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标题: 请教在做克隆时需要去掉极体吗？ [打印本页]

作者: xiangchou812 时间: 2011-6-9 15:44 标题: 请教在做克隆时需要去掉极体吗？

最近在一个帖子中（http://www.stemcell8.cn/thread-14198-1-1.html）看到，其在去核和注核的视频中，只去掉了卵母细胞中的核，但没去掉极体，请问在做核移植时第一极体需要去掉吗？如果不去，在后面做融合时，极体会不会也与卵母细胞发生融合？另外，不知版主有没有听说过直接将第一极体作为供核细胞进行核移植的？有克隆后代出生吗？谢谢。
我记得之前讲解克隆是都说连通极体及其下的细胞质都要吸掉，跟这里好像矛盾啊。1 r# I% v& h7 r: y1 ~

作者: POPOLD 时间: 2011-6-9 22:24

极体发育到一定阶段会消碎，最好是去掉

作者: aulenuyah 时间: 2011-6-9 23:32

做核移植的时候一般情况下是要去除极体的，不然核内物质有可能除不掉。如果不去掉的话，后面融合的时候极体是有可能发生融合的。第一极体是单倍体，核移植后如果发育也等于孤雌生殖，估计很难发育，至于生出动物就更难，个人觉得可能性很小。做核移植的时候，每个人的手法都不一样，所以具体的还要因人而异

作者: 肉肉 时间: 2011-6-10 09:35

我们都去极体的，首先极体刚排出或不久的时候，它与细胞核在同一处，就是能很好的指引我们去核；如果不去极体会影响后面注供体细胞和融合，有可能分不清供体细胞和极体

作者: songzxj 时间: 2011-6-10 14:27

不同物种是不一样的，小鼠核移植可以胞质内注核，没有融合的过程也就不需要去极体，其他动物大都需要用融合的方法，就需要去除极体以免影响融合。所以你要分清楚你看的是什么物种克隆视频，完不完整偶可能影响你的判断。

作者: BenHantun 时间: 2011-6-10 16:49

做克隆其实是不需要去极体的，在做大动物克隆时，因为核不好找，需要用极体来定位核的位置的，是盲吸去核法，所以去极体连同下面的一些胞质去除，主要是去核的，而做小鼠克隆，在显微镜下是可以看到纺锤体的，因此不需要去极体，就可以直接去核，所以不用去极体。我是这样认为的，不知对不对，还望高手指点。

作者: chiangmax 时间: 2011-6-21 13:02

aulenuyah 发表于 2011-6-9 23:32 % t% s+ n9 i% b" x6 \9 D
做核移植的时候一般情况下是要去除极体的，不然核内物质有可能除不掉。如果不去掉的话，后面融合的时候极体 ...

第一极体是单倍体？你老师这样教你的？

作者: chiangmax 时间: 2011-6-21 13:04

xiangchou812 发表于 2011-6-9 15:44 + `7 ] h0 B; s( C+ E
最近在一个帖子中（http://www.stemcell8.cn/thread-14198-1-1.html）看到，其在去核和注核的视频中，只去掉 ...

WAKAYAMA曾经用第一极体核移植然后用精子受精得到过后代，其实类似于正常受精，与真正意义上的核移植不一样。

作者: aulenuyah 时间: 2011-6-21 20:26

本帖最后由 aulenuyah 于 2011-6-21 20:34 编辑 5 q( K$ W& s# C' S2 y

回复 chiangmax 的帖子

谢谢你的提醒，这个问题我是最近几天才意识到的，以前一直这样认为的，刚刚知道是错的，谢谢你

作者: xiaomingxu 时间: 2011-6-28 11:58

体细胞核移植去核操作去不去除第一极体，可根据个人的习惯及具体实验要求，不是一定要去除的。! ] J# B1 W% f/ u6 A
如果使用胞质内细胞注射法，就无需去除第一极体；如果使用电融合法，最好是去除第一极体，但也不是一定要去除的。你可以将供核细胞置于第一极体对面的位置，电融合时第一极体很难被融合（个人经验）。
还有与你去核的方法有关：如果你是使用盲吸法，那肯定要去除第一极体，因为盲吸法就是以第一极体为去核指示标准；如果你使用偏振光系统去核，你可以很准确、方便的去除纺锤体，但不那么方便去除第一极体（第一极体与纺锤体经常会出现一定的角度的偏差）。

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