干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 大家看看我做的间充质细胞诱导神经的照片 [打印本页]

---

作者: stemcell8    时间: 2011-6-19 11:09     标题: 大家看看我做的间充质细胞诱导神经的照片


; n( {9 ~. _, I5 H3 T' f- z; U" w2 m
我诱导间充质细胞分化为神经细胞，但是没有很明显的神经元结果，下一步怎么做呢？聚集成团的是什么呢？是神经组织么？

---

作者: stemcell8    时间: 2011-6-19 11:10

大家给点建议！！！！

---

作者: esc123esc    时间: 2011-6-19 11:26

请问你做神经诱导的方式是怎样的呢，用什么因子诱导的呢

---

作者: esc123esc    时间: 2011-6-19 11:29

间充质诱导的时候是会出现一些成球的状态，而且会表达nestin阳性，具体要看你的诱导方式了

---

作者: 临床干细胞    时间: 2011-6-19 12:07

; f3 ~% E& r# I! z9 X

9 a5 n* a7 Y7 M9 a( ~2 G真菌污染，没有看到神经元出现，肯定是诱导剂不对，建议修改一下

---

作者: stemcell8    时间: 2011-6-19 12:31

回复 临床干细胞 的帖子
6 r9 g. {# k3 \& H2 t( _
* N$ u8 K3 d/ A; }  h怎么看出是真菌污染的啊

---

作者: 临床干细胞    时间: 2011-6-19 12:42

stemcell8 发表于 2011-6-19 12:31
: y% z8 L  e6 ^& N/ L6 q1 M回复 临床干细胞 的帖子
3 X3 A6 ^% e2 `
8 E- Z+ A* P& R怎么看出是真菌污染的啊

7 ?. k; X- d& ]2 ?; _6 `就是那张成团的照片

---

作者: zerollx    时间: 2011-6-19 16:27

这方面资料我曾经看过，向神经细胞诱导时有一个阶段会出现神经球，其它的我就不太清楚了，你可以具体查询一下这方面的知识！！！

---

作者: bllx58    时间: 2011-6-19 17:59

正在做NSC向神经的分化，形态学很难判断，比如你这个情况，不觉得还有些像普通的Fibroblast吗，其实形态学判断很不靠谱，建议你进行鉴定
6 z/ r5 ^1 o. L3 m1 l7 C3 z* [& v! U" c, P8 }2 D" A7 S
鉴定的方法，比如：2 D! i/ a  V0 D# \+ T4 M6 }
免疫组化检测 -
& _/ C" o& L! N6 i' o( x- G不成熟神经元 MAP2 （可以买Santa的抗体，便宜，好使）7 T4 t& p2 f6 T2 N: D
成熟神经元 Tuj1 （推荐Promega的）

---

作者: sdyinong    时间: 2011-6-19 20:53

成团的应该是没有吹散的细胞团，我们培养的时候也经常出现这种情况，诱导成功的细胞应该会伸出很多细长树突分支，在裴雪涛的干细胞培养指南上有图片和检测方法

---

作者: guosapphire    时间: 2011-6-19 21:17

请将你的诱导步骤写出来讨论，就目前看你的诱导效果并不好。; k% W6 l8 Y9 [4 w3 ^9 s- F1 L$ p
如果评价你的这个诱导体系的话可以做个RT-PCR看这个体系有没有向神经谱系发展的基因表达。

---

作者: geraldine    时间: 2011-6-26 00:57

你的诱导剂不大对吧。诱导完后细胞的形态没有明显的神经元形态。建议更换诱导剂。  o* _8 S+ e: f: A& H+ l
再者 用于诱导的细胞是培养多久的第几代细胞？
2 b) _6 t0 W( p7 L2 d: N6 c( {# m! U, t( z3 d  a5 D
我的MSC细胞培养三个月左右会出现与你相似的细胞团块。这些细胞团块可以继续传代培养。4 g7 h% t7 e# b( d
建议你对细胞进行瑞士吉姆萨混染，观察核质比，看看细胞是否有恶性转化的趋势

---

作者: stemcell8    时间: 2011-6-27 13:35

回复 geraldine 的帖子
) n' P5 L, l  i" v8 n4 e% i5 s2 B4 ]' ~
$ Q. {/ ~; f" ^, Y请问你用什么诱导体系啊 可以说说么

---

作者: geraldine    时间: 2011-7-7 13:21

回复 stemcell8 的帖子
0 w3 e/ L5 \+ \9 b/ j: {: o% Q' K- s) n; C
1mM的BME诱导三天。无血清诱导三天

---

作者: hawkyiger    时间: 2011-7-7 14:12

应该不是污染，平常养的未诱导的正常细胞也有这种情况，应该还是细胞生长状态造成的

---

欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)

Powered by Discuz! X1.5