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标题: 原代MSC培养基用错了，能在下次换过来吗？ [打印本页]

作者: 573639471 时间: 2011-5-28 10:17 标题: 原代MSC培养基用错了，能在下次换过来吗？

这次取的小鼠骨髓做的MSC，计划用α-MEM加FBS，结果发现错用了DMEM，高糖的，一天后发现还是有贴壁的，想请教下能不能把培养基换回去，何时换合适？

作者: 茶水 时间: 2011-5-28 13:37

第一次换液的时候就可以了。先用PBS稍微洗下，然后换上就可以了

作者: 573639471 时间: 2011-5-30 09:03

本帖最后由 573639471 于 2011-5-30 09:13 编辑 4 m: B @6 m+ b3 B& a7 b2 i0 _
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换了，不过好像有一些细胞漂起来了

作者: Learner 时间: 2011-5-30 09:44

回复 573639471 的帖子2 J# n1 v0 |0 o! ?

我们实验室一直用高糖DMEM养原代MSC。我看你图上漂起来的细胞像是血细胞，不是MSC。

作者: zg_zj_hz_xyj@ya 时间: 2011-5-30 12:29

文献上用α-MEM或者低糖DMEM比较多

作者: yangpan521 时间: 2011-5-30 12:45

可以的，调换培养基之前用无血清培养基或DPBS清洗几次，后期影响不大

作者: 573639471 时间: 2011-5-30 13:04

回复 Learner 的帖子( y+ |! g3 j/ D, m6 n4 G( ~0 T" m( P

血细胞啊，多谢多谢，呵呵，高糖也行啊早知道不换了

作者: jj2570782 时间: 2011-5-30 13:05

可以换的，两种培养基我都用过，你最好用PBS洗两遍后消化离心后再换，这样子基本上不会有影响了。3 @, C) X0 \+ ^% j" A6 E

作者: jj2570782 时间: 2011-5-30 13:05

可以换的，两种培养基我都用过，你最好用PBS洗两遍后消化离心后再换，这样子基本上不会有影响了。' W3 A: H. S- s+ e5 _7 y
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作者: snany 时间: 2011-5-30 17:02

不是这么换培养基的吧，更换另一种培养基应该是采用逐步递减法。比如从A换到B，一般先加70%的A和30%，下一次各50%，再下一次30%A和70%B，然后再全用B。如果一般更换为B，细胞可能会适应不了先的培养基的。

作者: 573639471 时间: 2011-5-30 17:07

回复 snany 的帖子6 ]- Z$ V2 H# I9 X% M$ V- x
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有道理

作者: deron 时间: 2011-5-30 19:44

我觉得影响不大，几克葡萄糖。

作者: biovictor 时间: 2011-5-30 21:13

好像杂细胞蛮多的，可以差速分离一下。

作者: 573639471 时间: 2011-5-30 22:12

回复 biovictor 的帖子3 a& u- m# {; H1 K4 Z

何谓差速分离？
用过吗？

作者: 雾里看花250 时间: 2011-5-31 15:23

千万别换换了容易出事细胞会死掉

作者: lidaifu001 时间: 2011-6-1 09:11

该换液的时候，可以先半量半量的换，直至最终完全换成你想用的，否则直接换的话，细胞就会漂。

作者: gact 时间: 2011-6-2 10:58

培养液的成分都差不多的吧，只是量不同而已。5 t8 o& E# I" b: c- ^( ~3 l
个人认为，不用那么麻烦。 X( i5 |. q; @/ W8 s

作者: 大少爷 时间: 2011-6-2 12:29

楼上正解！！更换另一种培养基应该是采用逐步递减法。比如从A换到B，一般先加70%的A和30%，下一次各50%，再下一次30%A和70%B，然后再全用B。如果一般更换为B，细胞可能会适应不了先的培养基的。

作者: biovictor 时间: 2011-6-3 00:56

回复 573639471 的帖子

差速分离就是，利用细胞贴壁能力不同而分离细胞的原理，有些细胞，如MEF很容易贴壁的，而不贴壁的细胞经换液处理后便可分离。

作者: sun_daping 时间: 2012-1-31 09:07

高糖的DMEM细胞容易分化，用低糖的较多吧

作者: xbqian 时间: 2012-1-31 09:24

其实MSC挺皮实的，所以应该问题不大，以后如果碰到金贵点的细胞还是小心为妙。

作者: pipi168 时间: 2012-1-31 10:06

好像贴壁的是血细胞

作者: signext 时间: 2012-1-31 14:34

换吧没问题的

可是看你的细胞数量不多啊 # S3 q Q+ J1 X: K5 P
你养的是小鼠估计这个密度生长不会很好

建议还是重新养吧

作者: pipi168 时间: 2012-2-3 16:55

血细胞可以用离心机分掉

作者: 星空雾雨 时间: 2013-10-8 10:23

回复 yangpan521 的帖子( d! K- I3 E7 z+ V
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你好

作者: 星空雾雨 时间: 2013-10-8 10:23

回复 yangpan521 的帖子
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在吗

作者: 星空雾雨 时间: 2013-10-8 10:33

回复雾里看花250 的帖子8 z+ b! \- j# z, e" f: x% |( U0 `
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你好，请问你用的什么牌子培养基

作者: 流泪的鱼 时间: 2013-10-8 10:52

差异浓度换培养基。否则细胞死亡的更多。上面漂浮的是死细胞不是红细胞。

作者: wf78365421 时间: 2014-2-10 13:18

可以换回来的

作者: yanwu_1 时间: 2014-2-24 14:51

最好实在第一次传代的时候换液，对细胞的影响小一些。培养过程中的培养体系突然改变，对细胞的生长和老化存在一定影响。

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