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标题: 如何能提高慢病毒的感染效率 [打印本页]

作者: pla269 时间: 2011-11-16 01:32 标题: 如何能提高慢病毒的感染效率

我在做成体细胞重编程，但细胞的感染效率很低，如何能提高慢病毒的感染效率，请各位大侠指教啊？

作者: hany2007 时间: 2011-11-16 04:02

1.养好你的包装细胞，没有好鸡就不会有好蛋。
2.用16微克/ml的polybrene预先处理待转细胞两个小时，再把等体积的病毒悬液加进去。
3.可在转染四天后再加强转染一次。; q) r/ W" }0 ?& Y- S
4.心情要尽量振作一些，没有好心情就没有好的实验结果。

作者: wangyimei 时间: 2011-12-5 12:52

要想提高感染效率，那就得首先获得高滴度的病毒，以及要做好预实验测定一下你要感染的靶细胞的MOI是多大比较合适，病毒质量好，MOI合宜，会有一个好的感染效率！

作者: ellapan 时间: 2012-1-3 04:32

回复 hany2007 的帖子, R4 Z& S. r( x& U! T& j* j6 ^) i

“用16微克/ml的polybrene预先处理待转细胞两个小时，再把等体积的病毒悬液加进去。”这个具体怎么处理的那？我还是第一次看到这个方案，我一般都是几乎同时加入的，预先加入polybrene可以显著提高效率吗？你说等体积的病毒这个等体积是指？! @% a7 H! O6 i( g9 c

作者: ilovelife 时间: 2012-1-3 23:17

对这一话题感兴趣。我在从MEF中诱导iPS细胞。我们用的是4微克/毫升的polybrene，和病毒悬液同时加入的，24小时后重复感染一次。据我们老板的经验讲，病毒悬液最好是新鲜的，未经冻溶过，否则滴度会下降。另外，感染时，MEF 细胞最好是70-80%confluence。这是我第一次做该试验，还没有到长出iPS 的那一步，个人经验很少，好在老板爱讲，把他知道的都想告诉你。我来这里也是为学习，交流经验，让自己在这方面快点成长起来的。

作者: gact 时间: 2012-3-30 20:23

hany2007 发表于 2011-11-16 04:02
3 ?5 w3 ~4 j* n$ N1.养好你的包装细胞，没有好鸡就不会有好蛋。
! m( \& t8 l+ V8 { `2.用16微克/ml的polybrene预先处理待转细胞两个小时，再把等 ...

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心情果然重要

作者: wuxiao101325 时间: 2012-4-19 10:29

回复 wangyimei 的帖子! Y7 e8 E4 I) R1 {7 k2 _

请教预实验是否就是用被感染细胞做病毒滴度实验而不是用病毒包装细胞做？

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