干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 共培养时细胞小室细胞观察问题 [打印本页]

作者: dragon513    时间: 2011-9-13 12:04     标题: 共培养时细胞小室细胞观察问题

      谢谢大家对共培养感兴趣,我准备用细胞小室做共培养了。但有资料说使用的膜是不透明的,因此膜上细胞形态是不能观察的,只能观察底部细胞。请问我要同时观察两种细胞形态等变化咋办呀?有做过这方面研究的站友吗?望知道的同仁不吝赐教或大家一同讨论解决问题的方法!
作者: sun_happone    时间: 2011-9-13 18:31

我做过一次,但因为效果不理想后来就停止了,可以跟你分享一下,transwell是有很多很小的小孔的,我不知道你用的孔径有多大,我当时用的是0.4um,他分泌的因子可以通过小孔进入下面的细胞,但至于能否看到细胞,好像下面的细胞只要focus正确还是能够看到的,只不过不是很清晰。希望对你有帮助~~~
作者: chuanbaozang    时间: 2011-9-14 09:48

完全不用过于担心0 h5 L: C! D" d6 K
我曾经用过透明的Transwell进行过培养,通常能够买到的有两种,一种是Milipore公司的,显微镜下观察是网格状的,另外一种是Corning公司的,显微镜下呈条纹状的。( V6 n. z, n9 U" r0 ^8 }
我培养的是上皮细胞,自己感觉Corning公司的那种观察起来更清晰。不过好像买的不太容易,多是老板从香港带回来的。
' c7 |/ I2 J% Y1 s% e这些transwell都有根据不同的培养板提供配套的,corning公司的事悬挂式的,而milipore的是嵌入式的,也就是transwell下有三个小的支撑点。感觉都差不多。
; o8 J: Y- V; {: x0 n最后提醒一点,有些膜是疏水性的,有些是亲水性的,购买的时候要问清楚。我曾经就因为在疏水性的膜上培养细胞,一直未能成功,查找原因是细胞不粘附。$ L+ m. I3 G+ N: K
以上是个人的经验,仅供参考
作者: dragon513    时间: 2011-9-14 10:26

回复 sun_happone 的帖子& l$ {. x& R% y1 s
; c; }7 x  W5 x
谢谢,我也准备用0.4um的,下层的是可以看到的,但关键是上层细胞要观察似乎更困难。
作者: dragon513    时间: 2011-9-14 10:27

回复 chuanbaozang 的帖子' a" V; B% E/ U, k7 G

. g2 [' v0 M+ r$ ^谢谢你的分Chuanbaozang的分享,看样子我得找找内地有卖你说的那种具有透明膜的细胞小室不。但愿能有吧,谢谢!




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5