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标题: 用无血清培养液养脐带间充质干细胞 [打印本页]

作者: chemjumao 时间: 2011-8-22 16:32 标题: 用无血清培养液养脐带间充质干细胞

用无血清培养液养脐带间充质干细胞已近5个月。我们用Lonza公司的UItraCULTURE 12-725F 无培养液。开始时一个贴壁细胞都不长，后来加了2mmol/l 谷氨酰胺，用组织块贴壁法就能培养出贴壁细胞来。约12天左右每根脐带都能长。但细胞很快就变圆脱落死亡。不知是什么原因？希望能得到大家的帮助。谢谢！
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作者: 神经干 时间: 2011-8-22 16:38

贴壁不好，为什么不用有血清培基啊，用组织块贴壁顶多一个周就爬出来了，而且贴的特别牢

作者: yinjiqingqq 时间: 2011-8-22 17:41

强烈要求上图！

作者: 君鸿 时间: 2011-8-23 10:00

我是做胎盘间充质干细胞的，我们也试图做无血清培养，查了很多资料，和一些相关了解，首先要确认细胞的代次，最好是P5以前，细胞的增值和贴壁是很好的，细胞的无血清培养是一个循序渐进的过程，在细胞复苏时最好还是用10%到12%的血清最好，以后传代慢慢递减，这样细胞有一个适应的过程，另外无血清培养的成本相当高，现在一般都是买现成无血清培养基，其成分不一定可靠，最好是自己研发配用，既节约了成本又有了质量保证，目前我们正在做，等有了结果会与大家一起分享。

作者: 一转身的距离 时间: 2011-8-24 09:40

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你好，请问你做的是胎盘的什么间充质细胞？

作者: 1301918986 时间: 2011-8-24 12:34

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你们组织块贴壁一个星期就爬出来了啊，我们的每次做都要十几天呢。

作者: chemjumao 时间: 2011-8-24 15:24

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开始设计科题时为避免不必要的异体旦白反应，所以尽可能不用有血清培基，也不轻易加细胞因子。这样在培养细胞时就增添了不少的困难。辛苦啊！
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作者: chemjumao 时间: 2011-8-24 15:28

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本人非常赞同自己研发配用无血清培养液。但没有厚实的软硬件基础是不容易搞出来的。只好等你们有了结果一起分享。在此先谢啦！

作者: 君鸿 时间: 2011-8-24 17:11

我们是取胎盘小叶用来做间充质，经过培养筛选，流式检测后确认为间充质干细胞，就培养到P6供临床使用。直接给病人静脉注射

作者: haibara007007 时间: 2011-8-25 14:03

说实话如果无血清培养，组织块法干细胞生长确实比较困难
研究题目的要求来说是比较困难的0 }0 h) Y2 s; J0 a- ]7 K. c+ [
建议原代使用含血清培养基

作者: chemjumao 时间: 2011-8-26 10:37

回复君鸿的帖子9 j/ ~6 k6 _- A, r) P) B
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君鸿好！你们的细胞培养到p6是否已将血清全撤退了？如果全退掉还能传几代？是什么培养基？不好意思问多了。谢谢指教！

作者: 君鸿 时间: 2011-8-26 11:21

你好，我们的细胞是p6代就直接注射病人，以前做过实验细胞养到P6以后就开始分化，而且增殖也明显减少，所以到后面我们都不传到P6以后了，

作者: zhang0194 时间: 2011-11-7 09:04

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大哥，到P6在回输效果怎么样？我们这里都是p3 p4 ，最多p5，p5
以后分化严重吗？同求配方啊，现在一直用FASGROW的培养基，批次之间质量很不稳定！

作者: yangwy028 时间: 2011-11-9 09:32

细胞脱落一可能是因为生长因子的缺乏，二可能是因为受到支原体或者是细菌的污染

作者: fespysok 时间: 2011-11-10 13:04

我们也是使用Lonza公司的UItraCULTURE 12-725F 无血清培养液和PALL的Ultroser G冻干粉，养MSC效果挺好的啊！

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