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标题: MEF镜下许多亮颗粒 [打印本页]

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-9 09:46 标题: MEF镜下许多亮颗粒

养小鼠MEF一段时间了，每次做原代，镜下总会看到很多亮颗粒，比细胞小一点，不动，经过换液能减少，细胞长势也还好（没有比较，所以不知道是否有影响）。只是困惑这些亮颗粒是什么东西？会不会对后续处理细胞造成影响？

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-9 09:48

怎么发不了图片？

作者: 细胞海洋 时间: 2011-8-9 10:27

回复 sizhengliu 的帖子1 `* o k( _/ I7 o, I
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单个图片不要大于1000kb

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-9 12:53

抱歉这么晚才发来图片，看看 0807-MEF0805-Y-颗粒-20.jpg

图片附件: 0807-MEF0805-Y-颗粒-10-1.jpg (2011-8-9 12:52, 389.68 KB) / 下载次数 276
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作者: jn808 时间: 2011-8-9 13:22

细胞状态不好啊，最大可能是细胞碎片吧!也有污染的可能，换液后亮点物质会增多吗？

作者: panyanfei 时间: 2011-8-9 14:38

看似死细胞挺多请问是几天还一次液的啊？

作者: lemma710 时间: 2011-8-9 14:53

感觉细胞状态不是很好呀，不排除有污染的可能性

作者: rain2402 时间: 2011-8-9 14:54

是细胞碎片，你在细胞传代时消化的过度是一个原因，状态不好也是一个原因。至于有没有其他的原因我就不知道了

作者: stemcell313 时间: 2011-8-9 17:15

看上去亮的颗粒是新增殖的细胞，可换液的时候用吸管冲一下，把换下来的液体收集起来，离心，接种在一个新的培养皿中，这样就可以知道是细胞还是碎片。不过从图片看，不是细胞碎片。

作者: 大猪小猪落玉盘 时间: 2011-8-9 17:46

扔了吧，污染

作者: yangpan521 时间: 2011-8-9 19:49

不用担心，亮点那是血细胞，镜下观察呈金黄色，换几次也就没事了，

作者: 爱鬼鬼 时间: 2011-8-9 21:06

正想问是不是消化胚胎的后的其他细胞共生长造成的想问下楼主要什么什么显微镜拍的这么清晰

作者: 爱鬼鬼 时间: 2011-8-9 21:06

正想问是不是消化胚胎后的其他细胞共生长造成的想问下楼主要什么显微镜拍的这么清晰

作者: 褚cell 时间: 2011-8-9 21:21

染色试试，分别染细胞核和细胞质，再染脂肪颗粒，。。。。看看是哪种成分，应该不是污染，这个体型和个头的微生物不多。

作者: yangpan521 时间: 2011-8-10 07:59

olympus倒置显微镜，

作者: 前途似锦 时间: 2011-8-10 11:35

感觉不是正常的东西

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:17

回复 stemcell313 的帖子

谢谢你的建议，我会去尝试，结果会发在帖子里！

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:18

回复大猪小猪落玉盘的帖子
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这么肯定？依据是什么？

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:20

回复爱鬼鬼的帖子

不是共生！莱卡的倒置，带相机的。

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:22

回复褚cell 的帖子( W9 p1 B' ~* K" K' d h

培养基和细胞的长势也没有污染的迹象

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:26

回复 yangpan521 的帖子* Q Z! B3 ?0 p. `, Z
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随着换液和传代，它们会逐渐减少。请问：这些东西会影响MEF的生长吗？如果做饲养层，会对其他细胞和检测造成影响吗？

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:29

回复 jn808 的帖子7 V) e+ f! }* C( _4 {8 I9 e; n

原代，还没有做任何处理（消化、换液），如何而来的碎片呢？求解

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 14:31

回复 panyanfei 的帖子1 _4 o3 I9 {6 ~# O

原代，未换液

作者: rain2402 时间: 2011-8-10 15:02

楼主，那就不能是脂肪或蛋白颗粒吗？？

。。。。传代换液后会少些的。

作者: yangpan521 时间: 2011-8-10 18:29

不会呀，我刚做过，换几次液后，血细胞明显减少，长满时用ＤＰＢＳ清洗一下后直接冻上，不会有影响的，他也不贴壁

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-10 18:41

回复 rain2402 的帖子0 Q3 A0 v' ?" L! Q' p7 ]- s
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有这个可能性，只是拿出图片来让大家看看、讨论下

作者: bllx58 时间: 2011-8-11 10:21

死细胞很多

作者: youtellme 时间: 2011-8-13 23:01

看样子是一个很好的污染的图片。这种就先染下色看看是不是污染在找其他原因，有点明显。

作者: dongxin 时间: 2011-8-16 09:16

貌似是死细胞或是碎片，可以尝试用PBS或是培养液多洗几次，看看效果如何！

作者: 123jiaoyue 时间: 2011-8-16 09:24

回复 sizhengliu 的帖子
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个人感觉你这第二张片子，细胞密度是不是太大了，那些亮亮的貌似脂肪颗粒，不影响生长，传代以后随着细胞状态的变好这些颗粒会逐渐减少

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-16 09:50

回复 123jiaoyue 的帖子" \/ `7 H6 s2 g% g! c) h
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谢谢！这些脂肪颗粒又是从哪里来的？

作者: 123jiaoyue 时间: 2011-8-16 10:20

回复 sizhengliu 的帖子

个人觉得是你细胞密度大培养也的养分有限，条件不适宜细胞本身就会分泌一些东西这些亮点就是细胞自身分泌的

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-16 20:42

回复 123jiaoyue 的帖子
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原代还没长出多少细胞的时候就有很多了，不像是细胞分泌的

作者: initiation 时间: 2011-8-16 20:57

细胞状态很差，建议重新复苏一批吧！

作者: 123jiaoyue 时间: 2011-8-17 09:00

回复 sizhengliu 的帖子
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你就要看你的饲养层和你所用的培养基是否合适了例如血清不适宜也会导致这样的问题

作者: dongxin 时间: 2011-8-23 10:18

本帖最后由 dongxin 于 2011-8-23 10:26 编辑
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好运！2 I2 E6 y6 n$ u* Q

作者: sizhengliu 时间: 2011-8-24 09:35

回复 dongxin 的帖子

谢谢

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