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标题: 大家都来说说，实验室环境温度对细胞培养的影响 [打印本页]

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 11:46     标题: 大家都来说说，实验室环境温度对细胞培养的影响

我们实验室的空调总是坏，就我这几次养人脂肪来源的MSC的经验来看，实验室30度以上的时候，细胞就会出现很多空泡，大部分人认为空泡是因为支原体污染。8 j* X6 L3 p+ {% u+ N. I4 {5 S7 C' }" s
中间空调修好了，实验室温度可以降到很低，我们一般开22度，细胞状态就比较好，空泡基本上也就没有了。
$ i+ Y3 }5 p9 K  X: S! ~) L现在空调又坏了，泡泡们又呼哧呼哧的出来了，伤心啊，我穿了那么多细胞准备做转染，全浪费了！！！
8 N7 c- Y& _* B/ }& [; B大家认为实验室环境温度对细胞培养有影响么？
6 Z7 {0 w" S* {, X7 \

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作者: deron    时间: 2011-6-15 11:53

我觉得是有影响的。; B8 H% b7 W9 E+ ^  ]- e/ Q
温度高的时候，比如夏天，有利于环境中各种微生物的滋生和繁衍，相信人的体表在冬天和夏天细菌的数量也是有差别的。由此给无菌室带来的影响也是不同的

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作者: dulaiyouyu    时间: 2011-6-15 13:16

我觉得主要污染源还是人啦。气温太高，人容易出汗什么的，单纯对细胞而言的话，无菌室温度高点，对它们应该反而是有好处的吧？毕竟37度才是合适的温度啊。。。

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作者: snickle    时间: 2011-6-15 16:28

本人觉得温度应该是有一定影响的，相比之下，环境条件对细胞的影响应该比较大，特别是无菌环境要保证，建议在实验操作时要确保无菌操作，另外实验操作时尽量减少细胞与外界接触时间比较好。

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:52

回复 deron 的帖子
. s4 y, z1 a/ [, z1 p" k& {0 y1 N! u! |* K' A1 c* V
我们养细胞的地方都不是无菌室。我也超级认同，只要温度一高，就特别利于各种细菌滋生。

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:53

回复 snickle 的帖子. Q5 W& f! ~/ G: W/ {
/ {& k5 _$ _" {+ J* H- x, c! ^
我曾经试过，温度低的时候，细胞再超净台里面时间再长都不会有空泡（因为铺板的时候要计数，要计算，要一个一个铺，挺费时间），温度一高就不行。

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-15 16:55

回复 dulaiyouyu 的帖子
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( |( G! p# E' U5 \) c- {2 B0 D污染源是人，是人把细菌带进去的，但是促进细菌繁殖的是实验室的温度，低温的时候细菌也懒得长，个人认为。

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作者: jiojoo    时间: 2011-6-16 16:16


1 Q) L1 p* Z. n" j5 E: Z& ^! r0 r6 X( Z/ N7 x+ r  p3 O# g! m
我觉得，污染不太可能，最有可能的低温有助于在你操作期间保持较低的细胞活力
6 E- Z% b5 G* ?2 A$ D' j( p! n那个影响的原因会不会是细胞在不适宜的环境中生长活力过高？

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作者: songzxj    时间: 2011-6-16 20:13

如果你培养在培养箱里，操作是在安全柜或者无菌操作台，那么污染应该就是你操作的问题。虽然低温有抑制细菌生长的作用，但是并不能让它死亡，所以如果高温时可以污染，低温时也一样可以，原因在于你的操作不是规范的无菌的，个人意见仅供参考。9 ?& y2 {6 I8 x) o7 G
另外，如果你的细胞培养箱没有问题的话，我觉得室温变化应该不会改变培养箱内部的温湿度和气体组成，也就是箱内的环境应该是不变的。
: Q+ C/ g% l! _6 {8 X还有就是细胞只是出现空泡的话，那么我觉得那应该不是污染，而可能是细胞凋亡。

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作者: jiojoo    时间: 2011-6-16 21:55

