的板油们

本帖最后由细胞海洋于 2013-7-16 23:02 编辑

手册介绍
不可多得的一本好册子，deron向您推荐
介绍部分的翻译加入了个人的一些理解，未必做到了信达雅，不当之处请不吝指教  U8 g+ |. O  W  O) H# {

为保证研究和生物医学工艺中实验结果的可重复性和研究的连续性，现在科学家的主要任务是获得遗传稳定的活细胞。一系列的传代培养需要消耗时间，并且由于种群供选择的部分越来越少可导致污染或者基因突变。不过，细胞可以通过置于低温下暂停生长周期来达到所有实践目的，维系种群稳定性。低温下的稳态细胞称之为低温冻存——此为冷冻生物学的一个应用方向，或者低温下生命活动的研究。低温保存技术的改进可以发展低温下多种细胞类型的冻存方法。（现有的）的冷冻技术可应用于微生物、分离出的组织细胞、小块多细胞组织甚至于胚胎这样的复杂器官的保存。  Q" Y& o; f" F& t2 ?

冷冻过程饱含的复杂现象，即使历经数十年的研究，仍未完全参透。冷冻生物学研究引发了一个思辨——活体细胞冷冻过程中究竟发生了什么以及不利因素应当如何消除。由于水是所有活细胞的主要组分，作为生命发生的化学反应过程（的溶剂），因而当体系中所有水转化成冰时，细胞新陈代谢会停止。

不同降温过程中冰晶的形成：慢冻中，胞外冰晶先于胞内冰晶形成。冰晶形成后，因冰晶形成抽离水分，胞外渗透压增加，胞内水分通过细胞膜迁出以维持渗透压平衡。细胞外溶质浓度增加，胞内溶质浓度也增加，危害细胞生存。如果细胞内仍保有太多水分，可能会引发冰晶形成损伤以及溶解复苏过程中的再结晶损伤。  L8 C: m0 y4 l* A, N

在这些现象中，冷冻速率有一个引人注目的效果。快速冷却因冰晶均一稳定形成而减少了溶质浓度（损伤）效果，但是导致了更多的胞内冰晶形成。慢速冷冻正好相反，导致了大量胞内水分流失，因而胞内冰晶形成减少，但是增加了溶质浓度（损伤）效果。细胞渗透性影响了水分的流失率；较渗透性差的细胞而言，渗透性良好的细胞能够忍受快速冷冻法。Mazur等已经推设冰晶形成和溶质损伤在细胞失活方面均起到了负作用，并且有一种最适的冷冻速率可以降低各自的作用。除了极个别的情况外，1摄氏度每分钟的冷冻速率是一个不错的选择。用冷冻保护添加剂或者化学物质在保护冰冻细胞的同时，也可以减少溶质浓度增加和冰晶形成带来的负作用。最常用的冷冻保护剂是二甲基亚砜（DMSO）和甘油。另外，保持冷冻细胞在一个正确的储藏温度并用合适的复苏速率将减少对冰冻细胞的损伤。

册子

作者: aminhair 时间: 2011-5-20 09:24

感兴趣来的！还可以。是技术手册吧。呵呵

作者: apengforever 时间: 2011-5-20 12:45

不错，谢谢分享，好好学习一下

作者: ww2zyl 时间: 2011-5-20 13:46

怎么下载不下来呢

作者: 细胞海洋 时间: 2011-5-20 15:46

回复 ww2zyl 的帖子

不要使用迅雷使用浏览器默认下载

作者: huozhicb 时间: 2011-5-21 09:00

谢谢LZ！

作者: 张也行 时间: 2011-5-21 09:34

冷冻剂比如DMSO对细胞的负面作用也是影响复苏效率的一个因素吧。

作者: deron 时间: 2011-5-21 11:17

回复张也行的帖子
" m% v. ?$ W5 N3 N3 K/ T6 U2 a% q* A
DMSO的使用，怎么说呢，跟乙二醇等其它渗透性冻存剂相比，毒性略大了些，不过对冰晶体形成的阻碍作用要更强，双刃剑。利大于弊。
DMSO的确对酶等蛋白质类有变性作用

