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标题: 慢病毒包装 [打印本页]

作者: huangcong1988 时间: 2011-9-21 14:44 标题: 慢病毒包装

在包装慢病毒时，一般的protocol上都是用293T细胞做转染，如果没有293T细胞，有293FT，那么用293FT转染行不？据说是293FT转染效率比293T还高啊

作者: haijing12585 时间: 2011-9-22 23:03

回复 huangcong1988 的帖子 u+ Z9 v; w$ r8 D9 I' W6 ]

可以，这个是公司专门开发的生产慢病毒的包装细胞

作者: juan880929 时间: 2011-9-23 09:55

可以的。有这样包装慢病毒成功的时间

作者: majing217 时间: 2011-9-26 10:26

我是一个初学者，我想问一下，慢病毒包装的一般的细胞密度是达到多少？) A+ H5 e' q: G

作者: xiaoyurly 时间: 2011-9-26 11:14

回复 huangcong1988 的帖子& U2 k' N z, Z2 \# x5 f
1 d1 K5 L3 C5 h8 i' s9 T5 U* V6 r
293FT可以用来包装慢病毒，很多protocol都用这种细胞，不过较之293T，FT细胞贴壁性差，轻晃即可漂离培养盘，操作需小心，顺利的话得到的病毒滴度确实很高。

作者: huangcong1988 时间: 2011-9-26 13:28

回复 majing217 的帖子

一般情况下，接种的时候细胞最好是百分之7,80汇合度，到转染的时候应该是百分之90左右

作者: huangcong1988 时间: 2011-9-26 13:29

回复 xiaoyurly 的帖子- i) Z4 m1 f2 C1 v" H

293T贴壁就很差，我之前换液的时候想用PBS洗一下，结果轻轻一摇就全脱落了，而且消化直接加了胰酶然后一摇就全脱了

作者: xiaoyurly 时间: 2011-9-27 11:41

回复 huangcong1988 的帖子3 t% U |) G3 L5 ]- D: ~4 u8 G
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293T贴壁性还好，操作上注意轻拿轻放，减少液体冲击。在培养过程中一般2天即传代，期间无需换液，胰酶轻微消化就能分离。包病毒后293T极易脱离盘底，因此在收病毒过程不用PBS等冲洗，收完轻轻加入新培养基即可，一般收48、72h两次。

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