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标题: 请大家帮忙分析一下大鼠的BMSCs [打印本页]

作者: sherolily    时间: 2011-6-7 20:48     标题: 请大家帮忙分析一下大鼠的BMSCs

刚刚培养的4周龄大鼠BMSCs,却出现下面的情况,以前没有遇到过,请大家帮忙分析一下吧!!中间圆形的好像也是细胞。。。 : ]1 C5 P4 d! j3 k; a5 R
这次的有图片,谢谢大家!!!
% R  n0 H9 k: C. H# b. @, [[attach]28233[/attach][attach]28232[/attach]6 W- ~9 n  P8 ]) g- Z* D

作者: savid888    时间: 2011-6-7 21:25

状态不错啊) [7 S2 X# |- J7 g# w9 G3 x3 w$ o
圆的?应该不是细胞吧
作者: 若兰汀    时间: 2011-6-7 21:28

我养过一段时间的大鼠间充质干细胞,我觉得你的细胞梭形像是间充质,但状态不好了。我个人养一段时间细胞觉得,你中间的圆形物不像细胞形态。间充质细胞接种密度要控制好,不然要很长一段时间才长出来或是老化,培养基的组分和酸碱度很重要。当时你筛选这种细胞用的是什么培养基就最好用这种培养基培养,你考虑一下这次细胞培养和以往有什么不同,比如培养基的品牌等,不同公司的培养基对细胞由影响的,即使同一公司不同批号也会有影响。
作者: 飞翔的十字架    时间: 2011-6-7 21:56

不知道你的照片是P0几天的,很可能就是失败了
" u: W6 s$ X- g5 m. C圆的肯定不是MSC 梭形的也不太好 完全没有集落状8 e2 ?+ k8 `2 o
用PBS冲洗下再接着养试试吧
作者: 飞翔的十字架    时间: 2011-6-7 21:57

为什么这个是发在ips专区的?
作者: cheese    时间: 2011-6-7 22:16

感觉细胞状态不太好,还是重新分离吧
作者: 骨道边    时间: 2011-6-7 22:52

圆的像是贴在上层壁的水珠吧,不是细胞。你的细胞也和我的一样没有连成片,我也正在养的过程中。学习
作者: gact    时间: 2011-6-7 23:12

这个是刚分离的?第几天的?
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作者: 大少爷    时间: 2011-6-8 08:34

细胞状态不行,大的圆形的像气泡,小的圆形的像细胞,其他的梭形的是BMSCs,密度不是很大。建议纯化后再培养。
作者: minoni    时间: 2011-6-8 08:56

不知道这细胞是不是P0的,状态是不太好,不过像它这样的换几次液(2或3天换次液)也能长起来,等传代后状态会好起来的^
$ E) @+ D, m8 h' @说起来这图里的小圆点排列还挺整齐的,我刚开始还以为是图的背景呢,PS:部分圆点应该是死了的细胞.
作者: ytumuyangren    时间: 2011-6-8 09:10

我也在养BMSC,我的培养瓶也能看到这样的情况,我确认了一下,那肯定不是细胞,而且你的细胞接种量很少,建议重新分离纯化一下,第二张图的细胞状态看着很不好,建议扔掉吧,不然就在浪费时间了。呵呵
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:00

回复 若兰汀 的帖子
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培养基和血清都没有变呢,就是谷氨酰胺是重新配的,可是加的量是一样的啊,不知道这是不是原因啊。。。
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:03

回复 飞翔的十字架 的帖子1 q# J7 y" R. D9 d- R! l$ I

6 B% E. d1 W" I8 r1 N2 l这是P0第4天,开始培养就会出现集落吗?
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:05

回复 gact 的帖子
" i2 H+ e& Q0 A9 d0 K: ^
2 J5 c6 d6 x& \' f: e1 W恩,这个是刚分离第4天的。。
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:06

回复 大少爷 的帖子
, i' ?8 g: V. G
: h9 Y5 L* `+ F  A! Z/ ~这个是一条腿骨的细胞,是少了点。你说的纯化后再培养是指什么意思啊?
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:08

回复 minoni 的帖子
% ~8 b% C! d, N& Y: ~/ Y0 e0 j
7 F: |9 n$ R0 e9 l0 Z# s恩,这个是P0的细胞。就是小圆排列的太整齐,所以很奇怪。。
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:09

