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标题: 转染时间的计算 [打印本页]

作者: lemma710 时间: 2011-10-26 16:19 标题: 转染时间的计算

最近遇到个疑问，用脂质体转染，转染后24小时从什么时候开始计算呢，是从加脂质体的时间点开始算，还是从6H 换液以后的时间点开始算呢？

作者: bjman10016 时间: 2011-10-27 07:54

我的理解是加脂质体的时间点开始算

作者: tonyp0720 时间: 2011-10-27 08:13

我们做的时候都是从加脂质体的时间点开始算，一般转染30小时，第一天上午9点转染，第二天下午3点就可以收集细胞了，这样可以让载体充分表达。

作者: john7812x 时间: 2011-10-27 08:26

当然是从加脂质体的时间点开始算起。1 R0 G5 K5 A0 {! R4 \* i
因为脂质体和细胞接触后，转染已经开始发生了。1-6h后换液是去除多余的，没发生转染的脂质体，避免对细胞造成过度的伤害。

作者: rain2402 时间: 2011-10-27 15:19

我经历过的几个实验室计算是这样的，供你参考，转染后24小时从加入脂质体的时候开始计算。

作者: lemma710 时间: 2011-10-28 15:39

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转染30小时……六小时的时候不换液的么？？

作者: lemma710 时间: 2011-10-28 15:40

回复 john7812x 的帖子% A, S% ?7 s( H) A
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哦~~明白了，多谢指导~

作者: lemma710 时间: 2011-10-28 15:41

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谢谢~

作者: lemma710 时间: 2011-10-28 15:41

回复 rain2402 的帖子

哦~谢谢，明白啦~~

作者: tonyp0720 时间: 2011-10-29 11:02

lemma710 发表于 2011-10-28 15:39
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) [1 Q6 A6 W: M2 Z# [2 F: J转染30小时……六小时的时候不换液的么？？

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6小时换液的，不过转染时间是从加入脂质体的时候算起。

作者: lemma710 时间: 2011-10-29 13:17

回复 tonyp0720 的帖子
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哦，谢谢，现在明白了~

作者: guo6259 时间: 2011-10-30 12:15

肯定是从已加入脂质体就开始计时的。

作者: trl137 时间: 2011-10-30 22:44

我理解的是：转染当天，转染后，6小时换液以后开始计算。而且我做了好多转染实验都是这样做的

作者: 王乾 时间: 2011-11-1 22:52

一般的实验无所谓转然后还是换液后，脂质体转染是四小时换液，因为超过四小时就不会有更多的质粒进入细胞。质粒一般是在转然后12小时就已经开始有表达了，36到48小时到顶峰，所以具体什么时间要看你的实验目的了。比如转染后36小时就可以收蛋白了，干扰RNA的话一般要72小时后检测。

作者: salomemao 时间: 2012-2-22 10:17

6小时之后就可以换液了，有的转染试剂比较温和，可以不换液，但是我做的时候大部分还是换液的，毕竟还是对细胞有伤害的。

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