干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
求教人骨髓间充质干细胞提取培养具体方法
[打印本页]
作者:
zarecol
时间:
2011-7-7 16:21
标题:
求教人骨髓间充质干细胞提取培养具体方法
从骨髓血中提取间充质干细胞的方法和具体步骤,谢谢指教。
作者:
lizhiyong
时间:
2011-7-7 22:28
请问是人的骨髓原液吗?1.整个过程需要无菌操作2.将BM与PBS按1:3稀释后,过200目得滤网3.在离心管中加入人淋巴细胞分离液,之后缓慢加入稀释的骨髓液(人淋巴细胞分离液:骨髓液=1:2),2000转/分离心20分钟,中间层云雾状,即为单个核细胞,吸取放入另一离心管中,加入2倍体积的PBS洗去多余的人淋巴细胞分离液(2200转/分离心6分钟),弃上清,重悬细胞,计数,种于培养皿中。4.若是做大鼠的BMMSC,先无菌取出股骨与胫骨,用PBS冲出骨髓,进行上面的步骤。请试试,有问题联系我。。。
作者:
zarecol
时间:
2011-7-8 08:10
回复
lizhiyong
的帖子
4 [9 e/ Y, j, J$ z# k9 H
2 ]( k; o* m6 Y! Y l2 O( i
这是密度梯度离心法,全骨髓法呢?细胞计数完了以多少比例接入培养皿中呢?
作者:
luckzhuo1982
时间:
2011-7-8 08:36
回复
zarecol
的帖子
) d( j+ J9 r: U4 a/ W
7 x) _7 S& k- X9 @/ ^: b
一般要是全骨髓培养方法的话我采用的是10的8次方进行培养,三天后就能看见长出形态的细胞
作者:
huyuhai888
时间:
2011-7-8 08:39
回复
lizhiyong
的帖子
2 T1 L% N) u0 w8 u2 ?
2 C! S* I/ k5 Q+ d5 [$ {6 L
您好 这种方法培养的骨髓干细胞长的好么?我也用这种方法,但是细胞没有贴壁,是用白血病患者的骨髓
作者:
lizhiyong
时间:
2011-7-9 08:32
回复
huyuhai888
的帖子
( D+ q |' |, ]) @. ~ F
7 o% P3 Q2 M. L3 p
绝对没问题,注意细节,原代可多等几天,10-14天。再做两次试试
作者:
突击兵之小土豆
时间:
2011-7-11 14:59
请问楼上在2楼提到的BM是什么啊?刚接触该行业,不太懂。望指教!
作者:
蓝O海
时间:
2011-7-12 09:41
我先回答楼上的,BM(Bone marrow )是骨髓。
0 Y K# T0 ?, Q1 \
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5