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标题: 培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床？ [打印本页]

作者: xu_shufen 时间: 2011-12-6 07:48 标题: 培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床？

本帖最后由细胞海洋于 2011-12-6 08:08 编辑
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各位同仁好，我现在培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床将面临很多问题，比如栓塞。如果过滤细胞将会损失很多细胞。希望大家帮助。

作者: linghuchong123 时间: 2011-12-6 08:31

没有震荡器吗，用什么酶消的，

作者: 大少爷 时间: 2011-12-6 08:35

混匀冲洗，吹打开，再过滤，再传一代培养。

作者: dyg108 时间: 2011-12-6 09:12

请说明一下做的什么来源的MSC，用的什么方法，胰酶消化液的配方是什么，在什么样的温度下消化多长时间？* m# d, _& L% x8 e+ T& |+ \$ |
说明了这些问题以后才好判断究竟是怎么回事，用什么解决办法

作者: 漂泊的风 时间: 2011-12-6 15:31

估计是胰酶的浓度太高了，0.25%的吧？建议你适当地降低一下胰酶的浓度（比如0.125%），这样也许会使细胞分得比较开。

作者: xu_shufen 时间: 2011-12-7 07:26

谢谢！我准备试一下

作者: xu_shufen 时间: 2011-12-7 07:31

回复 dyg108 的帖子; p7 r/ y; i2 v1 X
' P5 z# s8 b( c
我用的是INVITRIGEN的商品胰酶，室温下消化，我现在正在准备降低胰酶浓度。

作者: tingwuyu 时间: 2011-12-8 08:34

原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

作者: beijingren 时间: 2011-12-13 18:27

tingwuyu 发表于 2011-12-8 08:34
4 w o D& e$ d! U# \0 d) I2 ?原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

楼主的意思将来可能会用到临床啊
我觉得楼主想问问题又有所保留
胰酶的浓度啊，室温多少啊，时间也没讲
这个问题我觉得没有保密的意义呀( g( R6 s, O$ B v! @
如果不愿意说，楼主可考虑尝试改变胰酶浓度和消化时间摸索消化条件，注意消化后细胞的活力哦

作者: shashou_com 时间: 2012-2-2 22:48

细胞团最好是别用来直接治疗。& n0 s4 g: \2 L7 F
你要么除去细胞团，要么重新培养。

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