我突然想起来以前我同学在种孔板换液时遇到的问题了. Q& q: N& T; I7 o
当时天气非常干燥，他操作的是12孔板，换液时他是把12个孔全部吸完了之后再加新的培养液; F0 I9 y7 ]1 Q0 P  M; p$ O
结果换完液放置半天后他去看，发现细胞基本都死了，有部分孔的细胞一部分死，一部分活着，界线还比较明显
% k& \) [. K: y4 V; f! H分析后得到的结论是他换液的时间太久，细胞都吹干了，失水而死；他改变换液方式后就没再出现相同的问题0 ]7 ?: g3 v1 ?: ~
我觉得你这个问题会不会也和空气湿度有关$ x: {5 H# d$ \9 W  ~
开了空调与否，对空气的湿度也会有影响的

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作者: 宗介    时间: 2011-6-16 22:50

个人认为实验室的温度太高的话对人的影响最大 温度低的话对细胞的影响较大

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作者: lele    时间: 2011-6-17 09:34

细胞空泡化是细胞凋亡的表现，不是污染的表征。个人觉得还是操作手法的问题。

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 11:03

回复 jiojoo 的帖子, s. s5 ]3 ?+ j0 p) t, X- J* g; x9 d
: ^- @9 u. }& D* w* B7 v
我也遇到过换液让细胞死亡的情况，我让师妹帮我换液，她也是把好几个孔板都吸完再加新液，结果细胞干死了，但是这跟我说的细胞长空泡的情况不一样。3 i+ m# q% I( R5 n9 k$ G
我们一个资深的老教授说空泡多半是支原体感染，而且我在试验的过程中发现，实验室温度越高，空泡越多，其他条件都差不多一样。
2 }. t: [" ^! V我不知道可不可以这么说，燥热的温度比较利于支原体在空气中繁殖？？！！然后导致细胞污染，出现空泡？

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 11:07

回复 songzxj 的帖子' E5 U5 a5 L, |" o
2 a+ n' o/ n0 N/ J
如果细胞出现了凋亡，镜下就应该看见很多漂浮死亡的细胞尸体，但是出现空泡之后并未看见死亡细胞。1 l. m% C+ {3 W/ a" I9 w- A
而且即便是细胞出现空泡，细胞仍然可以传代，甚至可以进行诱导。
7 e0 i1 n3 @% c2 U只不过我不知道空泡会不会对后续实验造成影响。

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作者: polaris82    时间: 2011-6-17 11:42

我觉得还是温度决定的。因为温度太高有利于细菌滋生。
3 X" e1 e. \6 U. V, z% W8 g前面说的空气湿度个人觉得影响不大，因为我在兰州做过实验，空气湿度很低很低；同样在青岛待过，空气湿度较高，倒是觉得没有太大影响，同样的空调相同的温度。

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作者: clairezy1983    时间: 2011-6-17 17:49

发现一个奇怪的现象：# T& C8 l$ }& F; b8 J9 {. `
长了空泡的细胞在我转染了小RNA之后，再诱导时空泡变少了；9 }/ r7 G& I' Y; s% D
直接诱导的细胞，空泡越来越多；; E! k' \7 l" S
都是向同一个方向诱导。
* c  b. N( Y8 ~( c. d" k转染我用的是LIPO2000，难道是脂质体的毒性作用做了一回好事？？？

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作者: bllx58    时间: 2011-6-17 18:26

肯定是有影响的，开了空调，会影响细胞间的温度和湿度/ J$ e: B, W$ p! `6 l4 q, k0 n* g
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以前也听说过一家日本实验室，为了保证细胞的状态，不至于在拿出操作或者观察的时候受影响，把整个细胞间的改造成了37度~~~

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作者: huangcong1988    时间: 2011-6-17 19:36

回复 polaris82 的帖子
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空调会影响细胞室的温度，同样会影响其湿度，所以不管你是在兰州还是在青岛，只要开了空调，室内温度跟湿度应该都差不多。温度和湿度都会影响细胞生长的，当然，你说的（在一定温度范围内）温度会促进细菌或者说杂菌滋生也是对的

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作者: jiojoo    时间: 2011-6-17 20:36

bllx58 发表于 2011-6-17 18:26
4 I: [& @0 A5 |肯定是有影响的，开了空调，会影响细胞间的温度和湿度
7 J) P, p" \9 q1 t2 Z
( D1 x' `! @6 ?& S# E* s* \; @以前也听说过一家日本实验室，为了保证细胞的状态 ...

6 I5 T1 H7 v* o" c/ n3 L: S6 a& E4 @
这家实验室真猛，不过人怎么在里面操作呢？全都汗流浃背了

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