干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 普通PCR制胶问题 [打印本页]

作者: 如来的观音 时间: 2011-7-23 16:38 标题: 普通PCR制胶问题

本人使用北京六一厂的电泳仪，制0.25g琼脂糖/25ml的1%的胶，加入3微升的GOLDVIEW，为什么紫外灯下看出现这样的结果？一半绿色一半蓝色

图片附件: [一半绿色一半蓝色] 3ENUW}(2A$F_9R45E]MR)$5.jpg (2011-7-23 16:36, 4.4 KB) / 下载次数 131
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=MzA3NTd8NDUzYzg0MTF8MTc5MzExNTM1MHww

作者: lemma710 时间: 2011-7-23 17:23

我以前用GOLDVIEW在紫外下看也是一半一半的，感觉染料会在电泳的时候跟着跑，所以现在还是用EB了。。。

作者: 星移龙一 时间: 2011-7-23 19:34

没用过GOLDVIEW，感觉EB挺好的啊，虽然有点毒性，但实验时自己多加注意就没事啦！！！

作者: like_gj 时间: 2011-7-23 20:29

为什么不用EB 感觉还可以吧9 }8 s8 X) j& t3 X1 ^" u& \
有毒，但是我们老板说国外的很多牛人根本不用手套裸手抓都行

作者: zxcv12345 时间: 2011-7-23 20:34

回复 like_gj 的帖子
2 P9 _2 n# H5 Y1 @3 H2 J
以前传说国内牛人，现在传说国外了？6 I) V& r" l4 u0 x

呵呵

还是小心点好，健康第一

作者: runsong 时间: 2011-7-23 21:22

GOLDVIEW是带正电的，电泳时会向负极跑，导致靠近正极的一半GOLDVIEW的含量降低。
EB也会有相似的情况，但只要电泳时间掌握好的话是不影响的。

作者: yuanyan2010 时间: 2011-7-23 21:29

我们实验室也是用的EB，如果跑的时间长的话是会跑掉一些的，顺便问下，EB的终浓度最优是多少啊？

作者: song2086 时间: 2011-7-23 22:35

goodview 就是这样，条带不太漂亮，正式照片还是EB好点，goodview 如果量太大电泳条带反而变形。

作者: runsong 时间: 2011-7-23 22:55

回复 yuanyan2010 的帖子$ ?7 ]& n. q( d( q& a6 V

呵呵呵呵。我们从来都是靠感觉。8 C6 m7 H/ S5 q' M W
橘子皮色的EB每20ml胶加1滴。依次类推，跟着感觉走。7 ?+ n: Y7 Z' E$ Z" u" \
不过也没办法，EB有毒，用量小，谁也不愿意冒险费去小心翼翼地称。呵呵》》》

作者: pla269 时间: 2011-7-23 23:29

你跑的胶有问题，跑太远了吧，一般不超过2/3全长，GOLDVIEW用的少，我们这里用EB，加入时要凉一点再加，还有人放的梳子都贴到底面了，也不行

作者: jun8013 时间: 2011-7-24 09:19

我们实验室用goldview我们都是加1ul

作者: chenks 时间: 2011-7-24 11:05

我们实验室用SybrGreen,挺好的,没出现过问题

作者: rain2402 时间: 2011-7-25 09:22

goodview就是这样。条带容易弯曲变形，而且会模糊。照出的相片也不是很漂亮，所以实验室要是有条件，还是用EB，多注意不要污染。

作者: lisaruirui 时间: 2011-7-25 18:52

我们都用EB，虽然有毒，但效果还好，从来没有这种一半一半的现象

作者: viv2005 时间: 2011-7-27 10:43

我用的是EB，有的时候也发现这种2种颜色，下面的EB都跑没了，很烦人

作者: wwwert 时间: 2011-7-27 16:45

染料带正电的，会反方向跑，EB也一样
GOLDVIEW就是丫啶橙，安全性未必比EB高8 P' P' L% `9 y p
有钱的话不如试试gelstar,比EB灵敏

作者: sylar.wy 时间: 2011-8-6 09:16

我们也是用goldview啊，但是没出现过这种情况。。但是你的goldview加得太多了吧？十分之一？？我们是百分之一加的，所以可能出现了也不明显。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)