作者: xiyanglangke 时间: 2011-5-26 10:05

谢谢分享，谢谢

作者: FreeCell 时间: 2013-7-16 16:05

嘻嘻 1ex100anfok

作者: deshenglll 时间: 2013-7-17 08:10

看看

作者: yang179 时间: 2013-7-17 08:58

谢谢，我感兴趣

作者: meister 时间: 2013-7-17 09:23

不错

作者: michael1013 时间: 2013-7-17 11:47

看看

作者: lyj-0017 时间: 2013-7-17 12:37

学习一下，谢谢

作者: woosheng 时间: 2013-7-17 12:46

thanks

作者: 452359357 时间: 2013-7-17 16:57

看看

作者: wind789 时间: 2013-7-18 08:37

回复2 C* j o8 V4 n) b, G) n0 X+ P

作者: xld1984 时间: 2013-7-18 09:24

学习' v. C- b$ Q4 x

作者: xu_shufen 时间: 2013-7-19 08:51

kankan

作者: yhbletter 时间: 2013-7-31 15:54

2 O. A- B) B( B/ C8 }) N
嘻嘻 1ex100anfok

作者: beautylive 时间: 2015-5-23 10:43

感觉好像在哪里看过了，汗~

作者: 榴榴莲 时间: 2015-5-29 13:10

正好你开咯这样的帖

作者: 依旧随遇而安 时间: 2015-6-9 18:26

佩服佩服啊.

作者: biobio 时间: 2015-6-15 16:27

回复一下

作者: chimo100 时间: 2015-6-15 16:38

谢谢分享

作者: 杏花 时间: 2015-6-16 20:56

真是汗啊我的家财好少啊加油

作者: aulenuyah 时间: 2015-6-24 11:46

作者: 剑啸寒 时间: 2015-7-8 16:33

呵呵哪天得看看 `~~~~

作者: 剑啸寒 时间: 2015-7-16 15:18

不管你信不信，反正我信

作者: MIYAGI 时间: 2015-8-29 19:01

21世纪，什么最重要——我！

作者: 兔兔 时间: 2015-9-12 01:18

你加油吧

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-9-12 07:27

谁都不容易啊 ~~

作者: 红旗 时间: 2015-10-2 15:16

一楼的位置好啊..

作者: 昕昕 时间: 2015-10-13 21:27

我喜欢这个贴子

作者: 杏花 时间: 2015-10-28 22:31

皮肤干细胞

作者: 我心飞翔 时间: 2015-11-5 10:43

站个位在说

作者: beautylive 时间: 2015-11-18 11:39

回个帖子支持一下！

作者: 橙味绿茶 时间: 2015-11-21 13:09

来上茶~~~~

作者: 舒思 时间: 2015-12-7 15:22

我好想升级

作者: txxxtyq 时间: 2015-12-20 10:59

不错，感谢楼主

作者: aakkaa 时间: 2015-12-22 11:35

不错，看看。

作者: txxxtyq 时间: 2016-1-10 19:10

干细胞研究还要面向临床

作者: 泡泡鱼 时间: 2016-1-14 17:43

一定要回贴，因为我是文明人哦

作者: dypnr 时间: 2016-1-26 16:42

皮肤干细胞

作者: 榴榴莲 时间: 2016-2-14 17:56

先顶后看

作者: 兔兔 时间: 2016-2-17 13:01

顶顶更健康，越顶吃的越香。

作者: youngcell 时间: 2016-2-27 11:44

支持一下吧

作者: syt7000 时间: 2016-4-13 14:35

我想要`~

作者: 罗马星空 时间: 2016-4-15 14:43

我顶啊。接着顶

作者: 泡泡鱼 时间: 2016-4-26 09:27

就为赚分嘛

作者: 123456zsz 时间: 2016-4-27 20:36

一楼的位置好啊..

作者: 刘先生 时间: 2016-5-15 22:53

干细胞研究还要面向临床

作者: 舒思 时间: 2016-5-31 19:15

感谢党和人民的关爱~~~

作者: whyboy 时间: 2016-6-26 00:12

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: 安安 时间: 2016-7-23 23:00

朕要休息了..............

