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标题: 淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用 [打印本页]

作者: deron 时间: 2011-8-1 21:44 标题: 淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用

主题：淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用

说明：原文来自the journal of immunology，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）
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翻译内容：5 D3 s9 T- d8 R, g$ `9 s4 U6 ]
淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞的长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β1的作用8 T: Z+ S: y- n) W. P$ z
外周血淋巴细胞（PBL）在含IL-2的常用组织培养基中培养，可以获得溶解新鲜肿瘤细胞的能力，这些细胞被称为淋巴因子活化的杀伤性（LAK）细胞。LAK活性在5d的培养后达到顶峰，随后急剧下降。我们研究了培养条件，并培养出能够长期培养扩增且具有LAK活性的细胞。细胞通过在相关的低密度培养和常规补充培养基及重组IL-2（r-IL 2）后，LAK功能较短期培养有显著提高，而且可以培养至少21天的同时细胞数量扩增到100倍。通过用抗CD3(OKT3)单抗和r-IL 2刺激培养物后，可以在保持类似LAK活性的同时，获得大约1000倍的扩增数量。β白介素1（β-IL 1）、干扰素β（IFN-β）或干扰素-γ（IFN-γ）的外源加入，能够增加抗CD3、r-IL2扩增细胞群的溶解活性。较目前3-5天的培养体系而言，上述改进可以让个体供者在体外培养中获得更多数量LAK细胞。' T5 u  y& h3 Y3 `* e4 {5 A
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原文：  [attach]31172[/attach]

作者: deron 时间: 2011-8-1 21:49

这篇文章在当时应该算是一个里程碑式的改进吧,已经用到了目前CIK培养中的抗CD3和IFN。
研究者在文中做了一个不错的对照
1. 单独使用IL-2和组织培养基（TCM）——获得30-100倍的扩增数量。3 I5 Z9 |6 `& r% s
2. 前两天使用抗CD3抗体作为最初的刺激信号，这明显增加了有LAK细胞活性的细胞数。1 n8 c( C+ y, T  h8 M$ z; s
3. 在2中的最后两天加入β-IL1、IFNβ或γ，进一步增加了LAK活性。: [: Y, L) z! }$ b  K
而且研究者已经开始使用E.coli产出的高度纯化的重组IL-2，而不是像之前那样——20%体积的IL-2……; [( y" Q8 S3 _  ?6 S5 v
之前介绍的经典方法，以1×106/ml的数量在含r-IL2的组织培养基中培养，第5d到达顶峰，第6d便急剧下降。而如果降低培养密度，以0.5×106/ml的较低密度起始培养，并每2d补充新鲜培养基和IL-2，将密度始终控制在1×106/ml以下，可以延长至14d。
作者加入抗CD3后，细胞数在21d内增加了1000倍——不用抗CD3的，只扩增了100倍，差距啊～，虽说细胞数上去了，但是前5天的LAK活性确下来了，说明扩增的细胞不是LAK效应细胞，或者说抗CD3的加入延迟了LAK效应细胞的生成；或者说早期增殖的T细胞是无杀伤性细胞。但在21天的最终杀伤活性则远远超过了不加抗CD3的。. C& B& y: r( a' n
总的来讲，这篇研究的意义在于
CD3和IL2的加入，显著增加了LAK细胞活性功能
+ H4 p: x/ m8 d( t& d5 i1 y2 q! bβIL1、IFNβ或γ，增加了培养中的细胞溶瘤活性。

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