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标题: 直接吹骨髓得到的MSC里面有巨噬细胞，然后细胞就不长了！是什么原因？ [打印本页]

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-3 22:56 标题: 直接吹骨髓得到的MSC里面有巨噬细胞，然后细胞就不长了！是什么原因？

培养基是F12-DMEM 10血清，就是不长，怎么回事？求各位同志解答！！万分感谢~！！

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-3 23:26

各位同志帮帮忙分析一下啊~~~

作者: 不苦的药 时间: 2011-12-3 23:59

你是质原代吗，几天了。有没有感染，是不是接种密度太低

作者: 细胞海洋 时间: 2011-12-4 00:42

本帖最后由细胞海洋于 2011-12-4 00:42 编辑 ! F: n- Z5 ] K8 o# u. V! {

回复 zhuzhoujie24 的帖子, A: E) X) ^- s7 f

周末人比较少耐心等待一下

作者: 飞翔的十字架 时间: 2011-12-4 00:54

回复 zhuzhoujie24 的帖子9 e7 }) r2 F6 m

请说的详细一点
是直接观察到巨噬细胞？
原代接种密度多少？培养几天了？; l; T1 U2 b4 c& ^! s- t
我原来也碰到过细胞长的很慢的情况，应该是MSC非常少，3天后换液发现贴壁细胞都没几个，但放孵箱5-7天后朝阳长出来

作者: luoziwei 时间: 2011-12-4 10:51

做原代的话，最好增加原代的骨髓量，最好上传图才能看的仔细一些。

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:44

回复不苦的药的帖子, z `0 k5 \0 l; E

是小鼠的原代，做过很多次了，就是不长，或者长的很慢慢很慢，接种2个星期了！是不是巨噬细胞对MSC生长有影响啊

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:44

回复不苦的药的帖子" W) r# r! r" k" [
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是小鼠的原代，做过很多次了，就是不长，或者长的很慢慢很慢，接种2个星期了！是不是巨噬细胞对MSC生长有影响啊

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:45

回复细胞海洋的帖子

谢谢！！

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:46

回复飞翔的十字架的帖子6 s' {0 G7 U. ?. w0 A( P" q
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嗯，直接观察到了，我没有用离心的办法纯化细胞，是通过换液出去造血干细胞的

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:49

回复 luoziwei 的帖子8 c9 M1 `' R9 k7 N, E/ p
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骨髓的量？什么意思？就是增加接种密度？那你一般是怎么接种的啊？

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:53

回复飞翔的十字架的帖子, s3 t k) t! D

请问你做的是小鼠的MSC吗？还有，你离心纯化了吗？如果是一般的组织原代长势一般都很正常啊

作者: zhuzhoujie24 时间: 2011-12-4 15:53

回复飞翔的十字架的帖子

请问你做的是小鼠的MSC吗？还有，你离心纯化了吗？如果是一般的组织原代长势一般都很正常啊

作者: liluli0715 时间: 2011-12-4 21:50

如果有杂细胞影响MSC的生长，你可以考虑用 Ficoll-Paque Premium™ -(GE Healthcare）分离，540g，离心20min，吸出分界面的细胞，再用培养液重悬。不同的培养基和FBS，不同供体的年龄对细胞的生长影响不一样。至于选择什么样的培养基和FBS，你可以做个比较。建议选GIBICO的培养基和牛血清，本人比较过hyclone效果不是很好。

作者: 不苦的药 时间: 2011-12-6 23:38

回复 luoziwei 的帖子

你两个股骨多大接种到的皿

作者: zhpeng07 时间: 2011-12-7 09:13

如果是全骨髓接种，你最好裂红，记一下有核细胞的数，看一下接种密度。

作者: luoziwei 时间: 2011-12-7 10:58

回复不苦的药的帖子
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没看明白你问的意思？

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