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标题: 大家都来说说，实验室环境温度对细胞培养的影响 [打印本页]
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 11:46     标题: 大家都来说说，实验室环境温度对细胞培养的影响

我们实验室的空调总是坏，就我这几次养人脂肪来源的MSC的经验来看，实验室30度以上的时候，细胞就会出现很多空泡，大部分人认为空泡是因为支原体污染。
, o& @2 p$ |. |! E$ z7 g) o0 n中间空调修好了，实验室温度可以降到很低，我们一般开22度，细胞状态就比较好，空泡基本上也就没有了。3 \, x8 R8 i: L, Y
现在空调又坏了，泡泡们又呼哧呼哧的出来了，伤心啊，我穿了那么多细胞准备做转染，全浪费了！！！
) O5 p# H, A; I大家认为实验室环境温度对细胞培养有影响么？7 F3 M* h9 s5 a/ G* Q8 G4 A
作者: deron    时间: 2011-6-15 11:53

我觉得是有影响的。6 M& _4 g. @: n7 F+ p: A
温度高的时候，比如夏天，有利于环境中各种微生物的滋生和繁衍，相信人的体表在冬天和夏天细菌的数量也是有差别的。由此给无菌室带来的影响也是不同的
作者: dulaiyouyu    时间: 2011-6-15 13:16

我觉得主要污染源还是人啦。气温太高，人容易出汗什么的，单纯对细胞而言的话，无菌室温度高点，对它们应该反而是有好处的吧？毕竟37度才是合适的温度啊。。。
作者: snickle    时间: 2011-6-15 16:28

本人觉得温度应该是有一定影响的，相比之下，环境条件对细胞的影响应该比较大，特别是无菌环境要保证，建议在实验操作时要确保无菌操作，另外实验操作时尽量减少细胞与外界接触时间比较好。
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:52

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5 q: n7 ?. l4 ]' j& y
, o8 w6 f' _) k我们养细胞的地方都不是无菌室。我也超级认同，只要温度一高，就特别利于各种细菌滋生。
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:53

回复 snickle 的帖子4 J* k3 G; W7 e7 H
" }* ]2 q& q  F* G
我曾经试过，温度低的时候，细胞再超净台里面时间再长都不会有空泡（因为铺板的时候要计数，要计算，要一个一个铺，挺费时间），温度一高就不行。
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:55

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( C, ~+ `. X) ?1 T  x污染源是人，是人把细菌带进去的，但是促进细菌繁殖的是实验室的温度，低温的时候细菌也懒得长，个人认为。
作者: jiojoo    时间: 2011-6-16 16:16

本帖最后由 jiojoo 于 2011-6-16 16:17 编辑 ' I# B3 }% |  v% m4 b

; ~  H. D4 L+ |3 y我觉得，污染不太可能，最有可能的低温有助于在你操作期间保持较低的细胞活力
- U4 X9 Q* g# A1 ~9 d1 n那个影响的原因会不会是细胞在不适宜的环境中生长活力过高？
作者: songzxj    时间: 2011-6-16 20:13

如果你培养在培养箱里，操作是在安全柜或者无菌操作台，那么污染应该就是你操作的问题。虽然低温有抑制细菌生长的作用，但是并不能让它死亡，所以如果高温时可以污染，低温时也一样可以，原因在于你的操作不是规范的无菌的，个人意见仅供参考。
5 W# u$ }1 {/ j5 ]4 ^1 B另外，如果你的细胞培养箱没有问题的话，我觉得室温变化应该不会改变培养箱内部的温湿度和气体组成，也就是箱内的环境应该是不变的。: U$ b  F2 n5 \- \: D$ O
还有就是细胞只是出现空泡的话，那么我觉得那应该不是污染，而可能是细胞凋亡。
作者: jiojoo    时间: 2011-6-16 21:55

我突然想起来以前我同学在种孔板换液时遇到的问题了% L# k( J3 ~8 N/ @# u) Z$ `
当时天气非常干燥，他操作的是12孔板，换液时他是把12个孔全部吸完了之后再加新的培养液
8 e2 s5 k* b4 ~  r9 ^* \结果换完液放置半天后他去看，发现细胞基本都死了，有部分孔的细胞一部分死，一部分活着，界线还比较明显
8 ~/ O9 k8 o  {& Z7 W分析后得到的结论是他换液的时间太久，细胞都吹干了，失水而死；他改变换液方式后就没再出现相同的问题8 R; X. Z+ H; L; o
我觉得你这个问题会不会也和空气湿度有关
. s! [- ^' x8 f# P. v4 K( n% q/ o开了空调与否，对空气的湿度也会有影响的
作者: 宗介    时间: 2011-6-16 22:50

