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标题: 求助配制Dispase2 [打印本页]

作者: luckywen 时间: 2011-11-9 22:33 标题: 求助配制Dispase2

请教前辈如何配制Dispase2？用PBS稀释后有好多不溶物，不知用什么稀释液效果比较好？

作者: susannajoke 时间: 2011-11-9 23:01

这个说明书上写的很清楚
Preparation of Stock and Working Solution# O4 ^) F# ]5 j+ D& q) Y+ b
Dissolve the non-sterile lyophilized enzyme in Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl) (10 mg/ml). Dilute further6 s% W- U, o) X' j1 ?% o
with the culture medium to be used for the isolated cells to a final concentration of 0.6 to 2.4 U/ml. Concentrations higher than 2.4 U/ml are
not recommended. Sterilize through a 0.22 m filter membrane.% u: X7 D3 r4 X7 h& P5 B% G9 v

溶解在Hepes-buffered saline （Hepes缓冲盐溶液：50 mM Hepes, 150 mM NaCl，用KOH调节 pH 7.4），储层液浓度10 mg/ml；
工作液用培养基稀释为0.6 - 2.4 U/ml （0.8 U/mg），用滤器过滤除菌

作者: yangpan521 时间: 2011-11-10 08:57

我们配置时用的是基本培养基（不含血清），然后0.22ul滤器过滤。

作者: yinjiqingqq 时间: 2011-11-10 13:42

使用基础培养基和PBS都可以，但要注意一下溶液的PH值。配置的酶溶液最好to stir gently for 10-20min. 以前我充分混匀溶液后，也有不溶物。但酶的效果也很好，个人觉得那可能是milk之类的东西。最好过滤分装，-20度保存。如果你不是长期使用，建议你一次不要配太多，因为一些酶配制后，不适于长期保存。

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