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标题: 细胞分泌的细胞因子怎么检测？？ [打印本页]

作者: bin 时间: 2011-6-21 21:11 标题: 细胞分泌的细胞因子怎么检测？？

各位大侠晚上好，小弟的实验中为了得到更加确切的证据，需要做某细胞分泌的细胞因子研究，请教各位，由培养的细胞分泌到培养基中的细胞因子该怎么检测？我上网看了，好像常用Elisa来检测，可不可以用West blot来检测呢？或者用什么其他的方法。我们实验室好像没有Elisa专用的仪器。谢谢各位了。

作者: linchee 时间: 2011-6-21 21:42

知道要检测什么因子，做做elisa很简单啊，酶标仪就行了吧

作者: ljs 时间: 2011-6-22 08:47

Elisa.流式更好。回答完毕。

作者: lili_19840516 时间: 2011-6-22 09:15

要做ELISA吧，因为是分泌到培养基里的细胞因子，western blot不能直接检测上清的。有个酶标仪就可以测ELISA，挺简单的。

作者: dwl1209 时间: 2011-6-22 09:55

检测细胞因子的标本类型都有哪些呢？要检测一种细胞分泌的细胞因子，如果用培养液作为标本的话，培养液中的成分会不会造成干扰呢？如果用抽提的细胞蛋白做标本，那么蛋白在抽提前后的变化对细胞因子的检测有无影响呢？还有检测某个细胞分泌的细胞因子是否需要加刺激物呢？我说的研究对象是体外培养的细胞。刚接触这个有太多不懂，向各位讨教了……

作者: bllx58 时间: 2011-6-22 12:59

一般都不会造成影响的吧，取培养细胞上清，做Elisa实验即可，论坛里有实验技术protocol，可以看看

作者: kgx1986 时间: 2011-6-22 21:59

可以买相关的试剂盒做，都配有说明的

作者: lili_19840516 时间: 2011-6-23 17:00

主要决定于你检测哪种细胞因子，这种细胞因子是分泌到培养基还是细胞质，如果是分泌到培养基就要检测上清，如果是细胞质或者细胞核蛋白就可以裂解收集蛋白做western，而且这种细胞因子在你的细胞是组成型表达还是诱导型表达，如果是诱导型的当然要加诱导剂，如PGE2，就是要检测培养基，做ELISA吧

作者: bin 时间: 2011-6-25 15:42

谢谢各位了，我是做SCs细胞分泌的NGF和NT-3，看来只有做Elisa了。

作者: 宗介 时间: 2011-6-25 21:30

试剂盒应该可以按照说明操作就可以了

作者: conanthird 时间: 2011-6-28 11:22

用BD的CBA试剂盒，上流式也行。

作者: hy12 时间: 2017-1-10 13:42

楼主的细胞因子还做什么其他的检测吗？比如内毒素、支原体？

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