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标题: iPS培养的一个问题 [打印本页]

作者: 573639471 时间: 2011-8-31 19:58 标题: iPS培养的一个问题

iPS买来传了几代后，克隆感觉很薄，特别是中间类似脱落了很多细胞，严重的克隆就是一个圈状，中间无细胞了。细胞总会出现些漂浮的。这是什么问题呢？如果分化能通过形态简单辨别出来吗？

作者: sunny2829 时间: 2011-9-1 10:50

你买的是哪种病毒转染的，4F吗？ }, ~* x* a5 _
克隆和饲养层同一个平面的，只要克隆细胞致密，核质比大，边缘清晰，就没问题。至于中间类似脱落了很多细胞，有可能是克隆状态不佳吧，传代时去掉此类细胞便可。
克隆中间出现圈状？是不是你机械法传代啊？然后再小克隆中间刮个洞？与ES相比，差异还是比较大的。' b! z# ^; x. B; o( c$ @
分化是可以通过形态分辨的。未分化克隆细胞致密，核质比大，边缘清晰；当细胞变大，细胞形态又圆变成其他形状，核质比小等等，就说明已经分化了~~~

作者: 573639471 时间: 2011-9-1 11:14

边缘不太清晰，这是我最担心的

作者: wangshumin12311 时间: 2011-9-1 14:40

有没有用feeder养，多传几代，拍照看看，iPS细胞复苏后分化比较严重，多传几代会好些！
) D, Z! o) B7 \8 \5 w4 l
补充内容 (2011-9-1 14:41): L. J+ m0 p4 U/ y. ]3 n9 A& F
还有麻烦写清楚是人还是鼠2 [6 W& S8 u& M2 x

作者: sunny2829 时间: 2011-9-2 15:41

回复 573639471 的帖子8 P8 G% a7 l. ]& N3 k" t6 \5 |) \
# I3 q/ W& g) y8 F
拍个照片看看吧~~~

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