个人认为实验室的温度太高的话对人的影响最大 温度低的话对细胞的影响较大
作者: lele    时间: 2011-6-17 09:34

细胞空泡化是细胞凋亡的表现，不是污染的表征。个人觉得还是操作手法的问题。
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 11:03

回复 jiojoo 的帖子
, \# T$ F+ G6 M1 k4 n
7 U* o' {! h# X! y! i6 O我也遇到过换液让细胞死亡的情况，我让师妹帮我换液，她也是把好几个孔板都吸完再加新液，结果细胞干死了，但是这跟我说的细胞长空泡的情况不一样。2 K. Y" h* w7 Q
我们一个资深的老教授说空泡多半是支原体感染，而且我在试验的过程中发现，实验室温度越高，空泡越多，其他条件都差不多一样。5 v: I! A+ r  G4 j
我不知道可不可以这么说，燥热的温度比较利于支原体在空气中繁殖？？！！然后导致细胞污染，出现空泡？
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 11:07

回复 songzxj 的帖子* \, h! c) r: g* t' m' J
& \: L  z6 m8 @
如果细胞出现了凋亡，镜下就应该看见很多漂浮死亡的细胞尸体，但是出现空泡之后并未看见死亡细胞。: R( g9 L: ~7 t9 i3 |2 H
而且即便是细胞出现空泡，细胞仍然可以传代，甚至可以进行诱导。
. i; ?: D6 V* `4 h4 k0 e0 F  [只不过我不知道空泡会不会对后续实验造成影响。
作者: polaris82    时间: 2011-6-17 11:42

我觉得还是温度决定的。因为温度太高有利于细菌滋生。7 U0 N& d4 O+ {3 O. O6 ?
前面说的空气湿度个人觉得影响不大，因为我在兰州做过实验，空气湿度很低很低；同样在青岛待过，空气湿度较高，倒是觉得没有太大影响，同样的空调相同的温度。
作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 17:49

发现一个奇怪的现象：9 G2 ~+ \) [( z  }8 C- K
长了空泡的细胞在我转染了小RNA之后，再诱导时空泡变少了；  Z" ^* P' h. w! G9 l8 N# [
直接诱导的细胞，空泡越来越多；( X7 \7 E5 k- R$ O0 x# ]6 d: J$ y
都是向同一个方向诱导。
8 D7 Q" f1 \( ~! ^6 H5 W9 ?8 _1 R转染我用的是LIPO2000，难道是脂质体的毒性作用做了一回好事？？？
作者: bllx58    时间: 2011-6-17 18:26

肯定是有影响的，开了空调，会影响细胞间的温度和湿度+ T- j3 X! X! n" J& W8 f: P. J6 f% p
7 ~1 A. u5 t8 p  v7 X; j+ ~
以前也听说过一家日本实验室，为了保证细胞的状态，不至于在拿出操作或者观察的时候受影响，把整个细胞间的改造成了37度~~~
作者: huangcong1988    时间: 2011-6-17 19:36

回复 polaris82 的帖子
9 m' R8 l+ O! s* D8 }' Z
; H$ k+ |  O8 M4 l, f空调会影响细胞室的温度，同样会影响其湿度，所以不管你是在兰州还是在青岛，只要开了空调，室内温度跟湿度应该都差不多。温度和湿度都会影响细胞生长的，当然，你说的（在一定温度范围内）温度会促进细菌或者说杂菌滋生也是对的
作者: jiojoo    时间: 2011-6-17 20:36

bllx58 发表于 2011-6-17 18:26 & h( `+ u/ k/ E
肯定是有影响的，开了空调，会影响细胞间的温度和湿度
1 s2 x2 [$ \, \: H% l7 J: H
# f! a: J# K+ ?: C以前也听说过一家日本实验室，为了保证细胞的状态 ...

$ Z# {' D% v2 P" e6 O2 d; o这家实验室真猛，不过人怎么在里面操作呢？全都汗流浃背了



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