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标题: BM-MSC长出多核细胞 [打印本页]
作者: mason658616    时间: 2011-6-28 19:53     标题: BM-MSC长出多核细胞

P1代，未加任何生长因子，其中一瓶长出多个核的细胞，是分化了吗？成骨细胞？意味着细胞老化吗？才P1，是不是老化得太早了？有什么方法逆转吗？
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作者: 素年锦时    时间: 2011-6-29 01:18

我也出现这个问题了
作者: 素年锦时    时间: 2011-6-29 01:19

刚开始的时候都是好好地，结果过了几天就这样了，我分析原因可能是应该传代而没有及时传代，细胞分化了。我都是直接把细胞扔掉了，这样的形态已经不能做其他的研究了吧。
作者: henryjia    时间: 2011-6-29 06:52

没看介绍，似乎已经是P4以上的细胞了。不过楼主是不是介绍一下分离方法，p1一般不会如此不堪。是不是方法哪里有问题？
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  @( Z2 |. V9 I1 N3 z& f8 U- i从新再来吧！
作者: viv2005    时间: 2011-6-29 07:54

多核的应该是osteoclast吧，我是要用M-CSF和RANKL诱导才能出来啊。图上那个我感觉是细胞克隆呢
作者: 1301918986    时间: 2011-6-29 08:38

我们的BMSC培养4代的时候会出现多核细胞，而且还观察到了应力纤维，一般3代之前不会出现，我觉得可能是传代晚了，或者是接种密度低了。
作者: 352167963    时间: 2011-6-29 09:09

没碰到过这种情况，但是细胞的状态这么差哈市P1代，是不是哪里出问题了啊 。没有及时传代细胞老化，或者培养基出现问题？
作者: sunjianhua2000    时间: 2011-6-29 10:57

细胞老化了 ，而不是分化。是不是你原代传代的时候没有控制好时间，传代较晚，或者是你的培养液酸碱度不合适。
作者: luozhen1018    时间: 2011-6-29 11:19

所谓的多核细胞是不是脂肪细胞？
$ i! D5 l" r" ~! M4 _多核能在光镜下看见？
) V5 i9 I( v6 O5 d& t) J) {: [那东西可能是脂肪颗粒
作者: regene    时间: 2011-6-30 00:17

这个不是多核吧
作者: mason658616    时间: 2011-7-1 14:56

回复 regene 的帖子: L+ z6 L$ R5 w6 B

; `5 d- F( s9 `0 L您的意思是？不是核是什么呢？我没见过，也不知道怎么描述
作者: mason658616    时间: 2011-7-1 15:00

回复 henryjia 的帖子
# }4 ~2 `) I1 @( d$ R9 t: i1 Z$ ~+ }$ V" R- g
髂骨骨髓，Ficoll提取，10^5~10^6种在瓶里，3天换一次液。但总出现瓶底部分长得密，靠瓶口的部分长得稀，为了等着瓶口的，有时候瓶底就有点过密了，这些异常的细胞确实是出现在靠瓶底的部分
作者: mason658616    时间: 2011-7-1 15:02

回复 viv2005 的帖子
  f6 A& W1 r* p2 g7 l5 L' _7 r" A3 V6 L' k/ ^0 s, p5 H
是成骨吧？MSC怎么会自动分化为破骨呢？
作者: mason658616    时间: 2011-7-1 15:04

回复 1301918986 的帖子
9 Z- Y% z; K% K0 A* k4 n% }, N- y7 n$ \% }6 p: a
9楼10楼说我这个不像是多核。。。我也不清楚到底是不是核。您养的到P4就这样了，是不是也有点早啊？正常养个八九代都没问题的。你们分析是什么原因？改善之后有再出现过吗？
作者: mason658616    时间: 2011-7-2 16:00

回复 1301918986 的帖子% D8 v( H6 m6 J% t* k# x

4 c' e4 I) |9 I! d; p: u我把这瓶传代后观察，发现这些多个核的细胞没有继续增多，还是那么几个，是不是没有大问题？
作者: viv2005    时间: 2011-7-3 09:19

mason658616 发表于 2011-7-1 15:02
( y! @+ R! P" a- c4 g回复 viv2005 的帖子
) Z! u) @, c. ~
3 Z+ }6 L8 {- j9 F是成骨吧？MSC怎么会自动分化为破骨呢？

8 z$ a, y8 ?) E4 \8 t成骨也不会自己出来啊，也要诱导啊
作者: luoziwei    时间: 2011-7-3 10:59

是不是多核难说，但细胞明显老化，既然才P1，很大的可能性是培养基不好，或者传代不好
作者: regene    时间: 2011-7-3 17:23

回复 mason658616 的帖子1 C- N5 f4 P+ @8 S7 ~: a

$ D3 s. N: K  K& ?2 u我也不知道是什么，但应该不是核，要是有兴趣就用DAPI染一下看看。我养出过多核细胞，其形态与单核细胞没有明显差异。
作者: 1301918986    时间: 2011-7-6 11:50

回复 mason658616 的帖子3 H. D9 e- i- @& @/ O7 g
6 e1 I! t) S+ W* c. R
我的细胞可以清楚看见是多核的，我也觉得细胞老的太早了。可能是培养基的问题吧，还得优化。
作者: mason658616    时间: 2011-7-11 19:46

回复 1301918986 的帖子, R+ T8 o. }0 j& g, `2 {; ~
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我前几天又提了一个人的BM-MSC，又是养到P1出现了这种细胞，个别的几个，其他细胞状态还不错。我用的是15%H-DMEM，是不是不能用高糖的？我看有用a-MEM和DMEM/F12的，区别会这么大？其他没有这种多核细胞的，也传到P4就不行了。
作者: cavalior    时间: 2011-7-18 18:13

跟我的细胞看起来很像啊，昨天应该传代的，没有传。今天看着像是融合了一样，传完之后再看就不像是原来的梭形了，是分化了么……
作者: mason658616    时间: 2011-7-20 10:17

回复 cavalior 的帖子* e0 Z, C3 W! Z4 Z* x4 d

# ~3 o! l  C! @; D; @我感觉P0传到P1的时候一定要把握好时机，一旦传晚了，后面就难挽救了。。。宁可密度低点也不要等长得密不透风再传。不一定分化，至少是凋亡的细胞很多，活的细胞状态也不好了



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