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标题: DMEM/F12培养基颜色问题 [打印本页]

作者: dmmwhb 时间: 2011-12-1 08:55 标题: DMEM/F12培养基颜色问题

我用双蒸水溶解DMEM/F12粉，根据说明书用碳酸氢钠调PH后液体呈深红色，用来养肿瘤干细胞，是否是正常的？

作者: songzxj 时间: 2011-12-1 09:02

没有自己配制过，但是我用的买的DMEM/F12不是深红色，建议拿出部分测下PH。

作者: chuanbaozang 时间: 2011-12-1 09:08

不能调到深红色，应该是浅红色才对, Q. S+ A }" n. U8 p
我们是一边调节一边用pH计来测其pH值的，一般调节到7.0-7.2，然后经过过滤，因为在过滤过程中pH会上升0.2左右。
细胞对酸性的耐受力较碱性要强，所以建议你以后在加上碳酸氢钠后再进行调节一下，不要太碱了

作者: zxiaoxiao311 时间: 2011-12-1 09:23

DMEM/F12的颜色调至深红色只是一个经验值，是在多次配制时所积累的经验。你作为新手，要知道一般对培养基的Ph值是有要求的，多为7.2-7.4，建议根据你试验条件的要求，选用相应的Ph试纸进行测定，这样更准确一些。

作者: dianying 时间: 2011-12-1 10:25

回复 zxiaoxiao311 的帖子
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DMEM/F12 pH 7.3 ± 0.2是对的，颜色和pH有关系是肯定的，但是用试纸不可靠。pH meter 更好些。

作者: ytumuyangren 时间: 2011-12-1 10:57

本帖最后由 ytumuyangren 于 2011-12-1 10:58 编辑
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一代粉剂DMEM可以配置一升，需要NaHCO3的量是3.7g，Vc的量是50mg，4 Y3 \' `& ]% K- N5 o1 l
一代粉剂DF12可以配置一升，需要NaHCO3的量是1.2g，Vc的量是50mg，两者都不用调节PH值，DMEM的颜色比DF12的颜色红，DF12的颜色略微偏黄，然后根据你的需要加入需要量的血清。( x% v) e) Q: x* |- ]7 ~! }8 j2 b
祝你试验顺利。

作者: echowdk 时间: 2011-12-1 13:02

回复 dmmwhb 的帖子, ?2 n- i/ a0 B) c' n! e
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哈，貌似偏碱了。楼上的说的很清楚了，关于PH值的范围。我们实验室的经验是，在配置1LDMEM溶液的条件下，加3.7g 的NaHCO3和350ul的浓盐酸，屡试不爽，楼主可以参考下。

作者: 1301918986 时间: 2011-12-1 13:24

DMEM/F12 调pH值在7.2-7.4时的颜色应该比DMEM的颜色浅一点，不是深红的。

作者: dmmwhb 时间: 2011-12-2 16:57

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谢谢，你们也是用来养干细胞的吗？

作者: rongrong 时间: 2011-12-2 17:55

深红色肯定是过碱了，那个颜色就是告诉我们在使用前这个培养基是否合适，因为配置完成的基础培养基的酸碱度会随着时间越长越偏碱性，所以最好还是测下PH值，而且要是才配的培养基那是肯定不行的，一定要用PH计测试一下范围在7.2-7.4，否则时间越长越碱，细胞会无法适应，就会半死不活的苟且着，无法开展实验的

作者: dmmwhb 时间: 2011-12-2 18:57

谢谢ls各位，不好意思啊，我加的碳酸氢钠算错量了，就是偏碱啦

作者: zhanglei1414 时间: 2011-12-2 21:27

楼主还停留在配置培养基的时代吗？直接买现成的呗，一瓶够你用几个月的了

作者: siyue13 时间: 2011-12-3 13:26

楼上的怎么知道楼主的用量呢，用干粉估计是用量比较大，自己配是比较划算。

作者: 透明之蓝 时间: 2011-12-13 14:48

我们用的直接购买的一般都偏橙色~~

作者: sguy 时间: 2011-12-16 11:06

我们配制时候颜色是偏黄的，两外也没有加入VC之类的，就是用粉末配制完成之后加入1.2的碳酸氢钠，过滤。也没有调过PH。

作者: suning5 时间: 2011-12-16 11:31

GIBCO，在国内都有设厂，买原液不算贵，建议直接买原液

作者: hub12333 时间: 2012-2-9 10:06

颜色的变化由于PH值不同造成的，培养基用久了有的也会出现颜色变化，这时检测下PH值，看这时的PH值是否在你培养细胞的范围，只要在，继续用也没什么事。

作者: dandan9230 时间: 2012-2-9 14:08

一般来说配制都是根据说明书来的。只是配好之后F12颜色没有DMEM那么红，稍微显黄色

作者: 毛毛520 时间: 2012-2-10 09:57

学习了

作者: xiangchou812 时间: 2012-2-10 10:03

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请教一下，你加了NaHCO3后再加那么多浓盐酸是出于什么目的？而且还是“屡试不爽”？直接把NaHCO3小加点不OK了？

作者: 荷荷 时间: 2012-2-10 16:20

培养液的PH值对细胞生长影响很大的。所以说不管是自己配制的还是购买的培养液，在使用过程中放置一段时间后都会偏碱。如果发现颜色变深，最好还是用PH计测下，在正常范围可以接着用，不在正常范围的可以稍微松下瓶口，要重新调节。我们以前曾把培养瓶口稍松放培养箱调节。

作者: 透明之蓝 时间: 2012-2-14 16:25

不是深红色，接近橙色的！

作者: xbs530515 时间: 2012-2-17 09:35

以前配培养基都没有仔细调pH，配好了用试纸测一下，大致可以了就行。后来买了商品化的瓶装的培养基，发现颜色很浅，觉得有点不对。之后配培养基都精确调节了pH，发现只要是酚红为指示剂的培养基，如1640,DMEM,IMDM,F12等，在pH7.0左右都应该是浅红色，有点带黄色，所以深红色的培养基，pH肯定偏高了。还有就是培养基在除菌过滤后pH会提供0.1-0.2，在配制时，调pH应该比预期的低一点。

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