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标题:
初识黑胶虫！！！（感谢流浪的波斯猫和都市青蛙）
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作者:
franty
时间:
2011-8-27 15:47
标题:
初识黑胶虫！！！（感谢流浪的波斯猫和都市青蛙）
本帖最后由 franty 于 2011-8-27 15:50 编辑
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这是我的被黑胶虫污染的脂肪来源细胞，在上一个帖子中在大虾们的帮助下认识了这种污染。这种污染出现在我更换血清过夜之后，培养液没有浑浊，细胞大多数悬浮死亡，原被细胞铺满的6孔板出现很多空隙，仅余少数细胞贴壁，在低倍镜下黑色小颗粒满视野；换到高倍镜，可见到黑色颗粒蠕动较迅速，除残余细胞之外还可见许多发亮的物质，这些物质也在微微蠕动，不知是黑胶虫幼虫还是黑胶虫吞噬细胞的残余？因为在污染严重的孔内，除了寥寥无几的贴壁细胞这种发亮的东东很多。
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原来细胞铺满，一夜之间出现大批细胞脱壁死亡，满视野都是黑点
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这些黑点动得很厉害
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污染严重的孔内，这种发亮的东东很多
作者:
yuanyan2010
时间:
2011-8-27 16:02
这种东西真的很头疼，我也经常遇到，不知道怎么才能避免黑点。。。
作者:
hany2007
时间:
2011-8-27 19:13
用10微克每毫升的环丙沙星，不过你的细胞污染不单单是黑胶虫，单纯黑胶虫污染没有这么恶心的
作者:
FreeCell
时间:
2011-8-27 21:48
嘻嘻，“黑胶虫”极有可能就是阮病毒，小心呀！
作者:
都市青蛙
时间:
2011-8-27 23:31
我好想也遇到了……
作者:
hujun35174003q
时间:
2011-8-28 10:59
我也见过，直接扔掉
作者:
644298042
时间:
2011-8-28 11:58
之前邻居一直遇到这种问题，出于好奇就把自己的细胞放进去养，我的还是没有出现这种现象，不知为什么，到底怎么污染的
作者:
meiying3061
时间:
2011-8-28 13:14
我遇到最多的就是他，都不知道哪来的，前辈们，这个的来源是什么，怎么避免啊？
作者:
流泪的鱼
时间:
2011-8-28 20:46
原因可能有2个：1.天气原因，空气质量太差。1.自身的器皿受污染：移液管，离心管，培养瓶，培养基，血清，受污染的抗生素等。3，你的细胞是用培养皿还是培养瓶养的？
作者:
zhaolei0602
时间:
2011-8-28 21:17
我也看过这种现象
作者:
人在日本
时间:
2011-8-29 00:04
楼主是用的什么染色，怎么又是绿又是黑的
作者:
lele
时间:
2011-8-29 08:42
我也遇到过这种情况，但没有这么严重。我想你的细胞可能一开始就有轻微的污染，你没有察觉到。至于引起的原因这个也不好说，所有接触过细胞的仪器耗材都有可能是直接或间接污染源，需要逐级排除。关于处理方法我一般会采取细胞扔掉，检查是否是培养基、培养皿、培养箱内水箱和PBS问题。
作者:
dilal
时间:
2011-8-29 09:08
建议排除支原体污染，黑的可能是细胞状态不佳后崩解的细胞碎片。
作者:
lh_kitty
时间:
2011-8-29 09:40
双抗，庆大霉素，泰乐菌素我都用过的，效果不怎么明显。而且容易传给其他细胞，最好早点清理掉，如果实在细胞珍贵，用多种抗生素联合试一下吧，不过最后即使黑点减少，细胞状态也差
作者:
meridian
时间:
2011-8-29 22:51
传代时 离心取出终止的胰酶，用新的培养液重悬可以减少或者避免类似的污染
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:19
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人在日本
的帖子
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没有染色啦，是使用了倒置显微镜的绿色滤光片，背景色而已，据实验室老师说，在国际上图片统一使用绿色背景，所以我们就都用绿色的背景了；至于黑色的，就算没有背景色，也是黑的。
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:21
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hujun35174003q
的帖子
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嗯，已经扔掉了。听说这几天，实验室里另外两个人的细胞也这样了，唉，默哀。。。
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:23
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流泪的鱼
的帖子
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是六孔板养的，以前用培养瓶养，没有发生过这种污染。我怀疑是不是培养板的缝隙太大了，细菌什么的容易进去？以后还是用瓶养！
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:27
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644298042
