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标题: 乳腺癌干细胞球传代 [打印本页]

作者: dmmwhb 时间: 2011-11-30 19:21 标题: 乳腺癌干细胞球传代

六孔板养乳腺癌干细胞球，低于1000个/ml细胞浓度，加3ml培养液，请问多长时间换液？传代是吹打成单细胞后一个板传两个板或一瓶传两瓶吗？谢谢各位大侠了

作者: 一枝独秀 时间: 2011-11-30 23:35

需用胰酶消化成单个细胞后，再按一定密度接种

作者: dmmwhb 时间: 2011-12-2 17:16

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谢谢，是离心收集细胞球后加胰酶消化10分钟左右后再加培养液离心收集细胞，然后再加培养液吹打成单细胞悬液接种吗

作者: 一枝独秀 时间: 2011-12-6 16:37

是的，不过使用的不是普通的胰酶，而是2 ML TrypLETM express (Invitrogen cat. no. 12604-021)，37度水浴消化20分钟

作者: yxzxlmlf 时间: 2013-1-31 15:03

回复 dmmwhb 的帖子$ S2 ~# Y+ u. S; b+ {# S

用0.05%胰酶消化就行

作者: yehaizi 时间: 2013-6-19 18:46

回复一枝独秀的帖子3 i2 n0 `6 n' X, R( x) m$ Y
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那如果用的是胰酶消化，在后续表面标记筛选的时候会不会对细胞的表面标记有影响？

作者: 细胞海洋 时间: 2013-6-19 20:28

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作者: fengjh100 时间: 2013-7-9 00:17

低于1000个/ml细胞浓度，加3ml培养液，请问多长时间换液？传代是吹打成单细胞后一个板传两个板或一瓶传两瓶吗？3 r# a; Z* A) b
我根据自己的经验提示下吧，3ml培养液，一般细胞不是很多的话4-5天更换一次液体是可以的，因为是悬浮细胞，可以3-4天加液。传代不需要吹散，因为干细胞球很难吹打或消化成单个细胞的，除非强力消化，那样细胞状态就不好了。我的经验是直接吸取一半的细胞到另瓶中，继续饲养。等养足够数量了再消化。不知回答可否满意。

作者: lily132 时间: 2016-7-18 14:30

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你好fengjh100,! _2 G* X% P8 b6 I. p
你说“我的经验是直接吸取一半的细胞到另瓶中，继续饲养。等养足够数量了再消化”。请问你养多少天才能养够数量，细胞球长到多大？

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