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标题: plat-E细胞的转染试剂 [打印本页]

作者: zhangtang 时间: 2011-12-15 09:17 标题: plat-E细胞的转染试剂

我想问一下培养plat-E细胞进行抗性筛选的Blasticidn S and Puromycin，大家是买现成的呢还是自己配的呢？还有转染plat-E细胞进行转染时用哪种转染试剂比较好呢？Lip200,Fugene6还是LipLTX，希望得到大家的尽快回复哈，谢谢！

作者: ljzmy82 时间: 2011-12-15 09:24

钙转就不错，而且价格便宜

作者: zhangtang 时间: 2011-12-15 09:29

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你是指磷酸钙法嘛？那这个液体自己配还是买现成的呢？

作者: zhangtang 时间: 2011-12-15 09:54

回复 zhangtang 的帖子) ^( y. Q$ Q( [6 `

呵呵，我错了，刚才百度了一下，是一个试剂盒

作者: 关文静 时间: 2011-12-15 10:20

lip ltx

作者: echowdk 时间: 2011-12-15 10:50

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你说的这两个药，在我们实验室都是自己配置。
我们实验室用Fugene比较多。

作者: Yedan 时间: 2011-12-15 12:49

FuGENE，Roche已经停产了，如果刚开始做实验就别用FuGENE了，据说是Roche把生产线卖给了Promega，但是Promega巨坑无比，原本1ml/3000以内的FuGENE HD，Promega要卖5600，真的是要多黑有多黑啊。
Plat-E本身就是293T来的，比较好转染，Ca、Lipo2000、FuGENE HD（或者6）以及Roche新出的XtremeGENE HP，这些试剂我都用过转Plat-E，效率都很高（P.S.铺细胞的密度不太一样），具体怎么用看你们实验室的具体情况吧。

作者: zhangtang 时间: 2011-12-16 15:58

回复 Yedan 的帖子# A! _8 T: ?9 ]) B- o) I7 a
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好的，谢谢哈

作者: zhangtang 时间: 2011-12-16 15:59

回复 echowdk 的帖子 ^1 V: Z6 w' Q2 b4 ~

好的，谢谢哈

作者: 不倒翁 时间: 2011-12-16 16:31

lipo 和 Cacl2我们都常用最常用的是氯化钙自己配的一般没有问题有那两个药是自己买来配 1000X的 puro也可以配成5000X的 blasticidin 巨难用无比处理后细胞状态极差基本筛选不出来阳性克隆 puro用的比较多但是这个药反应较慢所以千万别等对照死光了再停药死到一半停药细胞会继续死

作者: huangcong1988 时间: 2012-7-25 16:18

回复 zhangtang 的帖子% M( L; M2 \3 z

想问一下，您的plat-e细胞是购自哪里？能否提供购买plat-e细胞公司的联系方式吗？非常感谢!

作者: 2006sw0657 时间: 2012-9-15 15:13

回复 echowdk 的帖子
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你好请问Blasticidn S and Puromycin在哪买的贵不？

作者: huangcong1988 时间: 2012-9-15 20:00

回复 2006sw0657 的帖子4 F+ c3 J' _7 ?7 H: {9 e( C

想问一下，您的plat-e细胞是购自哪里？能否提供购买plat-e细胞公司的联系方式吗？非常感谢!

作者: echowdk 时间: 2012-9-16 20:13

回复 2006sw0657 的帖子; t) V- T) B# I; q8 e( M1 Q

都是从sigma买的，有大小包装，大包装的不是很便宜（个人觉得）。

作者: lchanlon 时间: 2012-9-22 10:53

回复 zhangtang 的帖子3 z) l5 A% [8 ~% S4 J- ]7 k

plat-E is derived from 293T cells. I think calcium phoshpate method is great for this cell transfection. This reagent is low cost. save much money for you PI. You can prepare by youself. Many protocol descripe how to prepare the solution and transfect the 283T cells. Many are nature protocol.

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