的帖子
! S) n- D. s! q R6 a
# j6 j0 @3 e7 K
lz是什么细胞？据说黑胶虫不吃肿瘤细胞。
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:29
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流泪的鱼
的帖子
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: C8 k. B ~8 |. a% l
嗯，我们实验室的空气质量确实不怎么样，还有血清，我也怀疑。以后坚决不借血清用了！！！
作者:
franty
时间:
2011-9-2 07:39
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hany2007
的帖子
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10微克每毫升的环丙沙星是加到培养基里吗？可以像双抗一样常规加吗？我同学做过实验，把新洁尔灭原液滴到有黑胶虫污染的细胞中，刚开始黑点蠕动加剧，然后逐渐减弱，最后就不再蠕动了，可见用新洁尔灭杀黑胶虫有效，不过用新洁尔灭杀完黑胶虫，细胞也不能要了。我们现在都用新洁尔灭1:5稀释后，擦培养箱、超净台等。
作者:
遗云射月
时间:
2011-9-21 09:55
前两天我也见了 风机层流坏了 是空气质量的原因
作者:
zhaipinfang
时间:
2011-12-31 14:38
好像血清的影响因素大一些。我以前在实验室也遇到过这种情况，后来老板还把实验室给改造成万级洁净室了，这种情况也没能解决。后来换了一批血清，就不见这种东西了
作者:
yuwenlan
时间:
2011-12-31 15:26
扔。
作者:
franty
时间:
2012-1-2 23:02
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zhaipinfang
的帖子
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不错，我的细胞里出现黑胶前是换了血清的。不过，我现在换回之前用的血清，有时候还会出现黑胶，只能说可能与血清有关。
作者:
zhaipinfang
时间:
2012-1-3 08:49
是这样的，不过再换回之前的血清的同时，也要换回之前未出现黑胶虫时的细胞。
作者:
pailishi
时间:
2012-1-3 09:50
我们实验室也遇到了，很奇怪的，有时候一个人做的分不同的皿养，结果有得染了，有的正常，我们也是见了就扔，然后整个实验室彻底消毒
作者:
冰枫de梦
时间:
2012-1-4 09:24
操作仔细点就可以避免了，原来我刚开始做的时候也出现过这种情况，后来熟练了就再没出现过了。
作者:
歪歪
时间:
2012-1-4 09:30
这不是黑胶虫吧，是支原体污染吧！
作者:
franty
时间:
2012-1-4 12:09
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歪歪
的帖子
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3 M2 Q! t/ D- }- @- a
支原体污染是没有黑点的 也是看不到的 只能用试剂盒检测的 不是吗？
作者:
歪歪
时间:
2012-1-4 12:30
http://www.biomart.cn/experiment/430/488/490/496/17457_13.htm
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http://www.biomart.cn/experiment/430/531/538/18516_5.htm
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我觉得很像，你可以PCR检测一下。
作者:
sanfa
时间:
2012-1-4 12:47
本帖最后由 sanfa 于 2012-1-4 12:48 编辑
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这东西超恶心 最近刚碰到的 连续持续了2个月 满培养箱都是 复苏了还污染 液体都弃掉新配 清洁整体环境 郁闷死我了
作者:
franty
时间:
2012-1-4 15:54
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sanfa
的帖子
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是啊、是啊！并且奇怪得很，据我们实验室一个师姐说，养细胞的人越多反而少；孵箱里细胞越少了，黑胶反而多。。。
作者:
歪歪
时间:
2012-1-5 09:23
我昨天刚分离的MEF，今天换液就发现全是黑的来回动的“虫子”。烦死了
作者:
franty
时间:
2012-1-5 14:08
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歪歪
的帖子
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是细菌还是黑胶虫污染？
作者:
歪歪
时间:
2012-1-6 08:48
培养基不浑浊
作者:
franty
时间:
2012-1-6 20:15
歪歪 发表于 2012-1-5 09:23
Z1 e0 S S( i: c
我昨天刚分离的MEF，今天换液就发现全是黑的来回动的“虫子”。烦死了
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虫子？那就是条形的咯？可是我看到的黑胶虫是黑色圆点。
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