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标题: 维生素C溶液的配制？ [打印本页]

作者: zerollx 时间: 2011-5-26 08:19 标题: 维生素C溶液的配制？

大家知不知道关于用维生素C可以提高ips诱导效率的文章中，成品的Vc粉剂是用什么溶解的，配好的储液如何保存？

作者: aminhair 时间: 2011-5-26 09:11

没有错的话应该是用乙醇溶解的。你可以去sigma的网站上看他们的Vc是怎么配的。还有，为什么不买溶液呢？

作者: zerollx 时间: 2011-5-26 10:27

回复 aminhair 的帖子( _3 \* V N/ j

好的，谢谢！实验室有成品粉剂哦……

作者: sunny2829 时间: 2011-5-26 14:55

用来养细胞的吧~~~可以用PBS配制~~~8 B/ X6 {" v0 \8 ? i2 e
裴文章里说Vc的工作浓度是10ug/ml，你称取100mg溶于10ml的PBS中，0.2um滤器过滤，这就是1000X的Vc，用的时候稀释1000倍来用就OK的了~~~
Vc很好溶解的~~~
Vc一般分装冻在—20℃，用的时候溶解就行了~~~

作者: 翅膀111 时间: 2011-5-26 21:13

如果按摩尔浓度的话，你可以称取0.18克VC+10毫升DMEM,配成0.1mol/L,过滤分装，避光保存防止氧化。

作者: huangcong1988 时间: 2011-5-27 08:55

回复 sunny2829 的帖子/ z9 c( R# } I' ?- N# Q
V" ^* v5 W) G* }# j
求文章，裴的那个文章，含Vc溶液配制的，谢谢，邮箱：huangcong880426@163.com

作者: jefferson 时间: 2011-5-27 14:24

裴教授实验室的标准配方：Vc(Sigma) 500mg, 超纯水10ml溶解，0.22um过滤，配成50mg/ml的1000X存储液，-20Ｃ保存。

作者: sunny2829 时间: 2011-5-27 14:56

回复 huangcong1988 的帖子- z, h3 ?+ o9 K3 }

已发。裴文章没具体讲如何配制，只是说了Vc工作浓度25ug/ml or 50ug/ml。
配制的话用超纯水或PBS均可，我是加到细胞中去的，干脆用PBS配制，方便呗~~~~: k! W( y# n& h! ?2 S

作者: huangcong1988 时间: 2011-5-27 16:21

回复 sunny2829 的帖子

非常感谢！！！

作者: nihaohao 时间: 2011-5-27 16:33

我们实验室用PBS配置。也是配成50mg/ml的1000X存储液（工作液为50μg/ml），-20Ｃ保存。用时注意避光。+ h/ y3 V5 ]8 ^. S: m& `

作者: 牙牙丫丫123 时间: 2011-5-27 19:29

一般Vc的工作浓度是10ug/ml，你称取100mg溶于10ml的PBS中，0.22um滤器过滤，分装，一般最好用锡箔纸包住避光保存，4度。用的时候根据自己所需要的工作浓度稀释就好了

作者: cicadacjk 时间: 2011-5-31 19:34

我给个标准配方吧$ Y4 t9 e4 Y* X0 Y4 S
维生素C必须使用2位磷酸化形式（sigma货号49752），或者盐形式（钠盐或者镁盐），否则肯定没有效果（溶解瞬间被氧化）
用超纯水配制即可，浓度随意，放负二十度保存
7 j; m9 \& }9 E$ }7 Z
不要试图在使用了GIBCO的KSR后还添加vitamin C，因为KSR假设用10%的话就已经含有50微克每毫升的维生素C了。

作者: zxmflying 时间: 2011-6-2 09:09

发个裴原版的vc配方：1 z# j3 V" }% G: B4 B- T/ O
[attach]27917[/attach]
另外，附上裴的原文[attach]27918[/attach]5 E/ I. { v4 f! P) m6 g/ i; l
希望对大家有用

作者: snany 时间: 2011-6-2 10:51

VC是水溶性维生素，因此只要用PBS或者无血清的培养基配制成100倍浓度的贮存液，使用时按比例加入就可以了。配制好后先做除菌过滤。

作者: starlj 时间: 2011-6-2 14:49

用于做iPS的Vc最好用Vc的稳定形式二磷酸维生素C，sigma 货号：49752。裴教授文章所用的Vc均是这个货号。50μg/ml也是指二磷酸维生素C的浓度。普通的Vc即抗坏血酸，很容易被氧化，4度保存超过2个星期效果就会大打折扣。二磷酸Vc是水溶性的，用超纯水配制50mg/ml 存储液，溶解看不到任何颗粒后0.22微米滤膜过滤，溶液有极微弱的黄色。分装长期保存在-20度，4度保存1个月，避光，重编程效率没有明显影响。做ips二磷酸Vc的工作浓度在20到100μg/ml之间均对重编程效率有显著提升作用，且效果相差不大。一般采用50μg/ml。

作者: jane2011 时间: 2011-10-26 11:24

回复 starlj 的帖子
4 c: ]0 X/ |( d w- j9 x
才看到这个帖子，我就买错了，买成了Vc, 我就想这个东西这么容易氧化，怎么保存啊。晕死:(，赶紧订了一只49752，谢谢你分享

作者: inno 时间: 2011-10-26 14:07

请问一下，实际中加了Vc,作用大嘛？

作者: YLL824WAN 时间: 2011-11-28 21:18

回复 sunny2829 的帖子# R$ M% W9 r$ G# b* o

你好！我也在做这方面的实验，裴的那篇关于Vc可以提高iPS诱导效率的文章可以也发我一份吗？我邮箱yll824wanlf@yahoo.cn ，不胜感激啊！

作者: pang319 时间: 2012-11-13 09:22

对我很有帮助

作者: Jonathan 时间: 2012-11-23 13:59

回复 sunny2829 的帖子8 w3 y L4 O2 ^ G+ m
/ m2 k+ I' e' z/ U1 O; a5 A* m$ c) N
浓度是50ug/ml。配成50mg/ml的存放于-20度。用的时候稀释1000倍。（我是其中一个作者）

作者: XQGXXM521 时间: 2014-1-3 10:54

回复 Jonathan 的帖子7 ^8 w7 N2 e1 ~' k

你好，师兄，我买的是sigma 的L-抗坏血酸钠，货号 A4034, 终浓度为50μg/mL，配制后-20度保存，刚开始用效果挺好，一个月后再次从-20度拿出用后，加入细胞培养基后，细胞死亡很多，培养皿底有晶状物，不知什么原因，请赐教，谢谢！

作者: 细胞海洋 时间: 2014-1-3 11:45

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