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标题: 细胞长成这样为什么? [打印本页]

作者: cc1986 时间: 2011-6-30 15:29 标题: 细胞长成这样为什么?

想请教高手冻存一年半多的C3A细胞（肝母细胞瘤细胞株）复苏后，长成如图所示，出现很多大大小小透明小泡，是不是细胞老化了？第一次养，所以不知道本来正常应该是怎么样的。。不好意思，虽然跟干细胞无关，还是希望细胞培养的高手能指点迷津~谢谢

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作者: jhu132llh 时间: 2011-6-30 16:43

是挺像细胞老化了
可能和冻存有关
可以多饲养几代看看会不会有所恢复
也可能和饲养方法有关
是不是更改了饲养环境0 k% n9 m8 c* c( N ^2 N5 t' s8 N
也有可能就是细胞已经老化了

作者: yiyeqiu 时间: 2011-6-30 17:04

成团生长很严重啊，建议再次消化培养。

作者: yinjiqingqq 时间: 2011-6-30 19:37

建议做个菌检，排除污染问题

作者: zsc78 时间: 2011-6-30 19:49

C3A本身喜欢成团生长，但细胞确实老化了，传几代看能不能恢复。

作者: superlamp 时间: 2011-6-30 21:52

不是成团的问题，也不是细胞密度的问题，看来应该是老化了，这些很多事细胞的代谢产物，如果用ACCUTASE消化后你会发现，没多少正常状态的细胞了~

作者: cc1986 时间: 2011-7-1 09:24

回复 zsc78 的帖子

谢谢回答！！
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作者: cc1986 时间: 2011-7-1 09:24

回复 jhu132llh 的帖子

谢谢回答！！ z4 s: \/ W- C+ [* I) H7 @
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作者: cc1986 时间: 2011-7-1 09:25

回复 superlamp 的帖子( q* X" n/ x4 e4 h

谢谢回答！！9 B) Y/ ~7 Y- @$ v0 s( V6 |& Z
请问各位有没有养过或见别人养过。
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作者: zsc78 时间: 2011-7-1 19:54

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不知道你是哪个城市，据我所知北京某医院有这个细胞株，不知道他们培养怎么样？

作者: superlamp 时间: 2011-7-2 00:43

回复 cc1986 的帖子4 W, b/ M* G1 @9 k q i
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去saiye问问，我在那里买过细胞株

作者: bin 时间: 2011-7-21 20:54

我一个朋友的细胞也是这样，但是他的MSC仅仅是原代的，出现这样的问题大概会是什么原因呢？谢谢了。

作者: pla269 时间: 2011-7-22 12:51

首先不要铺太密，在铺之前一定要用力吹打散

作者: 干细胞谷 时间: 2011-7-22 15:06

我也遇到过这种情况。后来发现是培养时间过长导致。要及时传代。

作者: xiaxin1900 时间: 2011-7-22 15:18

首先检测一下有没有支原体污染，其次培养时可能细胞生长过密，没有及时传代，致使细胞老化，生长缓慢。还有可能传代时太稀，而又使其生长时间过长。建议消化后慢慢回复一下或置换新的细胞。

作者: xiaxin1900 时间: 2011-7-22 15:20

还有冻存时按你的上诉顺序可以用6:2:2.

作者: oucflora 时间: 2011-7-25 21:52

如果是刚复苏的细胞，细胞状态不好，可能是因为冻存和解冻引起的，细胞培养一段时间，中间换液几次，细胞的状态应该会好些。另外，你冻存时添加的血清浓度才10%，有些低了。以前实验室冻存细胞都是采用20%的浓度。

作者: oucflora 时间: 2011-7-25 21:55

另外，癌细胞培养注意及时更换培养液，细胞长期在pH过高或过低的培养液中生长，会导致酸中毒或碱中毒，细胞的胞质内也会出现空泡。

作者: cc1986 时间: 2011-7-27 10:07

回复 oucflora 的帖子2 K. F* ?; Y: j) I0 p# {6 f4 y

你的提示很有用，谢谢啦

作者: xiangchou812 时间: 2011-7-27 10:27

回复 oucflora 的帖子
F/ p4 {, w6 M' L, Y
我也遇到过这个问题，养293时培养液很快就变黄了。及时换液很重要啊。

作者: xiangchou812 时间: 2011-7-27 10:28

回复 xiaxin1900 的帖子0 }& g6 {4 w* j8 \% X

不知xiaxin1900是否做过？我看文献里一般DMSO都是10%，还真没见过用到20%的。

作者: xiangchou812 时间: 2011-7-27 10:31

回复 xiaxin1900 的帖子! y9 Q$ q. n# ^; i( I
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很赞同xiaxin1900的观点，细胞生长过密，生长时间过长，不及时传代，会致使细胞老化，出现楼主图片中的那种出现空泡的现象。

作者: xiaxin1900 时间: 2011-8-6 12:16

我一直用的是20%的DMSO，效果还不错的。

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