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标题: 有关细胞接种密度的问题! [打印本页]

作者: 帝国黑骑士    时间: 2011-12-8 15:46     标题: 有关细胞接种密度的问题!

本帖最后由 帝国黑骑士 于 2011-12-8 15:54 编辑
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0 s' J7 k7 l# K  文献上说,接种密度的影响细胞增殖的重要因素,低密度接种是细胞的增殖能力明显提高,而诱导分化时则需要较高的密度。这让我很纠结,应为有些人说接种的太稀又会引起细胞老化,那么如何控制这个细胞接种中密度呢?到底是那个说法更准确些呢?   b0 y4 U  B  T$ W4 K

作者: wangzhiqi86    时间: 2011-12-8 16:16

这要看你做什么分化,你用的什么细胞,加的什么诱导培养基,密度多和少没有绝对的概念
作者: wangzhiqi86    时间: 2011-12-8 16:16

这要看你做什么分化,你用的什么细胞,加的什么诱导培养基,密度多和少没有绝对的概念
作者: liluli0715    时间: 2011-12-8 20:09

建议用孔板做个细胞密度摸索,找出最佳的密度;如果做分化实验,先按照外文文献来,最好所有条件都不变,看能不能做出来。然后再改变密度,看下结果,所有的实验不太可能一次就做的好的
作者: 帝国黑骑士    时间: 2011-12-9 09:53

回复 wangzhiqi86 的帖子/ Q/ A2 n  N7 g9 n: z

/ A7 Y! z. ^6 q: T& X脐带间充质细胞原代培养是细胞形态还好,传代P1后发现细胞形态比较大看来有分化老化的现象,培养基有高糖换成了低糖血清也换成GIBCO没明显改善,又考虑到可能是消化的问题所以消化的时候也特别小心,消化前我先把胰酶放到37度,见细胞形态回缩就立即终止了,情况还是没改善。
作者: wangzhiqi86    时间: 2011-12-9 10:30

回复 帝国黑骑士 的帖子2 K" a+ S7 Q$ |6 ]' Q5 t

$ t( I  k4 I3 D% @$ ~2 u是不是原代细胞本身就有问题,传代之后就显现出来了
作者: zhpeng07    时间: 2011-12-9 11:18

回复 wangzhiqi86 的帖子
: R% Z# }3 B0 `0 |" S0 W9 e- z
6 b) v( r5 K7 ]和楼上的想法一样,原代细胞可能就有问题,进一步推测,你的培养体系是不是就有问题?
作者: yanwu_1    时间: 2011-12-9 11:41

原代杂细胞是不是太多了?如果不是所有的细胞都是这样,说明培养体系没有问题;原代传代的话,是不是杂细胞也消化下来了。。。。。。! j/ g7 x9 N- t* K" E, L6 i* n

作者: yanwu_1    时间: 2011-12-9 11:42

杂细胞太多,影响细胞贴壁,也影响细胞生长的




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