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标题: 求教人骨髓间充质干细胞提取培养具体方法 [打印本页]

作者: zarecol    时间: 2011-7-7 16:21     标题: 求教人骨髓间充质干细胞提取培养具体方法

从骨髓血中提取间充质干细胞的方法和具体步骤,谢谢指教。
作者: lizhiyong    时间: 2011-7-7 22:28

请问是人的骨髓原液吗?1.整个过程需要无菌操作2.将BM与PBS按1:3稀释后,过200目得滤网3.在离心管中加入人淋巴细胞分离液,之后缓慢加入稀释的骨髓液(人淋巴细胞分离液:骨髓液=1:2),2000转/分离心20分钟,中间层云雾状,即为单个核细胞,吸取放入另一离心管中,加入2倍体积的PBS洗去多余的人淋巴细胞分离液(2200转/分离心6分钟),弃上清,重悬细胞,计数,种于培养皿中。4.若是做大鼠的BMMSC,先无菌取出股骨与胫骨,用PBS冲出骨髓,进行上面的步骤。请试试,有问题联系我。。。
作者: zarecol    时间: 2011-7-8 08:10

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4 [9 e/ Y, j, J$ z# k9 H
2 ]( k; o* m6 Y! Y  l2 O( i这是密度梯度离心法,全骨髓法呢?细胞计数完了以多少比例接入培养皿中呢?
作者: luckzhuo1982    时间: 2011-7-8 08:36

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) d( j+ J9 r: U4 a/ W
7 x) _7 S& k- X9 @/ ^: b一般要是全骨髓培养方法的话我采用的是10的8次方进行培养,三天后就能看见长出形态的细胞
作者: huyuhai888    时间: 2011-7-8 08:39

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2 T1 L% N) u0 w8 u2 ?2 C! S* I/ k5 Q+ d5 [$ {6 L
您好   这种方法培养的骨髓干细胞长的好么?我也用这种方法,但是细胞没有贴壁,是用白血病患者的骨髓
作者: lizhiyong    时间: 2011-7-9 08:32

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7 o% P3 Q2 M. L3 p绝对没问题,注意细节,原代可多等几天,10-14天。再做两次试试
作者: 突击兵之小土豆    时间: 2011-7-11 14:59

请问楼上在2楼提到的BM是什么啊?刚接触该行业,不太懂。望指教!
作者: 蓝O海    时间: 2011-7-12 09:41

我先回答楼上的,BM(Bone marrow )是骨髓。0 Y  K# T0 ?, Q1 \





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