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标题: 怎样获取单个集落里的干细胞 [打印本页]

作者: marshall80 时间: 2011-12-1 12:20 标题: 怎样获取单个集落里的干细胞

在一个培养皿里，形成了一些干细胞的集落，但周围也有很多分散的已经分化的细胞，怎样才能单独获取这些集落里的干细胞呢？有什么好的建议或者方法请告知。非常感谢！

作者: echowdk 时间: 2011-12-1 12:59

回复 marshall80 的帖子; G6 D6 r* `3 ]$ w; M9 P: _+ S7 l. @

可以挑克隆的吧。具体操作自己查一下《小鼠胚胎操作》这本书，很详细。

作者: fguw 时间: 2011-12-1 15:55

可以使用机械法在显微镜下挑出没分化的克隆，

作者: marshall80 时间: 2011-12-2 17:49

回复 fguw 的帖子 W j/ l$ M$ g, L1 T3 H: e" i

能说得具体点吗？谢谢！7 B8 b& T P6 d5 B0 G; Q8 {

作者: marshall80 时间: 2011-12-2 17:55

谢谢你们的回复，我需要获取同一培养皿内的colony, 各位兄弟姐妹有什么好的方法，请指点。

作者: fguw 时间: 2011-12-14 06:58

你是说想从同一DISH里面挑出部分克隆？& I/ ]1 r- K/ F4 `- ^9 c1 f
你首先用MARKER笔在你要挑的克隆下方标记上，然后在解剖镜下找到克隆，用注射器（带针头）或者用作试验的枪把克隆挑出来，接种到有饲养细胞的板上，我知道有些实验室用口吸管（就是用吸管连接一个烧了的玻璃毛细管），这个需要用嘴巴来控制气流。
新手可能需要练习这些，

作者: yinjiqingqq 时间: 2011-12-14 10:05

分离克隆有两个办法：
1. 像楼上说的将克隆团转移出来（说的已经很详细了）$ d$ u. Z& \* m2 I% {+ B! Q
2.将你所需要的克隆团镜下圈出来，然后用细胞刮将圈外的其他分化细胞刮掉。有些分化的细胞随着长时间的传代，就会挂掉了。
个人感觉，还是第一种方法比较好，但如果你以前没有挑过克隆，或是对细胞纯度要求不高，第二种方法也未尝不可。

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