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标题: 请问进行神经分化时B27加多少合适？ [打印本页]

作者: arwen 时间: 2011-5-26 09:08 标题: 请问进行神经分化时B27加多少合适？

文献上有说1%的，也有说2%的。我用的是2%，但有部分细胞死亡。请问大家一般加多少？B27对细胞有没有毒性？

作者: aminhair 时间: 2011-5-26 09:24

死亡是正常的吧？我记得在其他干细胞培养时B27还具有促进增殖作用。

作者: dulaiyouyu 时间: 2011-5-26 12:09

B27是supplement 营养，不应该有毒性作用吧？要细胞增殖的时候，可以加到10%的，我觉得你可以比1%、2%加的多一些。

作者: lidaifu001 时间: 2011-5-26 14:38

我们一般B27是用2%的，没听说它对细胞有毒性，诱导分化的细胞本来就是随着长随着死的。

作者: nihaohao 时间: 2011-6-4 21:53

我们在培养神经干细胞增殖传代时一般B27是用2%的，诱导分化时我们就不加B27了
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B27好象对细胞没有毒性吧。这个问题好象以前曾发过帖子

作者: kao3yan 时间: 2011-6-6 13:15

建议去验一验内毒素吧，或者找一下厂家的质检报告，我用的B27是Invitrogen的（加2%）细胞状态不是很好，上清有死细胞，用鲎试剂检验内毒素阳性，厂家的质检报告上定量测定是3.18，不知是不是原因，N2才0.3，正考虑换厂家。
另外，版主能给我点积分吗？论坛上有很多资料我的权限不够，不能下载。

作者: rhmm 时间: 2011-6-18 21:53

跟培养原代用量是一样的吧，2%，

作者: 放假123 时间: 2011-6-29 19:40

能问一下分化的配方吗，加血清多少啊，那还需要加什么呢，详细些，谢谢大家了，

作者: superlamp 时间: 2011-7-6 16:31

分化时，MDEM/F12+1%N2+5%FBS即可。
FBS注意灭活！

作者: superlamp 时间: 2011-7-6 16:33

另外B27一般用2%的量就可以。可以加些肝素，有促进纤维生长的作用，也可以抵抗血管膜或者血块对NSCs培养的影响。

作者: OBGYNob 时间: 2011-7-14 15:18

学习了，今天正打算做神经干细胞原代培养，之前看文献写1%，原来大部分还是用2%啊...

作者: liuxiao2006 时间: 2011-7-24 21:10

我用的是Neurobasal培养基500ML+10ml的B27，效果挺好，没有见到明显的细胞死亡

作者: pauldong 时间: 2011-7-26 15:13

我们也是用的2%，但是培养过程中未发现细胞增殖啊，基本上还是死亡的较多

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