回复 cheese 的帖子" l* ^. J! R. J, |" }+ H
; J2 D( x1 Z8 E) j# ]+ h* ^% v7 _
我养的这几次,差不多都是这样,只不过,这次有整齐的圆的,我还没找到原因呢。。。
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 15:11

回复 骨道边 的帖子
" P+ y# q# O6 V" _$ H' W
0 f6 z, x& j) |5 n0 Y2 e: }# X* o好像不是水珠,太有规律了,所以很奇怪,共同学习吧~~
作者: sherolily    时间: 2011-6-8 16:04

回复 ytumuyangren 的帖子& e0 f4 ^3 U  V4 T/ p& \5 w+ P% v

, q& s6 T) w  _- ?1 E# e这个是同一个细胞,不同倍镜下观察的。。。
作者: 飞翔的十字架    时间: 2011-6-8 16:42

本帖最后由 飞翔的十字架 于 2011-6-8 16:49 编辑 / S! Z0 _. F8 d6 `$ K) N  r1 m
" v, u5 D+ t; S
回复 sherolily 的帖子
4 B! {2 z: u. U0 n- E5 M
  ~! f# S! E0 Y. V7 L8 v, i; \* K那些圆的你就别管了 直接拿PBS冲洗: h7 f* q* i$ \
你可以再养养 看看情况/ x' H, l5 O: B& M- {
一般我的细胞P04天 不会是这样的均匀分布/ T) u# Z0 {7 f6 B- Z, B' \7 B
肯定会出现集落,大小多少不同也已 / t9 u. F& |# b
我一般一只老鼠做2-3瓶  7天传代
作者: 若兰汀    时间: 2011-6-9 10:03

回复 sherolily 的帖子
' T/ d: f2 a' g( X; |; P/ q& [8 W+ r# m2 G6 ]: |0 W
有可能的,因为我们课题组有人买细胞因子养细胞时,不同批次的细胞因子做的结果会不同
作者: youngsem    时间: 2011-6-9 11:00

圆的不像细胞,你看看擦一下外面瓶底的部分能不能擦点,是不是瓶底沾的水珠。细胞状态好像是不太好,细胞里面好像有好多颗粒状的东西,密度也比较稀,建议你用好点的显微镜看看。
作者: nihaohao    时间: 2011-6-9 11:57

我也觉得圆形的不是细胞,
3 n. c# R8 @9 K9 J& B5 h% }; C看第一张图,整个细胞接种密度较小,我以前一般接种密度在10的7次方(含血细胞),若细胞接种密度较小(10的7次方),则细胞长得非常慢,但可以长起来。 建议继续养几天  ?8 \( \# V, ^+ K: U" k, r

作者: jss667795    时间: 2011-6-10 13:46

回复 若兰汀 的帖子  A* {2 n7 k5 l& u/ w# w

: n; _4 }, ^; {麻烦请问一下。养大鼠骨髓间充质干细胞时都需要注意些什么呢?我养的细胞状态和楼主的差不多,但是每次养到7,8天的时候就出现很多分叉和分支。然后细胞见不到明显的增多,或者越来越少。我很疑惑,我想咨询下,培养基的酸碱度多少适合?接种的密度怎样控制呢?谢谢哦~!
作者: sherolily    时间: 2011-6-10 18:58

回复 飞翔的十字架 的帖子3 a( V  k3 u% q+ _2 s6 V

0 `  X+ p" J% ^  O恩,好的,谢谢~~
作者: sherolily    时间: 2011-6-10 18:58

回复 若兰汀 的帖子8 X& ?. M# N/ Y8 @7 k! P

0 f: `3 l5 k, ^恩,好的,我再查找一下原因,谢谢~~
作者: sherolily    时间: 2011-6-10 18:59

回复 youngsem 的帖子
# @+ z( b- v8 P! @
" O" l. R0 C2 {  a; s恩,我再看看吧,谢谢~~
# O5 M, A  G7 M9 E+ q" L0 ~
作者: sherolily    时间: 2011-6-10 19:01

回复 nihaohao 的帖子
( X9 q1 ]" ~, l& d0 G" r- ^2 v
$ _) `% }5 q. v2 H恩,好的,谢谢~~




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