作者: dypnr 时间: 2016-8-11 09:54

间充质干细胞

作者: cjms 时间: 2016-8-31 14:27

顶你一下.

作者: aliyun 时间: 2016-9-27 17:50

我喜欢这个贴子

作者: henryjia 时间: 2016-11-30 23:31

very good

作者: IPS干细胞 时间: 2016-12-13 21:54

哈哈,这么多的人都回了,我敢不回吗?赶快回一个,很好的,我喜欢

作者: 橙味绿茶 时间: 2017-1-15 04:49

加油站加油

作者: 榴榴莲 时间: 2017-1-18 20:43

不要等到人人都说你丑时才发现自己真的丑。

作者: 剑啸寒 时间: 2017-2-2 17:01

也许似乎大概是，然而未必不见得。

作者: 安生 时间: 2017-3-20 11:01

我帮你喝喝

作者: wq90 时间: 2017-4-4 21:10

真是汗啊我的家财好少啊加油

作者: 黄山 时间: 2017-4-6 19:17

不错!

作者: 张佳 时间: 2017-4-9 20:53

也许似乎大概是，然而未必不见得。

作者: 3344555 时间: 2017-5-11 15:27

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: popobird 时间: 2017-5-11 19:10

不早了各位晚安~~~~

作者: 旅美学者 时间: 2017-5-22 05:35

嘿嘿

作者: biobio 时间: 2017-7-3 20:35

不错，支持下

作者: 求索迷茫 时间: 2017-8-5 16:31

祝干细胞之家越办越好~~~~~~~~~`

作者: pspvp 时间: 2017-8-14 18:27

干细胞研究还要面向临床

作者: MIYAGI 时间: 2017-8-23 08:01

肿瘤干细胞

作者: 安安 时间: 2017-8-23 15:01

今天没事来逛逛，看了一下，感觉相当的不错。

作者: aliyun 时间: 2017-9-1 03:33

牛牛牛牛

作者: 剑啸寒 时间: 2017-9-13 23:49

不知道说些什么

作者: 桦子 时间: 2017-9-28 07:42

不知道说些什么

作者: 王者之道 时间: 2017-10-2 14:41

你加油吧

作者: 我学故我思 时间: 2017-10-5 11:08

回帖是种美德.

作者: 狂奔的蜗牛 时间: 2017-10-14 11:18

(*^__^*) 嘻嘻……

作者: keanuc 时间: 2017-10-17 05:14

顶你一下，好贴要顶！

作者: 碧湖冷月 时间: 2017-10-20 08:43

加油站加油

作者: 一个平凡人 时间: 2017-10-20 18:26

天啊. 很好的资源

作者: lalala 时间: 2017-10-31 13:26

不知道说些什么

作者: 墨玉 时间: 2017-11-2 01:26

帮你项项吧

作者: netlover 时间: 2017-11-2 03:18

真好。。。。。。。。。

作者: 咕咚123 时间: 2017-11-8 13:42

抢座位来了

作者: youngcell 时间: 2017-11-11 17:35

其实回帖算是一种没德德，所以我快成圣人了

作者: na602 时间: 2017-11-24 17:18

彪悍的人生不需要解释。

作者: lab2010 时间: 2017-11-27 04:45

老大,我好崇拜你哟

作者: 化药所 时间: 2017-11-28 05:40

昨天没来看了～～

作者: 生科院 时间: 2017-12-2 00:41

今天临床的资料更新很多呀

作者: whyboy 时间: 2017-12-17 21:40

老大,我好崇拜你哟

作者: 生物小菜鸟 时间: 2018-1-6 08:10

楼上的稍等啦

作者: laoli1999 时间: 2018-1-25 12:35

干细胞之家是国内最好的干细胞网站了

作者: heart10 时间: 2018-3-13 19:39

呵呵,支持一下哈

作者: 温暖暖 时间: 2018-3-14 09:54

原来是这样

作者: xm19 时间: 2018-3-29 21:59

我想要`~

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)